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清肺口服液对RSV感染人胚肺成纤维细胞TGF-β_1、PDGF-BBmRNA基因表达的影响

作　者: 吴琴琴
导　师: 袁斌
学　校: 南京中医药大学
专　业: 中医儿科学
关键词: 清肺口服液 呼吸道合胞病毒 转化生长因子-β1 血小板衍生生长因子-BB 血清药理学 实时荧光定量PCR
分类号: R285
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要


目的：评价清肺口服液对呼吸道合胞病毒(RSV)的抑制作用及其量效关系,探讨清肺口服液含药血清对呼吸道合胞病毒(RSV)感染人胚肺成纤维细胞(HELF)转化生长因子-β1 (TGF-β1)、血小板衍生生长因子-BB (PDGF-BB)基因表达的影响。方法：以利巴韦林为对照组,采用MTT法,观察清肺口服液不同给药剂量对RSV的拮抗作用。RSV攻击体外培养的HELF细胞后,分别以清肺口服液含药血清,利巴韦林含药血清及空白血清干预,采用实时荧光定量PCR法(RealTime-PCR)测定各组人胚肺成纤维细胞TGF-β1、PDGF-BB mRNA表达变化。结果：清肺口服液含药血清对HELF细胞的最大无毒浓度为20%,且具有明显抗RSV的作用,与利巴韦林无显著性差异。病毒对照组较正常细胞组PDGF-BB上升为3倍、TGF-β1下降为1/3,清肺口服液含药血清组可显著降低PDGF-BB至RSV感染细胞的1/5、升高TGF-β1至RSV感染细胞的2倍。利巴韦林含药血清和空白血清作用相似,对TGF-β1、PDGF-BB表达有一定的影响。结论：(1)RSV感染可使HELF细胞PDGF-BB mRNA表达水平显著升高,TGF-β1mRNA表达水平显著下降；(2)清肺口服液可调节TGF-β1、PDGF-BB等细胞因子的mRNA表达,缓减RSV感染后细胞的异常变化,这可能是其抗病毒作用机制之一。总言之,清肺口服液可以拮抗RSV病毒,是治疗RSV感染的有效复方制剂。

全文目录


摘要  8-9
ABSTRACT  9-10
前言  10-11
祖国医学对小儿肺炎的认识  11-18
  1.对肺炎证候的认识  11
  2.对肺炎病因和病理生理的认识  11-12
  3.对肺炎辨证的认识  12
  4.对肺炎治则治法的认识  12-14
    4.1 清热解毒法  12-13
    4.2 化痰止咳法  13
    4.3 活血化瘀法  13-14
    4.4 扶正祛邪法  14
  5.给药途径  14-16
    5.1 静脉给药  14
    5.2 雾化吸入  14-15
    5.3 直肠给药  15
    5.4 中药外敷  15
    5.5 中药内外合治法  15-16
  6.中药治疗呼吸道合胞病毒肺炎的实验研究进展  16-18
    6.1 单味药  16
    6.2 复方制剂  16
    6.3 中西药结合  16-18
现代医学对呼吸道合胞病毒肺炎的研究进展  18-23
  1.白细胞介素  18-19
    1.1 白细胞介素-1  18-19
    1.2 白细胞介素-2  19
    1.3 白细胞介素-4及白细胞介素-5  19
    1.4 白细胞介素-6及白细胞介素-8  19
    1.5 白细胞介素-13  19
  2.肿瘤坏死因子  19-20
  3.细胞间粘附分子-1  20
  4.抗病毒药物  20-21
    4.1 利巴韦林  20
    4.2 干扰素  20-21
  5.免疫球蛋白  21
    5.1 丙种球蛋白  21
    5.2 呼吸道合胞病毒免疫球蛋白  21
    5.3 RSV-单克隆抗体  21
  6.辅助药物  21-23
    6.1 皮质类固醇  21-22
    6.2 氨溴索  22
    6.3 支气管扩张剂  22
    6.4 酚妥拉明  22
    6.5 山莨菪碱  22-23
方药讨论  23-25
实验研究  25-37
  材料与方法  25-29
    1.材料  25
    2.方法  25-29
  结果  29-33
    3.1 清肺口服液和利巴韦林含药血清对细胞最大无毒浓度结果  29
    3.2 RSV组织培养半数感染量(TCID_(50))  29
    3.3 清肺口服液含药血清对呼吸道合胞病毒的抑制作用结果  29
    3.4 细胞总RNA质量及纯度检验  29-30
    3.5 药物处理后RSV感染的HELF细胞TGF-β1与PDGF-BB的mRNA表达变化  30-33
  讨论  33-37
    1.实验依据  33-35
      1.1 细胞培养  33
      1.2 Hep-2及HELF的使用依据  33
      1.3 血清药理学的研究  33-34
      1.4 实时荧光定量PCR技术  34
      1.5 转化生长因子-β_1(TGF-β_1)及血小板衍生生长因子-BB(PDGF-BB)  34-35
    2.结论  35-36
    3.展望  36-37
参考文献  37-42
附录:缩略语  42-43
攻读硕士学位期间取得的学术成果  43-44
致谢  44

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中图分类: > 医药、卫生 > 中国医学 > 中药学 > 中药药理学
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