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环境因子对牡丹试管苗生根的影响

作　者: 徐盼盼
导　师: 何松林
学　校: 河南农业大学
专　业: 园林植物与观赏园艺
关键词: 牡丹试管苗生根 LED红光低温暗期酶活性总酚含量解剖学
分类号: S685.11
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

本文以牡丹‘太平红’的鳞芽作为外植体,研究不同环境因素(光质、温度)以及不同继代次数对牡丹试管苗生根的影响,测定牡丹试管苗生根过程中过氧化物酶(POD)活性、多酚氧化酶(PPO)活性、吲哚乙酸氧化酶(IAAO)活性和总酚含量的变化,并对牡丹试管苗生根过程中的茎、根进行石蜡切片,从生理机制、解剖学和形态学角度分析牡丹试管苗生根难的原因。试验的主要结果如下:1.昼夜温差对牡丹试管苗生根的影响:昼夜温差为6℃时,试管苗生根效果最佳,生根率达到最大值,51.85%,而对照仅为31.03%。其中,随着昼夜温差增大,试管苗生根率、生根指数和根系活力呈现上升后下降趋势,无昼夜温差和昼夜温差过大都不利于牡丹试管苗生根。2.LED红光处理对牡丹试管苗生根的影响:随着LED红光处理时间的增加,牡丹试管苗生根率、平均根长及生根指数呈先上升后下降趋势,其中LED红光处理9 d下的牡丹试管苗生根率最佳,为84%,而对照仅为52%,与对照差异显著。试验结果表明,短时间(6 d)的LED红光处理对促进牡丹试管苗生根无明显作用, LED红光处理9 d下的牡丹试管苗的生根率、平均根长以及生根指数均达到最佳,而较长时间(12,15 d)的LED红光处理下的试管苗生根率、生根指数则有所下降,且试管苗长势也越来越差。3.低温暗期对牡丹试管苗生根的影响:在8℃条件下暗期处理3天,牡丹试管苗生根效果最佳,生根率可达90%。就不同低温温度来看,随着低温温度的升高,生根率和生根指数均逐渐增大,温度为8℃时效果最佳;就不同低温暗期处理天数而言,随着低温暗期天数的增加,生根率和生根指数则呈现先上升后下降趋势,低温暗期天数为3天时效果最佳。4.牡丹试管苗生根过程中酶活性及其总酚含量的变化:经LED红光和低温暗期处理的试管苗POD活性在试管苗生根过程中均在第3d出现峰值,随后上下波动,最后又呈现上升趋势;PPO活性呈现先上升后下降趋势,且经LED红光和低温暗期处理后的试管苗PPO活性高于对照;IAAO活性呈先上升后下降趋势,且经LED红光和低温暗期处理的试管苗IAAO活性低于对照;试管苗总酚含量呈先下降后上升趋势,经低温暗期处理的试管苗总酚含量高于对照。5.继代次数对牡丹试管苗生根的影响:继代次数为1时,牡丹试管苗生根率达到最大值,为66.67%,而对照仅有33.33%。研究结果表明,经继代培养后,牡丹试管苗生根率明显高于对照,平均根数和平均根长与对照也形成显著差异。6.试管苗细胞学观察:从切片上可看出,牡丹试管苗转入生根培养基之前并无潜伏根原基存在,不定根是由诱生根原基产生,第5d出现根原基形成, 9-15d时,牡丹试管苗根原基继续分化,形成一个根尖的形状,向外生长并开始突破表皮。25d时不定根已突破表皮。从根茎连接处切片可看出,不定根由茎维管束产生;叶片和花芽生根,多数是由愈伤组织产生。

