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过瘤胃胆碱对围产期奶牛肝脏脂肪代谢调控及泌乳性能影响的研究

作　者: 刘翔
导　师: 曲永利
学　校: 黑龙江八一农垦大学
专　业: 动物营养与饲料科学
关键词: 过瘤胃胆碱 生产性能 脂肪代谢 激素浓度 LDLR mRNA
分类号:
类　型: 硕士论文
年　份: 2014年
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内容摘要


本研究旨在为以后通过在围产期日粮添加过瘤胃提高奶牛的泌乳性能、缓解其能量负平衡状态、提高奶牛的健康状况以及延长其利用年限提供理论依据及试验基础，在分子水平上部分阐述不同激素对肝脏脂肪代谢的影响，为奶牛肝脏脂肪代谢的调控提供参考。试验一：选取60头健康荷斯坦奶牛，按照胎次、年龄、上一胎次产奶量和预产期相近的原则，随机分为3组（I、II、III），每组20头。I、II、III组奶牛在产前15d至产后15d分别饲喂基础日粮、基础日粮+20g过瘤胃胆碱、基础日粮+30g过瘤胃胆碱。结果表明：1）围产期奶牛日粮添加20g过瘤胃胆碱能够显著提高产奶量（P＜0.05），乳脂率、乳蛋白率、乳糖及总固形物有增加的趋势（P＞0.05）。添加30g过瘤胃胆碱能够显著提高产奶量、乳脂率、乳蛋白及总固形物（P＜0.05），乳糖有增加的趋势（P＞0.05）；2）围产期奶牛日粮添加20g过瘤胃胆碱能够显著提高血浆中血糖及低密度脂蛋白的浓度（P＜0.05），显著降低非酯化脂肪酸、β-羟丁酸、总胆固醇的浓度（P＜0.05），甘油三酯及总氨基酸有增加的趋势（P＞0.05）。添加30g过瘤胃胆碱能够极显著的提高血浆中低密度脂蛋白的浓度（P＜0.01），显著提高葡萄糖、甘油三酯及总氨基酸的浓度（P＜0.05），极显著降低非酯化脂肪酸、β-羟丁酸及总胆固醇的浓度（P＜0.01）；3）围产期奶牛日粮添加20g过瘤胃胆碱能够显著提高血浆中胰岛素的浓度（P＜0.05），显著降低胰高血糖素及瘦素的浓度（P＜0.05）。添加30g过瘤胃胆碱能够极显著的提高血浆中胰岛素的浓度（P＜0.01），极显著降低胰高血糖素及瘦素的浓度（P＜0.01）。试验结果证明：奶牛日粮添加过瘤胃胆碱能够缓解围产期奶牛的能量负平衡状态，调节奶牛体内的能量脂肪代谢，提高生产性能，建议围产期日粮每日添加30g/头过瘤胃胆碱。试验二：选取一头健康的初生犊牛，放血致死后立即无菌采取肝脏尾状突，采用循环灌注法消化肝组织，分离肝细胞。取接种于6孔培养板中生长良好的肝细胞，分别添加1、10、100、1000nmol/L的胰岛素，1、10、100、1000nmol/L的胰高血糖素，2.5、5.0、10、50ng/mL的瘦素，设置空白对照，每个浓度3个重复。采用荧光定量PCR分析LDLR mRNA的表达量。结果显示：胰岛素各浓度添加组LDLR mRNA表达量极显著高于对照组（P＜0.01），但是1、10nmol/L添加组间差异不显著（P＞0.05）；胰高血糖素1000nmol/L添加组LDLR mRNA表达量极显著低于对照组（P＜0.01），10、100nmol/L添加组显著低于对照组（P＜0.05），其余各组间差异不显著（P＞0.05）；瘦素各添加组间差异不显著（P＞0.05）。试验结果证明：胰岛素对LDLR mRNA的表达有促进作用，且随着胰岛素浓度的增加，促进作用加强；胰高血糖素对LDLR mRNA的表达有抑制作用，且随着胰高血糖素浓度的增加，抑制作用加强；瘦素未表现出对LDLRmRNA的表达有促进或者抑制作用。

