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丁苯酞对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后caspase-8表达及其促凋亡活性的研究

作　者: 胡琼
导　师: 刘瑞珍
学　校: 山西医科大学
专　业: 神经病学
关键词: 丁苯酞 caspase-8 脑缺血再灌注线栓法大脑中动脉栓塞模型凋亡
分类号: R741
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

目的：研究丁苯酞(NBP)对大鼠脑缺血再灌注损伤后的神经保护作用及对caspase-8表达的影响。方法：将180只wistar大鼠随机分成假手术组(n=36)、缺血1 h再灌注组(n=36)、NBP治疗组(n=36)、NBP预防组(n=36)、NBP预防治疗组(n=36),每组大鼠根据缺血再灌注时间又随机分成6 h、12 h、24 h三个亚组,各亚组12只,采用改良的Zea Longa法制作大鼠局灶性脑缺血再灌注模型。依据单盲法进行Zas Longa评分及TTC染色结果判断造模是否成功,观察NBP对大鼠脑缺血再灌注预防或治疗后的神经功能症状评分,用HE染色观察脑组织病理形态学改变,DNA原位末端缺口标记法(TUNEL)检测神经元凋亡,免疫组化法观察caspase-8蛋白表达情况,及western blot定量检测各组caspase-8蛋白表达水平。结果：1.假手术组大鼠未出现任何神经缺失症状；缺血再灌注组大鼠出现不同程度的神经功能缺失症状。观察结果显示,NBP治疗组、预防组及预防治疗组均能不同程度改善脑缺血再灌注损伤后的神经功能缺失症状。2.HE染色：假手术组神经元形态结构正常。缺血再灌注组的缺血侧组织结构消失或明显异常,细胞数目减少、排列紊乱。NBP治疗组、预防组及预防治疗组能不同程度的减轻脑组织坏死,镜下观察预防组效果略差。3.TUNEL染色：假手术组偶见凋亡细胞,缺血再灌注组可见大量凋亡细胞(P<0.05)，与缺血再灌注组比较,NBP治疗组、预防治疗组能明显抑制神经元凋亡,预防组亦能抑制神经元凋亡,但效果较前两组略差。4.免疫组化：假手术组偶见散在caspase-8阳性细胞。缺血再灌注组于造模后6h出现大量caspase-8阳性细胞,随时间的延长逐渐增多(P<0.01)。NBP治疗组、预防组及预防治疗组的caspase-8阳性细胞较缺血再灌注组明显减少(P<0.01)。NBP预防治疗组与NBP治疗组比较,在缺血再灌注后6 h、12 h时对caspase-8的表达抑制,预防治疗组优于治疗组(P<0.05),在24 h时两组间此蛋白的阳性表达无明显差异性(P>0.05)5. Western blot:正常大鼠及假手术组中脑组织caspase-8活性片段的蛋白表达量很低。在缺血1 h再灌注24 h时,缺血再灌注组caspase-8蛋白的表达量明显上调(P<0.01)。NBP治疗组、预防组及预防治疗组三个组的此蛋白表达明显低于缺血再灌注组(P<0.01),但NBP预防组的caspase-8蛋白表达不如治疗组此蛋白下调明显(P<0.05)；预防治疗组在缺血再灌注24 h的此蛋白表达与治疗组无明显差异性(P>0.05)结论：1.NBP预防及治疗均可以明显减轻脑缺血再灌注损伤所致的脑组织坏死,具有神经保护作用。2.NBP预防及治疗均可以显著抑制脑缺血再灌注损伤后神经元的凋亡,保护幸存的神经元。3.NBP能有效抑制脑缺血再灌注后caspase-8蛋白的表达,从而阻断下游caspase级联反应的激活,减少神经元的损伤和凋亡

全文目录

中文摘要  5-7
英文摘要  7-9
主要英文缩略词表  9-10
正文  10-32
  前言  10-11
  材料和方法  11-17
  实验结果  17-19
  表及图  19-26
  讨论  26-29
  结论  29-30
  参考文献  30-32
综述  32-37
  正文  32-35
  参考文献  35-37
个人简介  37-38
致谢  38

丁苯酞对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后caspase-8表达及其促凋亡活性的研究

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