全文目录

致谢 4-8摘要 8-101 文献综述 10-18 1.1 牡丹组织培养 10-12 1.1.1 牡丹组培品种的选择 11 1.1.2 外植体的选择及取材时间 11 1.1.3 培养基 11-12 1.1.4 环境因素 12 1.2 生根培养 12-16 1.2.1 生根培养基和蔗糖浓度 13-14 1.2.1.1 培养基和生长调节物质的选择 13 1.2.1.2 其他 13-14 1.2.2 环境条件 14-15 1.2.2.1 光照 14-15 1.2.2.2 温度 15 1.2.3 内源激素 15 1.2.4 酶活性 15-16 1.2.5 其他 16 1.3 移栽 16-17 1.3.1 炼苗时间 16 1.3.2 不同基质和温度 16-17 1.4 问题及展望 17-182 引言 18-193 材料与方法 19-25 3.1 试验材料与设备 19 3.1.1 试验材料 19 3.1.2 试验设备 19 3.2 试验方法 19-24 3.2.1 外植体的选择及处理 19 3.2.2 启动培养 19 3.2.3 继代培养 19 3.2.4 生根培养 19-21 3.2.4.1 昼夜温差 20 3.2.4.2 LED 红光处理不同时间 20 3.2.4.3 低温暗期 20-21 3.2.4.4 不同继代次数 21 3.2.5 生根过程中生理指标的测定 21-24 3.2.5.1 过氧化物酶(POD)活性的测定 21-22 3.2.5.2 多酚氧化酶（PPO）活性的测定 22 3.2.5.3 吲哚乙酸氧化酶（IAAO）活性的测定 22-23 3.2.5.4 多酚含量的测定 23 3.2.5.5 根系活力的测定 23-24 3.2.6 解剖学观察 24 3.3 数据处理 24-254 结果与分析 25-36 4.1 不同昼夜温差处理对牡丹‘太平红’试管苗生根的影响 25 4.2 LED 红光不同处理时间对牡丹‘太平红’试管苗生根及其生根过程中酶活性的影响 25-28 4.2.1 LED 红光不同处理时间对牡丹‘太平红’试管苗生根的影响 25-26 4.2.2 LED 红光不同处理时间对牡丹试管苗生根过程中酶活性的影响 26-28 4.2.2.1 LED 红光不同处理时间对牡丹试管苗生根过程中POD 活性的影响 26-27 4.2.2.2 LED 红光对牡丹试管苗生根过程中PPO 活性的影响 27 4.2.2.3 LED 红光对牡丹试管苗生根过程中吲哚乙酸氧化酶（IAAO）活性的影响 27-28 4.3 不同低温暗期处理对牡丹‘太平红’试管苗生根及其生根过程中酶活性和总酚含量的影响 28-34 4.3.1 不同低温暗期处理对牡丹‘太平红’试管苗生根的影响 28-30 4.3.2 不同低温暗期处理对牡丹‘太平红’试管苗生根过程中酶活性基总酚含量的影响 30-34 4.3.2.1 8℃下暗期处理3d 对牡丹试管苗生根的影响 30-31 4.3.2.2 低温暗期对牡丹试管苗生根过程中过氧化物酶（POD）活性的影响 31 4.3.2.3 低温暗期对牡丹试管苗生根过程中多酚氧化酶（PPO）活性的影响 31-32 4.3.2.4 低温暗期对牡丹试管苗生根过程中吲哚乙酸氧化酶（IAAO）活性的影响 32-33 4.3.2.5 低温暗期对牡丹试管苗生根过程中总酚含量的影响 33-34 4.4 不同继代次数对牡丹‘太平红’试管苗生根的影响 34 4.5 牡丹试管苗细胞学观察 34-365 结论与讨论 36-41 5.1 昼夜温差对牡丹试管苗生根的影响 36 5.2 LED 红光对牡丹试管苗生根的影响 36-37 5.3 低温暗期对牡丹试管苗生根的影响 37 5.4 牡丹试管苗生根过程中酶活性和总酚含量的变化对牡丹试管苗生根的影响 37-39 5.5 继代次数对牡丹试管苗生根的影响 39 5.6 牡丹试管苗生根培养过程中细胞学观察 39-41参考文献 41-47ABSTRACT 47-49附图 49-57

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