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毛尖蘑子实体粗多糖的提取及其对H_（22）荷瘤小鼠抑瘤作用的影响

作　者: 范晓艳
导　师: 吕冬霞；朱金玲；罗佳滨；刘爽
学　校: 佳木斯大学
专　业: 遗传学
关键词: 毛尖蘑粗多糖提取 H22荷瘤小鼠 caspase-3 caspase-8 凋亡
分类号: R285.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
下　载: 31次
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内容摘要

目的:优化毛尖蘑子实体粗多糖提取方法,探讨毛尖蘑粗多糖提取的最佳工艺。将不同浓度毛尖蘑粗多糖作用于H₂₂荷瘤小鼠,检测不同浓度毛尖蘑粗多糖作用H₂₂荷瘤小鼠后对胸腺指数、脾指数、抑瘤率的影响,通过检测凋亡相关基因Caspase-3、Caspase-8mRNA表达分析其诱导凋亡的分子机制,以期为临床上药物治疗肝癌提供新思路、新方法。方法:采用热水浸提法对毛尖蘑中的粗多糖进行提取,比较在不同浸泡温度下毛尖蘑粗多糖的提取率。将不同浓度的毛尖蘑粗多糖作用于H₂₂荷瘤小鼠,运用公式:胸腺指数（mg/g）=1000×胸腺质量（g）/体质量（g）,脾指数（mg/g）=1000×脾质量（g）/体质量（g）,抑瘤率=﹝1﹣用药组肿瘤质量（g）/阴性对照组肿瘤质量（g）﹞×100%,计算胸腺指数、脾指数、抑瘤率,观察H₂₂荷瘤小鼠免疫系统的变化及对肿瘤生长情况的影响;HE染色法观察[1]肿瘤细胞形态学的改变;RT-PCR分析caspase-3和caspase-8mRNA的表达。结果:毛尖蘑粗多糖提取过程中,温度在80℃、90℃、100℃时,提取物经过漂洗,毛尖蘑粗多糖提取率分别为3.712%、2.794%、2.040%;温度在80℃、90℃时,提取物未经过漂洗,毛尖蘑粗多糖提取率分别为1.530%、0.965%。多糖作用组与空白对照组及阴性对照组脾指数比较（p>0.05）,无统计学意义;胸腺指数明显增加。多糖作用组及阳性对照组与空白对照组做肿瘤质量比较,有统计学意义。HE染色显示毛尖蘑粗多糖高、中、低剂量组及阳性对照组,H₂₂细胞大量减少,出现凋亡小体。RT-PCR检测结果显示:毛尖蘑粗多糖高、中、低剂量组的caspase-3、caspase-8 mRNA均表达,但与阳性对照组比较有所降低（p<0.05）,有统计学意义,且毛尖蘑粗多糖高、中、低剂量三组比较caspase-3、caspase-8 mRNA表达存在高、中、低差异（p<0.05）,有统计学意义。结论:提取毛尖蘑子实体粗多糖的最佳温度是80℃,同时,提取物经漂洗后提取率提高;毛尖蘑粗多糖对小鼠免疫功能有增强的作用;毛尖蘑粗多糖对肿瘤的生长具有抑制作用;毛尖蘑粗多糖对H₂₂细胞有促凋亡作用,毛尖蘑粗多糖作用组与阴性对照组比较,caspase-3、caspase-8mRNA高表达（p<0.01）,有统计学意义,表明毛尖蘑粗多糖对发挥对H₂₂细胞促凋亡作用与死亡受体途径相关。

全文目录

中文摘要  5-7
英文摘要  7-9
前言  9-10
文献综述  10-18
材料与方法  18-25
结果  25-29
讨论  29-33
结论  33-34
参考文献  34-37
致谢  37-38
英文缩写  38-39
附图  39-41

毛尖蘑子实体粗多糖的提取及其对H_（22）荷瘤小鼠抑瘤作用的影响

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