学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

消癌平注射液及其与奥沙利铂和恩度联合抗肝癌细胞侵袭与转移的实验研究

作　者: 戴婷婷
导　师: 华海清
学　校: 南京中医药大学
专　业: 中西医结合临床
关键词: 肝癌细胞侵袭转移中药/消癌平注射液奥沙利铂重组人血管内皮抑制素/恩度
分类号: R735.7
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
下　载: 92次
引　用: 1次
阅　读: 论文下载

内容摘要

目的：通过体外实验观察消癌平注射液及其与第三代铂类化疗药物奥沙利铂和抗肿瘤血管生成药物重组人血管内皮抑制素(恩度)联合作用于人肝癌细胞株的效果,并探讨其抗侵袭与转移的相关机制,为中药与化疗及抗肿瘤血管生成治疗联合应用提供理论依据。方法：将不同浓度的消癌平、奥沙利铂、恩度单药以及联合作用于体外培养的人肝癌细胞株SMMC-7721,使用不同的实验方法观察各药物组与对照组之间的差异。(1)增殖抑制实验：通过MTT法观察药物对SMMC-7721增殖的影响；(2)细胞黏附实验：将SMMC-7721细胞以不同药物浓度组处理,测定其与细胞外基质的黏附差异；(3)细胞迁移实验：通过划痕实验观察经不同药物作用的细胞在细胞外基质上的运动能力；进一步以Transwell小室测定法定量分析不同药物组细胞迁移能力；(4)细胞体外侵袭实验：通过Transwell小室测定法定量分析不同药物组细胞侵袭能力差异；(5)免疫细胞化学法观察不同药物对SMMC-7721表达E-cadherin、nm23-H1、MMP-2的影响。结果：(1)消癌平、奥沙利铂注射液对肝癌SMMC-7721细胞有增殖抑制作用,且该作用呈时间、剂量依赖性；其中消癌平10μl/ml、15μl/ml、20μ/ml,奥沙利铂0.5μg/ml,恩度6.0μg/ml单药、两药、三药联合在作用24h时对细胞凋亡和增殖抑制率均小于30%(联合时消癌平取15μl/ml浓度)。(2)经消癌平10、15、20μl/ml三个浓度作用的SMMC-7721细胞,黏附到Matrigel、FN上的细胞数目均不同程度地减少,细胞黏附抑制率随消癌平浓度的增加而显示逐渐增加趋势。奥沙利铂、恩度单药未表现出明显的黏附抑制作用。当消癌平与奥沙利铂联合时较单药组表现出增效作用。(3)消癌平单药(10、15、20μl/ml)、奥沙利铂单药能降低SMMC-7721细胞的运动能力(P<0.05,P<0.01,P<0.01,P<0.01),并且随着药物浓度的增加,细胞运动能力越趋减弱。恩度单药不能降低细胞的运动能力。当消癌平与奥沙利铂联合时作用强于单药组,增效作用表现为相加作用。(4)消癌平单药、奥沙利铂单药能降低SMMC-7721细胞的侵袭能力(P<0.05，P<0.01,P<0.01,P<0.01),并且随着药物浓度的增加,细胞侵袭能力越趋减弱。恩度单药不能降低细胞的运动能力。当消癌平与奥沙利铂联合时作用强于单药组,表现出协同作用。(5)消癌平注射液可以上调E-cadherin、nm23-H1表达,同时下调MMP-2表达。奥沙利铂单药0.5μg/ml浓度可使SMMC-7721细胞MMP-2表达减弱(P<0.01),但对E-cadherin、nm23-H1表达无影响。恩度可使SMMC-7721细胞nm23-H1表达增强(P<0.05),但对E-cadherin、MMP-2表达无明显影响。结论：(1)消癌平能抑制肝癌SMMC-7721细胞的黏附能力、运动能力和侵袭能力。其作用机制可能与上调E-cadherin、nm23-H1表达,同时下调MMP-2表达有关。(2)奥沙利铂0.5μg/ml浓度无明显抑制SMMC-7721细胞的黏附能力作用,但能够降低SMMC-7721细胞的运动能力和侵袭能力。其作用机制可能与下调MMP-2表达有关。(3)消癌平与奥沙利铂联合使用对抑制SMMC-7721细胞的黏附、运动和侵袭能力有增效作用。其作用机制可能通过协同上调E-cadherin表达、下调MMP-2表达有关。(4)恩度6.0μg/ml浓度无明显抑制SMMC-7721细胞的黏附、运动、侵袭能力作用。与消癌平联用不能协同抑制肝癌SMMC-7721细胞的侵袭和转移能力。

全文目录

中文摘要  7-9
英文摘要  9-11
前言  11-14
第一部分:抗原发性肝癌侵袭与转移的研究进展  14-18
  1 肿瘤侵袭与转移的步骤  14
  2 肿瘤侵袭与转移相关的分子机制研究进展  14-15
    2.1 基因调控机制  14
    2.2 细胞外基质降解机制  14
    2.3 因子促进机制  14-15
    2.4 黏附机制  15
    2.5 逃避宿主免疫监视机制  15
  3 中医药抗原发性肝癌侵袭与转移的研究进展  15-18
    3.1 调节基因表达,抑制肿瘤生长与转移  15-16
    3.2 抑制蛋白酶表达,阻止肿瘤浸润  16
    3.3 抑制肿瘤新生血管生成  16
    3.4 抑制黏附分子表达  16-17
    3.5 提高机体免疫功能,发挥扶正固本作用  17-18
第二部分:消癌平及其与奥沙利铂和恩度联合抗肝癌侵袭与转移的实验研究  18-29
  1 材料与方法  18-22
    1.1 实验材料  18-19
    1.2 实验方法  19-22
    1.3 统计学方法  22
  2 结果  22-29
    2.1 MTT法检测不同药物对SMMC-7721细胞的增殖抑制作用  22-23
    2.2 不同药物浓度组对SMMC-7721细胞黏附能力的影响  23-25
    2.3 不同药物浓度对SMMC-7721细胞运动迁移能力的影响  25-27
    2.4 不同药物浓度对SMMC-7721细胞运动侵袭能力的影响  27-28
    2.5 免疫细胞化学法观察SMMC-7721细胞侵袭转移相关基因蛋白的表达  28-29
第三部分讨论  29-32
第四部分结语  32-33
  1 结论  32
  2 存在的问题  32-33
附图  33-40
参考文献  40-43
附录  43-49
  文献综述  43-48
  符号及缩略语说明  48-49
攻读硕士学位期间取得的学术成果  49-50
致谢  50

消癌平注射液及其与奥沙利铂和恩度联合抗肝癌细胞侵袭与转移的实验研究

内容摘要

全文目录

相似论文