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鸡FTO基因：组织特异性表达、中枢核团定位、品种差异以及禁食的影响

作　者: 王玉峰
导　师: 赵茹茜
学　校: 南京农业大学
专　业: 基础兽医学
关键词: 组织分布 品种 禁食 室旁核 腹内侧核
分类号: S831
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
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内容摘要


FTO基因(fat mass and obesity-associated gene)是人类发现的第一个与非病理性肥胖相关的基因。人们对哺乳动物FTO基因的研究已经取得了一定的进展,但鸡FTO的研究目前仍属空白。本试验分析了鸡FTO基因的组织特异性表达以及日龄和品种的影响,并检测了FTO mRNA在鸡下丘脑和丘脑的分布以及下丘脑室旁核和腹内侧核FTO mRNA丰度表达的品种差异和进食的影响,为鸡FTO功能的进一步研究提供基础资料。1鸡FTO基因的组织特异性表达以及日龄和品种的影响本研究选择1周龄及19周龄的雄性罗斯(Ross)肉鸡和莱航(Leghorn)蛋鸡,采集下丘脑、端脑、小脑、肌肉、肝脏、内脏脂肪六种主要组织器官并采用实时定量荧光PCR方法检测FTO mRNA在不同组织器官中的表达。结果显示：FTO在所检测的六个组织器官中均有不同程度表达。其中,FTO在鸡的肝脏、下丘脑、内脏脂肪和小脑有较高丰度的表达,而肌肉和端脑表达丰度相对低。总的来说,周龄及品种对FTOmRNA的组织分布模式影响不大,但有些组织存在显著的周龄和品种差异。1周龄肉鸡肝脏中FTO的mRNA表达量极显著高于同周龄蛋鸡(P<0.01)；而内脏脂肪和小脑的FTO mRNA表达量则显著地低于蛋鸡(P<0.05)。19周龄蛋鸡肝脏和内脏脂肪中FTO的表达量均极显著高于1周龄蛋鸡(P<0.01)；19周龄肉鸡下丘脑FTO的mRNA表达水平显著高于1周龄肉鸡(P<0.05),小脑中FTO的mRNA表达量则极显著高于1周龄肉鸡(P<0.01)。2 FTO在鸡-下丘脑及丘脑的表达分布本研究采用原位杂交的方法检测FTO在鸡下丘脑和丘脑的表达分布情况。原位杂交结果显示：FTO基因在下丘脑调节能量平衡的室旁核(PVN, paraventricular nucleus)、腹内侧核(VMN, ventromedial nucleus)中有表达。FTO在丘脑与视觉、采食和生殖节律有关的豆状袢前核(ALA, ansae lenticularis anterior)、丘脑前背外侧核(DLA, nucleus dorsolateralis anterior)、枕中脑束(OM, Tractus occipitomesenphalicus)、外细胞层(SCE, stratum cellulare externum)、达克谢维奇(氏)核(ND, nucleus of Darkschewitsch)、中间核(nI, nucleus intramedialis)均有表达。3禁食及品种差异对FTO在室旁核和腹内侧核表达的影响选择1日龄雄性罗斯(Ross)肉鸡和莱航(Leghorn)蛋鸡,分别分为对照和24小时禁食组。限饲处理从第6日龄开始,7日龄时屠宰采集整脑,打孔(punch)收集下丘脑室旁核和腹内侧核,提取总RNA采用实时定量荧光PCR方法检测FTO mRNA在这些核团中的相对表达量。结果显示：肉鸡室旁核内FTO表达显著高于蛋鸡(P<0.05),而腹内侧核内FTO表达未表现品种差异。肉鸡下丘脑室旁核和腹内侧核中FTO基因表达均不受禁食的影响；而蛋鸡24小时禁食后,腹内侧核FTO基因表达量显著下降(P<0.05),室旁核FTO基因表达量没有显著变化。

全文目录


摘要  7-9ABSTRACT  9-11缩略语  11-12引言  12-13第一篇 文献综述  13-35  第一章 FTO及其研究进展  13-23    1 FTO的发现、保守性及结构  13-14      1.1 FTO基因的发现  13-14      1.2 FTO的保守性  14      1.3 FTO的结构  14    2 FTO的表达分布  14-15      2.1 FTO在组织器官中的分布和表达  14-15      2.2 FTO在中枢神经系统内的表达  15    3 FTO可能的分子功能  15-16      3.1 去甲基化酶  15-16      3.2 参与炎症  16      3.3 FTO多态性可能造成的病变  16    4 FTO与肥胖的相关性研究  16-19      4.1 FTO单核苷酸多态性与肥胖的相关性  16-17      4.2 相关性在人种间的差异  17      4.3 影响相关性的一些可能因素  17-19    参考文献  19-23  第二章 FTO与能量平衡  23-35    1 下丘脑与能量平衡  23-24      1.1 下丘脑——能量调节的中枢  23      1.2 下丘脑内能量代谢相关核团  23-24    2 FTO对能量稳态的影响  24-26      2.1 影响能量利用  24      2.2 影响摄食  24-25      2.3 与能量代谢相关激素的关系  25-26    3 禽类的FTO研究  26-28      3.1 畜禽FTO研究的进展  26-27      3.2 禽类FTO研究的必要性  27-28      3.3 禽类FTO研究的空缺  28    4 本研究后下一步鸡FTO研究的可能方向  28-30    参考文献  30-35第二篇 试验研究  35-69  第三章 鸡FTO基因的组织特异性表达以及日龄和品种的影响  35-47    1 材料与方法  35-39      1.1 实验动物及饲养管理  35-36      1.2 样品采集  36      1.3 主要试剂和仪器  36-37      1.4 RT-PCR定量测定FTO基因表达  37-39      1.5 数据分析及统计  39    2 结果与分析  39-41      2.1 FTO在1周龄蛋鸡、肉鸡主要器官表达的比较  39-40      2.2 FTO在1周龄、19周龄蛋鸡主要器官表达的比较  40-41      2.3 FTO在1周龄、19周龄肉鸡主要器官表达比较  41    3 讨论  41-44    参考文献  44-47  第四章 FTO在鸡下丘脑和丘脑的表达分布  47-59    1 材料与方法  47-51      1.1 试验动物及样品采集  47      1.2 主要试剂和仪器  47      1.3 主要溶液  47-49      1.4 原位杂交测定FTO mRNA在下丘脑的分布  49-51    2 结果与分析  51-55      2.1 碱性磷酸酶显色原位杂交  51-53      2.2 FITC荧光原位杂交  53-55    3 讨论  55-57    参考文献  57-59  第五章 禁食及品种差异对FTO在室旁核和腹内侧核表达的影响  59-69    1 材料与方法  59-63      1.1 实验动物及处理  59-60      1.2 样品采集  60      1.3 主要试剂和仪器  60      1.4 打孔(Punch)采集指定核团  60-62      1.5 RT-PCR定量测定FTO基因表达  62      1.6 数据分析及统计  62-63    2 结果与分析  63-64      2.1 禁食及品种对鸡下丘脑室旁核FTO表达的影响  63-64      2.2 禁食及品种对鸡下丘脑腹内侧核FTO表达的影响  64    3 讨论  64-66    参考文献  66-69全文结论  69-71致谢  71

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中图分类: > 农业科学 > 畜牧、动物医学、狩猎、蚕、蜂 > 家禽 > 鸡
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