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21个荷花品种遗传多样性的ISSR分析

作　者: 李立升
导　师: 孔德政
学　校: 河南农业大学
专　业: 园林植物与观赏园艺
关键词: 荷花品种 ISSR 扩增遗传多样性聚类分析
分类号: S682.32
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
下　载: 26次
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内容摘要

荷花是睡莲科莲属植物,也是被子植物中起源最早的古老植物之一,具有很大的观赏价值。尤其是荷花作为我国十大名花中唯一的水生花卉,栽培历史悠久,优良品种丰富,花容花姿异常秀美,芳香沁人心脾,有水芙蓉之美称,深受世界人民的喜爱。荷花在我国广泛栽培,在城市园林绿化中有着非常重要的作用。本试验主要运用ISSR方法对21个荷花品种进行了遗传多样性的检测和聚类分析,从分子水平对部分荷花品种进行分类,主要结果如下:1.ISSR-PCR反应体系的优化,建立了一套总体积为25μL的适合荷花的ISSR分析的反应体系:5μM/LMgCl21.5μL,10×buffer 2.5μL,10 mM/L dNTPs 0.5μL,10μM/L引物1μL,30ng-50ng/μL DNA模板0.1μL,Taq DNA聚合酶5U/μL 0.5μL,覆盖一滴矿物油约30μL,补无菌水到25μL。2.UPGMA法聚类分析,用UPGMA法对21个荷花品种进行聚类,大致可分为3大类群,即第Ⅰ类群由‘重瓣八一莲’和‘小醉仙’2个品种组成;第Ⅱ类群由‘大锦’、‘春回’、‘红边玉蝶’、‘金珠落玉盘’、‘醉梨花’、‘秋翠莲’、‘黄莺’、‘高围藕莲’、‘云腾霞蔚’9个品种组成;第Ⅲ类群由‘开封藕莲’、‘刘江村藕莲’、‘张村藕莲’、‘商丘藕莲’、‘鄂莲2号’、‘白鹤’、‘鼓浪小红’、‘白君子莲’、‘小莲座’、‘粉楼台’10个品种组成。

全文目录

致谢 4-8摘要 8-9缩略词表 9-101 文献综述 10-21 1.1 荷花的起源、分类与分布 10 1.1.1 荷花的起源 10 1.1.2 荷花的分类 10 1.1.3 荷花的分布 10 1.2 荷花的生物学特性 10-12 1.2.1 荷花的形态特征 10-11 1.2.2 荷花的生态学和生物学特性 11-12 1.3 荷花的应用价值 12-14 1.3.1 在山水园林中作为主题水景植物 13 1.3.2 作为重要的夏季观赏花卉 13 1.3.3 作为插花 13 1.3.4 作为盆景 13 1.3.5 保健作用 13 1.3.6 作为美食 13 1.3.7 荷花文化 13-14 1.4 荷花种质资源保护与利用的研究进展 14-16 1.4.1 荷花种质资源保护研究进展 14 1.4.2 荷花种质资源的遗传多样性演化研究进展 14-15 1.4.3 分子标记在荷花遗传多样性中的应用研究 15-16 1.4.4 荷花新品种选育研究进展 16 1.5 DNA 分子标记概述 16-19 1.5.1 ISSR 技术的概念 17 1.5.2 ISSR 技术的特点 17-18 1.5.3 ISSR 技术的关键步骤 18 1.5.4 ISSR 技术的缺点和不足 18 1.5.5 DNA 的提取 18-19 1.6 ISSR 技术在植物遗传多样性研究中的应用 19 1.7 聚类分析在植物分类中的应用 19-212 引言 21-223 材科与方法 22-26 3.1 材料及来源 22-23 3.2 试验所用仪器与试剂 23 3.2.1 形态学性状观察所用仪器 23 3.2.2 DNA 提取及ISSR 分析所用仪器及试剂 23 3.3 荷花基因组DNA 的提取 23-24 3.4 DNA 浓度、纯度和质量的检测 24 3.4.1 核酸蛋白分析仪检测 24 3.4.2 琼脂糖凝胶电泳检测 24 3.5 PCR 扩增 24-25 3.5.1 ISSR 原初扩增条件及PCR 扩增程序 24 3.5.2 ISSR-PCR 体系优化 24-25 3.5.3 退火温度的确定 25 3.6 ISSR 数据处理 25-264 结果与分析 26-31 4.1 ISSR-PCR 体系优化结果 26-28 4.1.1 dNTPs 浓度对ISSR 扩增的影响 26 4.1.2 M92+浓度对ISSR 扩增的影响 26 4.1.3 TaqDNA 聚合酶用量对ISSR 扩增的影响 26-27 4.1.4 引物浓度对ISSR 扩增的影响 27 4.1.5 模板DNA 用量对ISSR 扩增的影响 27 4.1.6 退火温度对ISSR 扩增的影响 27-28 4.2 引物筛选结果 28-29 4.2.1 ISSR 引物筛选结果 28-29 4.3 ISSR 聚类分析结果 29-315 结论与讨论 31-33 5.1 结论 31 5.2 讨论 31-33参考文献 33-38ABSTRACT 38-40附图 40-47 附图 1:部分荷花品种图片 40-42 附图 2:筛选引物的电泳图 42-47附表 47-51

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