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牡丹内源酚类物质与IAA反应初探

作　者: 尚文倩
导　师: 何松林
学　校: 河南农业大学
专　业: 园林植物与观赏园艺
关键词: 牡丹试管苗生根酚类 IAA 酶活性
分类号: S685.11
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
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内容摘要

本研究以牡丹试管苗内源的酚类物质和IAA为原料，探讨在多酚氧化酶（PPO）的催化下酚类物质与IAA反应是否能产生新的物质以及反应溶液PH值、反应时间等因素对反应产物的影响；同时以牡丹品种‘凤丹白’腋芽为供试材料，在牡丹试管苗生根培养基中添加不同种类及浓度的酚类物质，观察并统计其生根情况；并研究添加外源酚类物质对其试管苗生根过程中相关酶活性如过氧化物酶（POD）、多酚氧化酶（PPO）及吲哚乙酸氧化酶（IAAO）的影响，探讨酚类物质与牡丹试管苗不定根产生之间的关系，为解决牡丹试管苗生根困难等问题提供理论指导。主要研究结果如下：1．以牡丹试管苗中检测到的2种酚类物质和IAA为原料，研究酚类物质在PPO的催化下与IAA的反应，结果如下：咖啡酸、儿茶酚与IAA在PPO的催化下，均可发生反应，产生了新的物质。即咖啡酸在PPO的催化下与IAA反应20h后，在5.572min、8.035min、9.045min处出现三个新峰，儿茶酚在PPO的催化下与IAA反应20h后，在5.572min、8.040min、9.409min处产生三个新峰；不同PH值条件下，两种酚类物质均在PH=5.0时与IAA反应的产物率最高，在反应6h后趋近稳定状态。2．以牡丹品种‘凤丹白’为试验材料，在牡丹试管苗生根培养基中添加不同种类和浓度的酚类物质，研究其对试管苗不定根发生的影响。结果表明：外源添加酚类物质对试管苗的生根率与生根指数均高于对照，且以添加儿茶酚0.8mg·L-1处理生根率最高，咖啡酸1mg·L-1处理生根指数最高。3．以易生根的牡丹品种‘凤丹白’为试验材料，研究添加外源酚类物质对牡丹品种‘凤丹白’在生根过程中POD、PPO及IAAO活性的动态变化。结果表明：与对照相比，经咖啡酸处理后的牡丹试管苗POD活性在第4d活性最高，且显著高于未添加咖啡酸的处理，在第5d后整体处于上升趋势；PPO活性在接入培养基的第1d天达到最高峰，第15d次之，并且第15d活性显著高于对照；IAAO活性变化较大，在第3d达到最高峰，并在第4d迅速下降至最低，在第15d又出现峰值，而对照IAAO酶活性始终变化不大。

全文目录

致谢  4-7
摘要  7-8
1 文献综述  8-18
  1.1 牡丹组织培养研究概述  8-10
    1.1.1 品种的选择  8-9
    1.1.2 外植体的选择  9
    1.1.3 基本培养基类型及生长调节物质  9-10
    1.1.4 环境因子  10
    1.1.5 试管苗移栽  10
  1.2 牡丹试管苗生根研究  10-14
    1.2.1 基本培养基类型对试管苗生根的影响  11
    1.2.2 生长调节物质对试管苗生根的影响  11-12
    1.2.3 蔗糖浓度对试管苗生根的影响  12
    1.2.4 环境因素对试管苗生根的影响  12-13
      1.2.4.1 温度对生根的影响  12-13
      1.2.4.2 光照对生根的影响  13
    1.2.5 内源激素对试管苗生根的影响  13
    1.2.6 酶活性对试管苗生根的影响  13-14
  1.3 植物酚类物质研究概述  14-16
    1.3.1 植物酚类物质的组成  14-15
    1.3.2 酚类物质与 IAA 的代谢  15
    1.3.3 酚类物质与根的形态建成  15-16
    1.3.4 酚类物质与牡丹  16
  1.4 问题与展望  16-18
2 引言  18-20
3 材料与方法  20-25
  3.1 材料  20
  3.2 药品与仪器  20
  3.3 方法  20-25
    3.3.1 牡丹内源不同酚类物质与 IAA 及 PPO 的作用关系  20
    3.3.2 不同条件下咖啡酸与 IAA 及 PPO 的反应  20-21
      3.3.2.1 不同 PH 值处理  20-21
      3.3.2.2 不同反应时间处理  21
    3.3.3 不同条件下儿茶酚与 IAA 及 PPO 的反应  21
      3.3.3.1 不同 PH 值处理  21
      3.3.3.2 不同反应时间处理  21
    3.3.4 牡丹试管苗生根过程中生根指标的测定  21-22
      3.3.4.1 外植体的选择及处理  21-22
      3.3.4.2 启动培养  22
      3.3.4.3 生根培养  22
    3.3.5 牡丹试管苗生根过程中相关酶活性的测定  22-25
      3.3.5.1 POD 活性测定方法  23
      3.3.5.2 PPO 活性测定方法  23-24
      3.3.5.3 IAAO 活性测定方法  24-25
4 结果分析  25-35
  4.1 牡丹内源不同酚类物质与 IAA 及 PPO 的反应结果  25-28
    4.1.1 咖啡酸与 IAA 及 PPO 的反应结果  25-26
    4.1.2 儿茶酚与 IAA 及 PPO 的反应结果  26-28
  4.2 不同条件对咖啡酸与 IAA 及 PPO 反应的影响  28-29
    4.2.1 不同 PH 值对咖啡酸与 IAA 及 PPO 反应的影响  28
    4.2.2 不同时间对咖啡酸与 IAA 及 PPO 反应的影响  28-29
  4.3 不同条件对儿茶酚与 IAA 及 PPO 反应的影响  29-31
    4.3.1 不同 PH 值对儿茶酚与 IAA 及 PPO 反应的影响  29-30
    4.3.2 不同时间对儿茶酚与 IAA 及 PPO 反应的影响  30-31
  4.4 添加不同浓度酚类物质对牡丹试管苗生根的影响  31
  4.5 添加酚类物质对牡丹试管苗生根过程中酶活性的影响  31-35
    4.5.1 添加酚类物质对牡丹试管苗生根过程中过氧化物酶（POD）活性的影响  31-32
    4.5.2 添加酚类物质对牡丹试管苗生根过程中多酚氧化酶（PPO）活性的影响  32-33
    4.5.3 添加酚类物质对牡丹试管苗生根过程中吲哚乙酸氧化酶（IAAO）活性的影响  33-35
5 结论与讨论  35-38
  5.1 酚类物质与 IAA 及 PPO 的反应结果  35
  5.2 添加酚类物质对牡丹试管苗生根的影响  35-36
  5.3 添加酚类物质对牡丹试管苗生根过程中酶活性的影响  36-38
参考文献  38-44
缩略语词汇表  44-45
ABSTRACT  45-46

牡丹内源酚类物质与IAA反应初探

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