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八珍汤对骨髓抑制小鼠造血调控的实验研究

作　者: 刘曾敏
导　师: 许勇
学　校: 成都中医药大学
专　业: 中西医结合
关键词: 骨髓抑制小鼠八珍汤细胞周期细胞凋亡造血调控
分类号: R285.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2008年
下　载: 84次
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内容摘要

目的:八珍汤是中医临床上常用的治疗气血两虚的经典名方。本研究拟通过八珍汤对骨髓抑制小鼠造血功能调控的影响,探明其机理,为益气补血的中医理论提供实验室依据。方法:本研究拟在骨髓抑制小鼠模型上,应用血液学常规技术、造血祖细胞培养、流式细胞分析术、免疫组织化学、半定量聚合酶链反应等技术,从细胞、蛋白质和基因表达水平等方面探讨八珍汤对骨髓抑制小鼠造血调控的作用及其机制。结果:在一定剂量或浓度范围内:（1）八珍汤能明显促进骨髓抑制小鼠骨髓有核细胞（BMC）数、外周血白细胞（WBC）数、红细胞（RBC）数和血红蛋白（Hb）的增加,对血小板（PLT）数也有明显的促进作用。（2）八珍汤能促进骨髓抑制小鼠骨髓细胞进入细胞周期,使G₀/G₁期细胞比例减少,S期和G₂/M期细胞比例增加,从而增加骨髓细胞的增殖指数（PI）。（3）八珍汤能促进骨髓抑制小鼠红系、粒系和巨核系三系造血祖细胞集落形成。（4）八珍汤能明显促进骨髓抑制小鼠骨髓组织中Bcl-2蛋白的表达,抑制Bax蛋白的表达。（5）八珍汤能明显促进骨髓抑制小鼠骨髓有核细胞EPO mRNA基因的表达。结论:一定浓度范围的八珍汤具有促进骨髓抑制小鼠造血功能的恢复,加速G₀/G₁期细胞向S期细胞以及S期细胞向G₂/M期细胞转化,从而促进骨髓细胞增殖;能促进骨髓中Bcl-2的表达和抑制Bax的表达,并通过促进骨髓EPO mRNA的表达影响骨髓造血生长因子EPO的分泌,进而促进骨髓抑制小鼠骨髓造血功能的修复。

全文目录

中文摘要  3-4
ABSTRACT  4-10
第一部分八珍汤对骨髓抑制小鼠造血影响的实验研究  10-25
  1 材料与方法  10-14
    1.1 实验动物  10
    1.2 实验材料和试剂  10-11
    1.3 主要设备  11-12
    1.4 骨髓抑制小鼠模型的建立  12
    1.5 动物分组与给药  12
    1.6 外周血细胞计数  12
    1.7 骨髓有核细胞悬液的制备  12-13
    1.8 造血祖细胞的培养  13
    1.9 细胞周期检测  13-14
    1.10 统计学方法  14
  2 结果  14-21
    2.1 八珍汤对骨髓抑制小鼠外周血、骨髓有核细胞的影响  14-17
    2.2 八珍汤对骨髓抑制小鼠造血祖细胞培养的影响  17-19
    2.3 八珍汤对骨髓抑制小鼠骨髓细胞周期的影响  19-21
  3 讨论  21-25
第二部分八珍汤对骨髓抑制小鼠骨髓细胞凋亡相关蛋白表达的影响  25-32
  1 材料与方法  25-27
    1.1 实验动物  25
    1.2 实验材料和试剂  25-26
    1.3 主要设备  26
    1.4 骨髓抑制动物模型的制备  26
    1.5 动物分组与给药  26
    1.6 骨髓细胞涂片的制备  26
    1.7 Bcl-2和Bax蛋白表达的检测  26-27
    1.8 图像分析方法  27
    1.9 统计学方法  27
  2 结果  27-29
  3 讨论  29-32
第三部分八珍汤对骨髓抑制小鼠基因表达的实验研究  32-40
  1 材料与方法  32-36
    1.1 实验动物  32
    1.2 主要材料和试剂  32-33
    1.3 主要设备  33
    1.4 骨髓抑制小鼠模型的制备  33
    1.5 动物分组与给药  33
    1.6 八珍汤对骨髓抑制小鼠EPO mRNA基因表达的影响  33-36
      1.6.1 小鼠骨髓细胞总RNA提取  33-34
      1.6.2 RNA质量的鉴定  34
      1.6.3 cDNA的合成  34-35
      1.6.4 EPO mRNA PCR扩增和凝胶电泳分析  35-36
    1.7 图像分析方法  36
    1.8 统计学方法  36
  2 结果  36-38
  3 讨论  38-40
总结  40-41
问题和展望  41-42
参考文献  42-47
致谢  47-48
附件1 综述  48-53
附件2 在校期间公开发表的学术论文、专著及科研成果  53-55
附图  55-58

八珍汤对骨髓抑制小鼠造血调控的实验研究

内容摘要

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