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脉冲电场对人宫颈癌Hela细胞侵袭转移能力影响的体外实验研究

作　者: 张琴
导　师: 熊正爱
学　校: 重庆医科大学
专　业: 妇产科学
关键词: 脉冲电场子宫颈癌侵袭转移 RhoC MMP-2 TIMP-2
分类号: R737.33
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
下　载: 10次
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内容摘要

子宫颈癌是女性最常见的生殖道恶性肿瘤之一,是仅次于乳腺癌位于第二位的女性恶性肿瘤。近年来其发病率有明显的上升及年轻化趋势,严重威胁到女性的健康和生命。其主要的治疗方式包括手术治疗、放疗、化疗、免疫治疗、热疗等,虽部分极早期患者可以通过手术切除治愈,但术后生活质量下降,流产、早产的发生率增高,甚至生育功能丧失,治疗效果仍不十分满意,因此需继续寻求新的治疗方式。脉冲电场是结合生物医学、电工、微电子新技术等领域治疗肿瘤的新方法,已被国内外学者作为一种单独的肿瘤治疗手段进行研究。宫颈位置易于暴露及固定,这为脉冲电场治疗宫颈癌提供了可能。前期研究证实脉冲电场能有效杀伤肿瘤细胞,抑制肿瘤的生长增殖,具有良好的抗肿瘤效应。但也同时发现在脉冲电场作用区域的边缘有肿瘤细胞残存,其侵袭转移能力的变化对脉冲电场能否安全有效应用于临床具有重要意义。目前脉冲电场对肿瘤细胞侵袭转移能力的影响少有研究,为此,本实验利用不同强度脉冲电场作用于人宫颈癌Hela细胞,探讨脉冲电场对人宫颈癌Hela细胞侵袭转移能力的影响及其可能的机制。第一部分脉冲电场对人宫颈癌Hela细胞侵袭转移能力的影响目的观察不同强度脉冲电场作用后人宫颈癌Hela细胞侵袭转移能力的变化情况,分析脉冲电场对人宫颈癌Hela细胞侵袭转移能力的影响及其相关性。材料和方法体外培养人宫颈癌Hela细胞,根据所接受脉冲电场场强的不同,细胞分为4组,空白对照组(接电极不通电源);500V/cm组;1000V/cm组;1500V/cm组。用平板克隆形成实验测定细胞克隆能力;用机械法测定细胞粘附能力;Transwell小室法测定Hela细胞体外侵袭能力和迁移能力。结果不同强度脉冲电场作用后,Hela细胞的克隆能力、粘附能力、侵袭和迁移能力均不同程度下降,且随着脉冲电场强度的增加,下降趋势愈加明显,尤其当场强>1000V/cm时,各实验组与对照组之间差异均有统计学意义(P<0.05),各实验组之间差异也有统计学意义(P<0.05)。结论脉冲电场能抑制Hela细胞的侵袭转移能力,其抑制作用与脉冲电场强度呈正相关。第二部分脉冲电场对人宫颈癌Hela细胞侵袭转移相关因子RhoC、MMP-2、TIMP-2表达的影响目的观察和分析不同强度脉冲电场对人宫颈癌Hela细胞中侵袭转移相关因子RhoC、MMP-2、TIMP-2表达的影响及其相关性。方法体外培养人宫颈癌Hela细胞,根据所接受脉冲电场场强的不同,细胞分为4组:空白对照组(接电极不通电源);500V/cm组;1000V/cm组;1500V/cm组。用RT-PCR法检测RhoC、MMP-2、TIMP-2基因mRNA的表达;用免疫荧光法检测RhoC、MMP-2、TIMP-2基因的表达。结果不同强度脉冲电场作用后,Hela细胞中RhoC、MMP-2及其mRNA的表达不同程度下降,且随着脉冲电场强度的增加,下降程度越明显,尤其当场强>1000V/cm时,各实验组与对照组之间差异均有统计学意义(P<0.05),各实验组之间差异也有统计学意义(P<0.05)。而TIMP-2基因及其mRNA的表达则随着脉冲电场强度的增加而增加,当电场强度>1000V/cm时,各实验组与对照组之间差异均有统计学意义(P<0.05),各实验组之间差异也有统计学意义(P<0.05)。结论脉冲电场对宫颈癌Hela细胞中RhoC、MMP-2表达的下调作用和对TIMP-2表达的上调作用,可能是脉冲电场抑制宫颈癌Hela细胞侵袭转移能力的作用机制之一。

全文目录

英汉缩略语名词对照  5-6
摘要  6-9
ABSTRACT  9-14
前言  14-18
  参考文献  16-18
第一部分脉冲电场对人宫颈癌Hela 细胞侵袭转移能力的影响  18-28
  1 材料  18-19
  2 方法  19-21
  3 结果  21-25
  4 讨论  25-27
  参考文献  27-28
第二部分脉冲电场对人宫颈癌 Hela 细胞侵袭转移相关因子 RhoC、MMP-2、TIMP-2 表达的影响  28-37
  1 材料  28-29
  2 方法  29-32
  3 结果  32-34
  4 讨论  34-36
  参考文献  36-37
全文总结  37-38
附图  38-43
文献综述  43-49
  参考文献  46-49
致谢  49-50
攻读硕士期间发表的论文目录  50

脉冲电场对人宫颈癌Hela细胞侵袭转移能力影响的体外实验研究

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