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山西道地药材黄芪中黄酮类有效成分指纹图谱及体外代谢研究

作　者: 张海红
导　师: 张淑秋
学　校: 山西医科大学
专　业: 药剂学
关键词: 蒙古黄芪黄酮指纹图谱体外代谢高效液相
分类号: R284
类　型: 硕士论文
年　份: 2008年
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内容摘要

蒙古黄芪（Astragalus membranaceus（Fish.） Bge.var. mongholicus （Bge.） Hsiao）为豆科黄芪属植物,性温,味甘,有补气固表,利尿托毒,敛疮生肌,益气补中之功效。主要用于食少便溏,中气下陷,久泻脱肛,便血崩漏,表虚自汗,气虚水肿,子宫脱垂,慢性肾炎蛋白尿,糖尿病,创口久不愈合。其化学成分众多,主要有效成分为黄酮类、皂苷类及多糖类。近年来,对于黄芪的化学成分、指纹图谱及有效成分代谢的研究日益深入,本文建立了黄芪中两种黄酮类主要成分的含量测定方法,建立了黄芪中黄酮类成分的指纹图谱并初步研究了黄酮类成分的体外代谢。根据黄酮类成分的紫外吸收特征,本实验以254 nm为检测波长,采用反相-高效液相色谱法（RP-HPLC）建立了芒柄花素和毛蕊异黄酮的含量测定方法,通过对方法的线性、精密度、回收率等的考察,结果表明:芒柄花素在1～40μg/mL的浓度范围内线性良好,日内、日间精密度均小于2%,加样回收率在98.0%¹02.0%之间,符合《中国药典（2005版）》要求;毛蕊异黄酮在1～100μg/mL的浓度范围内线性良好,日内、日间精密度均小于2%,加样回收率在98.0%¹02.0%之间,符合《中国药典（2005版）》要求,为黄芪的有效成分含量测定提供了准确、精密的方法。在单因素实验的基础上,以芒柄花素含量为指标,用正交设计法对影响超声提取的因素如乙醇浓度、乙醇用量、提取次数和超声时间进行考察,优化黄酮类成分的提取工艺,优化的提取条件为加15倍量75%乙醇,连续提取3次,每次20 min。采用梯度洗脱模式研究了5批蒙古黄芪中黄酮类成分的指纹图谱,定性了蒙古黄芪中毛蕊异黄酮苷、毛蕊异黄酮和芒柄花素三种主要的黄酮类成分,结果表明:5批黄芪药材有8个共有峰,其HPLC指纹图谱基本一致,其共有峰保留时间的相对比值基本一致,共有峰面积之和均大于各总峰面积的90%,但其共有峰面积的相对比值有一定差异。采用大鼠肝微粒体和胃肠道内容物体外孵化方法初步研究了黄酮类有效成分的代谢途径及降解速度,结果表明,毛蕊异黄酮苷、毛蕊异黄酮和芒柄花素在肝微粒体中代谢率为22.64%、31.18%、55.42%,表观一级降解速度常数分别为0.267 h^-1（r = 0.992）、0.386 h^-1（r = 0.991）、0.826 h^-1（r = 0.996）;毛蕊异黄酮苷和芒柄花素在胃内容物中的代谢率为33.45%、38.06%,表观一级降解速度常数为0.198 h^-1（r = 0.962）、0.232 h^-1（r = 0.938）,毛蕊异黄酮苷和芒柄花素在十二指肠内容物中的代谢率为100%、30.47%,表观一级降解速度常数为0.944 h^-1（r = 1）、0.188 h^-1（r = 0.963）。毛蕊异黄酮苷在肝微粒体、胃、十二指肠内容物孵化液中被水解生成毛蕊异黄酮。

全文目录

摘要  6-7
Abstract  7-9
前言  9-12
第一章蒙古黄芪中芒柄花素和毛蕊异黄酮含量测定方法的建立  12-19
  1.1 仪器和试剂  12
  1.2 方法和结果  12-17
  1.3 讨论  17-19
第二章蒙古黄芪中黄酮类成分提取工艺的优化  19-24
  2.1 仪器和试剂  19
  2.2 方法和结果  19-23
  2.3 讨论  23-24
第三章蒙古黄芪中黄酮类有效成分指纹图谱研究  24-31
  3.1 仪器和试剂  24
  3.2 方法和结果  24-30
  3.3 讨论  30-31
第四章蒙古黄芪中黄酮类成分在大鼠肝微粒体和胃肠道的体外代谢研究  31-45
  4.1 仪器和试剂  31
  4.2 方法和结果  31-43
  4.3 讨论  43-45
参考文献  45-47
综述  47-53
个人简介  53-54
致谢  54

山西道地药材黄芪中黄酮类有效成分指纹图谱及体外代谢研究

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