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KIT基因与猪毛色和仔猪初生重相关的研究

作　者: 任丽琴
导　师: 曹洪战
学　校: 河北农业大学
专　业: 动物遗传育种与繁殖
关键词: 猪 KIT基因毛色初生重
分类号: S828.8
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
下　载: 83次
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内容摘要

KIT基因对猪的毛色形成起非常重要的作用,另外发现KIT基因具有温和的多效性影响。为了阐明KIT基因与猪毛色和仔猪初生重的关系。本研究以大白猪、长白猪、杜洛克和杜长大(包括全白色和带有黑斑的个体)为实验动物,以编码肥大细胞生长因子受体的KIT基因为候选基因,通过聚合酶链式反应单链构象多态性分析(PCR-SSCP)和限制性内切酶片段长度多态性分析(PCR-RFLP)技术,并结合测序技术,研究KIT基因的多态性及其与初生重的关系,分析KIT基因与不同毛色(全白和黑斑个体)杜长大猪的相关性,分析KIT基因不同基因型与仔猪初生重的关系,为猪毛色遗传定向选用及初生重性状的选育奠定基础。结果表明:(1)三元杂交杜长大不同毛色KIT基因的多态性检测:利用限制性内切酶片段长度多态性分析(PCR-RFLP)技术和聚合酶链式反应-单链构象多态性分析(PCR-SSCP)及测序技术,检测了100头不同毛色的杜长大猪、30头杜洛克、30头长白猪和30头大白猪每一个体KIT基因内含子17、18的序列多态性。结果证明黑斑个体与长白、大白猪内含子17、18的序列一致,其KIT基因内含子17(intron17)发生了G→A的突变,内含子18(intron18)的序列中存在AGTT的缺失。(2)KIT基因不同基因型与仔猪初生重的研究:采用限制性内切酶片段长度多态性分析(PCR-RFLP)技术确定基因型(II、Ii、ii),探讨KIT基因不同基因型对仔猪初生重的影响。结果显示,不同基因型间初生重差异显著,其中,ii基因型仔猪初生重最重;不同基因型间断奶重差异不显著。因此推论,基因KIT对仔猪初生重有显著影响。

全文目录

摘要  5-6
Abstract  6-10
1 引言  10-23
  1.1 研究背景  10-11
    1.1.1 三元杂交杜长大猪的概况  10
    1.1.2 研究的必要性  10-11
  1.2 研究动态  11-22
    1.2.1 猪毛色遗传  11-18
    1.2.2 KIT 基因与猪的初生重遗传  18
    1.2.3 试验中所涉及的分子标记方法  18-22
  1.3 研究目的  22-23
2 猪KIT 基因的遗传变异及其与猪毛色的研究  23-37
  2.1 引言  23
  2.2 材料与方法  23-31
    2.2.1 实验动物及材料  23
    2.2.2 主要仪器设备  23-24
    2.2.3 主要试剂药品  24-25
    2.2.4 溶液试剂配制  25-26
    2.2.5 猪耳组织DNA 提取  26
    2.2.6 提取基因组DNA 的OD 测定  26-27
    2.2.7 引物的设计合成  27
    2.2.8 目的片段测序  27-29
    2.2.9 聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）  29-30
    2.2.10 SSCP 检测后差异个体的克隆测序  30-31
  2.3 结果与分析  31-35
    2.3.1 猪耳组织基因组DNA 的提取结果  31-32
    2.3.2 KIT 基因的 PCR 扩增结果  32
    2.3.3 Intron17 的 PCR-RFLP 分析  32-33
    2.3.4 intron 18 PCR-SSCP 检测  33-34
    2.3.5 测序结果分析  34-35
  2.4 讨论  35-37
    2.4.1 样品DNA 的提取注意的问题  35-36
    2.4.2 PCR 扩增的影响因素  36
    2.4.3 KIT 基因与杜长大猪毛色的关系  36
    2.4.4 进一步的工作  36-37
3 KIT 基因不同基因型与仔猪初生重的研究  37-42
  3.1 引言  37
  3.2 材料与方法  37-38
    3.2.1 实验动物及材料  37
    3.2.2 主要仪器设备  37
    3.2.3 主要药品试剂  37-38
    3.2.4 猪耳组织 DNA 的提取  38
    3.2.5 引物的设计合成  38
    3.2.6 PCR 扩增  38
    3.2.7 RFLP 检测  38
    3.2.8 统计数据  38
  3.3 结果与分析  38-40
    3.3.1 KIT 基因PCR 扩增产物  38-39
    3.3.2 KIT 基因RFLP  39-40
    3.3.3 KIT 基因与仔猪初生重影响  40
  3.4 讨论  40-42
    3.4.1 影响仔猪初生重的因素  40
    3.4.2 KIT 基因与仔猪初生重  40-41
    3.4.3 进一步工作  41-42
4 结论  42-43
参考文献  43-49
在读期间发表的学术论文  49-50
作者简历  50-51
致谢  51-52

KIT基因与猪毛色和仔猪初生重相关的研究

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