全文目录


摘要  4-6
Abstract  6-8
目录  8-10
第一章 文献综述  10-26
  1.1 围产期奶牛的能量代谢特点  10-16
    1.1.1 反刍动物对葡萄糖的需要  11-12
    1.1.2 反刍动物体内葡萄糖的来源  12
    1.1.3 围产期奶牛干物质采食量减少的机制  12-13
    1.1.4 围产期奶牛肝脏的脂肪酸代谢  13-16
  1.2 围产期奶牛极低密度脂蛋白的合成及转运输出  16-17
  1.3 低密度脂蛋白受体的结构、功能及其调控机制  17-18
    1.3.1 低密度脂蛋白受体的结构及其功能  17-18
    1.3.2 低密度脂蛋白受体的调控机制  18
  1.4 过瘤胃胆碱对围产期奶牛生产性能及脂肪代谢影响的研究进展  18-23
    1.4.1 胆碱的结构及其功能  18-20
    1.4.2 反刍动物的胆碱来源  20
    1.4.3 过瘤胃保护技术概述  20-21
    1.4.4 过瘤胃胆碱对围产期奶牛干物质采食量的影响  21-22
    1.4.5 过瘤胃胆碱对围产期奶牛生产性能的影响  22
    1.4.6 过瘤胃胆碱对围产期奶牛血液生化指标的影响  22-23
    1.4.7 过瘤胃胆碱对围产期奶牛代谢类激素的影响  23
  结束语  23-26
第二章 过瘤胃胆碱对对围产期奶牛血液指标、脂肪代谢、激素含量及泌乳性能的影响  26-38
  1.1 材料与方法  26-30
    1.1.1 试验设计与饲养管理  26-27
    1.1.2 检测项目  27-29
    1.1.3 统计分析  29-30
  1.2 结果与分析  30-34
    1.2.1 添加过瘤胃胆碱对围产期奶牛生产性能的影响  30-31
    1.2.2 添加过瘤胃胆碱对围产期奶牛血液生化指标的影响  31-33
    1.2.3 添加过瘤胃胆碱对围产期奶牛代谢类激素浓度的影响  33-34
  1.3 讨论  34-37
    1.3.1 添加过瘤胃胆碱对围产期奶牛生产性能的影响  34-35
    1.3.2 添加过瘤胃胆碱对围产期奶牛血浆生化指标的影响  35-37
    1.3.3 添加过瘤胃胆碱对围产期奶牛血浆代谢类激素的影响  37
  1.4 结论  37-38
第三章 不同的激素浓度对体外培养犊牛肝细胞 LDLR mRNA 表达量的影响  38-54
  3.1 试验材料与方法  38-45
    3.1.1 试验材料  38-39
    3.1.2 试验方法  39-45
    3.1.3 统计分析  45
  3.2 结果与分析  45-51
    3.2.1 肝脏总 RNA 电泳结果  45-46
    3.2.2 重组质粒 PCR 鉴定结果  46
    3.2.3 重组质粒的双酶切鉴定结果  46-47
    3.2.4 β-actin 及 LDLR mRNA 重组质粒序列测定结果  47-48
    3.2.5 β-actin 及 LDLR mRNA 重组质粒浓度测定结果  48
    3.2.6 荧光定量 PCR 结果  48-51
  3.3 讨论  51-52
    3.3.1 不同浓度的胰岛素对体外培养犊牛肝细胞 LDLR mRNA 表达量的影响  51
    3.3.2 不同浓度的胰高血糖素对体外培养犊牛肝细胞 LDLR mRNA 表达量的影响  51
    3.3.3 不同浓度的瘦素对体外培养犊牛肝细胞 LDLR mRNA 表达量的影响  51-52
  3.4 小结  52-54
第四章 结论  54-56
附录  56-62
参考文献  62-68
致谢  68-70
作者简历  70

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