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临汾地区淋病奈瑟菌临床分离株对环丙沙星耐药基因研究

作　者: 侯临平
导　师: 李连青
学　校: 山西医科大学
专　业: 免疫学
关键词: 淋病奈瑟菌环丙沙星耐药性 gyrA基因
分类号: R759.2
类　型: 硕士论文
年　份: 2008年
下　载: 29次
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内容摘要

目的了解临汾地区淋病奈瑟菌对环丙沙星的耐药性及其与gyrA基因QRDR(喹诺酮类耐药决定区)之间的关系,为探索建立快速、有效的淋病奈瑟菌耐药菌株基因检测方法提供依据。方法采集33例临汾地区淋病奈瑟菌感染病例标本,通过分离、鉴定、纯培养,以及K-B纸片法药物敏感试验筛选出对环丙沙星耐药菌株33株,设计对应于淋球菌gyrA上QRDR区基因片段的引物,经过聚合酶链式反应(PCR)扩增其目的基因片段,并对扩增产物进行DNA序列测定,明确gyrA基因突变的情况。结果33株淋病奈瑟菌临床分离株对环丙沙星全部耐药;所有耐药菌株均经PCR扩增出大小为225bp(对应于QRDR)的基因片段;测序结果显示耐药菌株都发生了91位点突变(Ser-91→Phe),其中单独91位点突变的有3株,发生91和95双位点突变的有30株,95位点突变类型有三种:Asp-95→Gly, Asp-95→Asn, Asp-95→Ala,以Asp-95→Gly最为常见,有19株,占gyrA 95位点突变株的63.3%。结论临汾地区淋病奈瑟菌临床流行株对环丙沙星的耐药情况很严重;gyrA基因突变在淋病奈瑟菌对环丙沙星耐药中起着重要作用;对环丙沙星耐药的淋球菌gyrA基因突变位点和突变类型比较稳定;应用PCR和DNA测序技术可以快速准确地检测gyrA基因的突变,为临床诊断提供更有效的理论依据。

全文目录

摘要  4-5
Abstract  5-7
前言  7-8
1 材料和方法  8-12
  1.1 标本收集  8
  1.2 主要试剂及药品  8-9
  1.3 主要仪器  9
  1.4 主要试剂配制  9
  1.5 实验方法  9-12
2 结果  12-14
  2.1 药敏试验结果  12
  2.2 PCR 扩增产物电泳分析结果  12-13
  2.3 gyrA 基因序列分析结果  13-14
3 讨论  14-17
结论  17-18
参考文献  18-20
综述  20-28
个人简介  28-29
致谢  29

临汾地区淋病奈瑟菌临床分离株对环丙沙星耐药基因研究

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