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环孢霉素A对大鼠缺血再灌注心肌的保护作用

作　者: 文兵
导　师: 杨双强
学　校: 重庆医科大学
专　业: 外科学
关键词: 环孢霉素 CD4~+T细胞钙调神经磷酸酶心肌缺血再灌注损伤大鼠
分类号: R965
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

目的观察环孢霉素A对缺血再灌注心肌的影响,并探讨其心肌保护的可能机制。方法将32只SD大鼠随机分为4组(n=8):假手术组(Sham)、缺血再灌注(I/R)模型组、环孢霉素(CsA)组、环孢霉素+5-羟基葵酸盐(CsA+5-HD)组。CsA、CsA+5-HD组给予CsA 15mg/kg及1mL生理盐水腹腔注射,Sham组和I/R组注入相同剂量的生理盐水,连续5d,5-HD+CsA组于术前30min加用5-HD腹腔注射(10mg/kg)。Sham组不阻断冠状动脉左前降支,其余三组阻断冠状动脉左前降支30min,复灌24h后,取左心室肌备用。采用免疫荧光染色计数浸润的CD4~+和CD3~+T淋巴细胞,ELISA检测钙调神经磷酸酶(Calcineurin,CaN)的表达,PT-PCR检测CaNmRNA的表达。HE染色观察心肌组织病理改变。结果CD4~+T淋巴细胞的免疫荧光显示,Sham组、I/R组、CsA组和CsA+5-HD组浸润的细胞量分别为(25.38±2.83)、(43.88±2.47)、(33.84±3.13)和(34.13±3.48)。其中I/R组、CsA组和CsA+5-HD组浸润的CD4~+T细胞高于Sham组(P<0.05),CsA组和CsA+5-HD组低于I/R组(P<0.05)。CD3~+T淋巴细胞的免疫荧光显示,Sham组、I/R组、CsA组和CsA+5-HD组浸润的细胞量分别为(35.75±2.96)、(62.13±3.56)、(45.86±3.44)和(46.00±3.30)。其中I/R组、CsA组和CsA+5-HD组浸润的CD3~+T细胞高于Sham组(P<0.05),CsA组和CsA+5-HD组低于I/R组(P<0.05)。CaN的ELISA检测显示,Sham组、I/R组、CsA组和CsA+5-HD组表达量分别为(12.16±1.37)、(22.62±2.70)、(17.19±1.93)和(17.51±2.15);CaNmRNA的RT-PCR检测显示,各组表达量分别为(0.97±0.05)、(1.64±0.54)、(1.06±0.05)和(1.10±0.04)。其中I/R组、CsA组和CsA+5-HD组表达量高于Sham组(P<0.05),CsA组和CsA+5-HD组低于I/R组(P<0.05)。HE染色观察心肌病理改变:Sham组的心肌细胞显示清晰组织结构,其余组心肌细胞出现不同程度的充血、水肿、变性、坏死及出血。I/R组心肌纤维大量断裂,间隙增宽,有灶性出血,心肌间质可见大量炎性细胞浸润;CsA及5-HD+CsA组心肌纤维呈波浪状,胞浆分布不均,心肌间质少量出血,有少量不等的炎性细胞浸润。结论CsA对缺血再灌注心肌可产生保护作用,其机制可能与抑制CD4~+ T细胞的激活有关。

环孢霉素A对大鼠缺血再灌注心肌的保护作用

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