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柴胡疏肝散对抑郁模型大鼠海马乙酰胆碱代谢的影响
作 者: 董海影
导 师: 张晓杰
学 校: 黑龙江中医药大学
专 业: 中西医结合基础
关键词: 柴胡疏肝散 抑郁症 ChAT AChE 细胞凋亡
分类号: R285.5
类 型: 硕士论文
年 份: 2009年
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内容摘要
目的观察抑郁症模型大鼠海马ACh代谢的变化规律及柴胡疏肝散对其影响,进一步探讨胆碱能神经系统在抑郁症发生发展过程中所起的作用以及柴胡疏肝散的抗抑郁作用机制。方法4~5月龄的Sprague-Dawley雄性大鼠,通过行一次敞箱实验,剔除分数高于120或低于30的大鼠后,60只SD大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、西药对照组和中药治疗组,共4组,每组15只。对照组每笼饲养5只,常规饲养,不予任何刺激与治疗。模型对照组、西药对照组和中药治疗组大鼠每笼1只孤养。接受21d慢性轻度不可预见性应激刺激。西药组和中药组大鼠在造模的同时分别给予氟西汀及柴胡疏肝散干预,模型组给予等体积生理盐水。21d后,采用敞箱实验、糖水消耗量检测和体重检测等指标评定大鼠行为学改变,采用免疫组织化学染色法观察大鼠大脑组织海马区ChAT与AChE的蛋白表达变化,应用RT-PCR检测ChAT mRNA的表达,利用比色法检测大鼠大脑组织海马区的AChE活性,采用电镜观察大脑组织海马CA3区超微结构变化,同时利用流式细胞术检测大脑组织海马CA3区的细胞凋亡。结果1、柴胡疏肝散增加抑郁模型大鼠体重、糖水偏爱度、水平运动得分和垂直运动得分。造模7d后,与正常对照组相比,模型组水平运动得分与垂直运动得分明显降低(P<0.05),糖水偏爱度与体重增长都有降低趋势但无显著性差异(P>0.05),与模型组相比,西药组和中药组水平运动得分、垂直运动得分均升高(P<0.05),体重与糖水偏爱度均无显著性差异(P>0.05);造模14d后,与正常对照组相比,模型组的水平运动得分、垂直运动得分、体重与糖水偏爱度均明显降低(P<0.05-0.01),与模型组比较,西药组和中药组水平运动得分、垂直运动得分与糖水偏爱度均明显升高(P<0.05~0.01),体重也升高但无显著性差异(P>0.05);造模21d后,与正常对照组相比,模型组水平运动得分、垂直运动得分、体重和糖水偏爱度继续明显降低(P<0.01~0.001),与模型组比较,西药组和中药组水平运动得分、垂直运动得分、糖水偏爱度与体重均明显升高(P<0.05~0.001)。2、柴胡疏肝散具有下调抑郁模型大鼠海马组织ChAT的蛋白和mRNA表达的作用。RT-PCR结果显示,与正常对照组相比,模型组大鼠海马区ChAT mRNA表达明显上调(P<0.05),与模型组相比,西药组、中药组海马区ChAT mRNA明显下调(P<0.05);但西药组ChAT mRNA下调较中药组明显。免疫组化法结果显示,与正常对照组相比,模型组海马区ChAT的蛋白表达明显升高(P<0.05);与模型组相比,西药组和中药组大鼠海马区ChAT的蛋白表达均明显降低(P<0.05)。3、柴胡疏肝散降低抑郁模型大鼠海马组织AChE活性和蛋白表达。比色法结果显示,与正常对照组相比,模型组海马区AChE活性明显升高(P<0.05);与模型组相比,西药组、中药组海马区AChE活性明显下降(P<0.05)。免疫组化法结果显示,与正常对照组相比,模型组海马区AChE的蛋白表达明显升高(P<0.05);与模型组相比,西药组、中药组海马区AChE的蛋白表达均明显降低(P<0.05)。4、柴胡疏肝散抑制抑郁模型大鼠海马组织的细胞凋亡。流式细胞术检测结果显示,与正常对照组相比,模型组海马CA3区凋亡细胞平均数明显增加(P<0.05);与模型组相比,西药组、中药组海马CA3区凋亡细胞平均数明显减少(P<0.05)。同时,电镜观察结果也显示,海马凋亡细胞主要集中在模型组、西药组和中药组。结论1、CMUS结合孤养建立的大鼠模型,可较好地模拟抑郁症行为学表现,可作为抑郁症模型之一。2、柴胡疏肝散具有改善实验动物的抑郁症状作用。3、胆碱能神经系统与抑郁症发生发展有密切关系。4、柴胡疏肝散抗抑郁症的作用可能与其抑制大脑组织海马区ChAT蛋白和mRNA表达、降低大脑海马区AChE活性和蛋白表达,减少大脑海马区神经细胞凋亡有关。
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全文目录
目录 2-4 英文缩略语表 4-5 中文摘要 5-7 Abstract 7-10 前言 10-12 第一部分 文献综述 12-25 一、抑郁症的现代医学研究进展 12-19 (一) 抑郁症的概述 12 (二) 抑郁症的诊断和分类 12-13 (三) 抑郁症的病因与病机研究进展 13-16 (四) 抑郁症的动物模型研究进展 16-19 二、抑郁症相关胆碱能神经系统的研究进展 19-22 (一) 中枢胆碱能通路 19-20 (二) ACh代谢 20 (三) 胆碱能的生理功能 20-21 (四) ACh与抑郁症的关系 21-22 三、抑郁症的中医学研究进展 22-25 (一) 抑郁症与“郁证” 22-23 (二) 病因病机 23 (三) 辩证治疗 23-25 第二部分 实验研究 25-41 一、实验材料 25-27 (一) 实验动物 25 (二) 实验仪器 25-26 (三) 实验试剂 26 (四) 实验药品 26-27 二、实验方法 27-32 (一) 动物分组 27 (二) 动物造模 27 (三) 给药方法 27 (四) 抑郁模型大鼠行为学的评价 27-28 (五) 各组大鼠海马区ChAT蛋白及mRNA表达的测定 28-30 (六) 各组大鼠海马区AChE蛋白表达及活性变化的测定 30-32 (七) 大鼠海马神经元形态超微结构的观察 32 (八) 大鼠海马神经元凋亡的检测 32 (九) 统计方法 32 三、实验结果 32-41 (一) 大鼠行为学评价 32-35 (二) 各组大鼠海马区ChAT蛋白表达的比较 35-36 (三) 各组大鼠海马区ChAT mRNA表达的相对值比较 36-37 (四) 各组大鼠海马区AChE蛋白表达的比较 37-38 (五) 各组大鼠海马区AChE活性的比较 38-39 (六) 各组大鼠海马超微结构变化的观察结果 39-40 (七) 各组大鼠海马神经元细胞凋亡情况的比较 40-41 第三部分 讨论 41-50 第四部分 结论 50-51 致谢 51-52 参考文献 52-60 附录 60-63 攻读硕士期间发表的论文 63-65 个人简历 65
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中图分类: > 医药、卫生 > 中国医学 > 中药学 > 中药药理学 > 中药实验药理
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