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樱桃番茄采后贮藏保鲜与质量安全研究

作　者: 奉代力
导　师: 仇厚援
学　校: 海南大学
专　业: 农产品加工与贮藏工程
关键词: 樱桃番茄杀菌剂保鲜剂综合保鲜啶菌噁唑残留安全
分类号: TS255.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
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内容摘要

本研究对樱桃番茄采后病原菌进行分离与定性分析,确定了樱桃番茄采后发病的主要病原菌,并以其主要病原菌为试验菌种,筛选出有效的杀菌剂。同时,探讨采前田间喷施杀菌剂对樱桃番茄采后贮藏保鲜的影响,获得了最佳采前喷施杀菌剂；采用正交实验设计方法,确定了樱桃番茄采后保鲜剂配方；利用采前与采后综合保鲜方法对樱桃番茄的保鲜效果进行分析；最后,对用于樱桃番茄保鲜的啶菌噁唑杀菌剂进行了安全性评价。试验结论如下：(1)樱桃番茄采后病原菌的分离与定性分析通过从樱桃番茄病斑中分离病原菌,并进行定性分析,主要分离得到5种病原菌：链格孢菌、灰葡萄孢菌、黄色镰刀菌、拟茎点霉和禾谷镰孢菌。其中链格孢菌和灰葡萄孢菌主要出现在夏季樱桃番茄中,链格孢菌、黄色镰刀菌、拟茎点霉和禾谷镰孢菌主要出现在秋季樱桃番茄中,而链格孢菌在夏季和秋季樱桃番茄中都存在。(2)供试病原菌对樱桃番茄的致病作用将分离得到的5种病原菌接种到采后樱桃番茄中,研究其对采后樱桃番茄的致病作用。结果发现：链格孢菌、灰葡萄孢菌、黄色镰刀菌、拟茎点霉、禾谷镰孢菌5种病原菌,对采后樱桃番茄均有致病作用。(3)杀菌剂对灰葡萄孢菌和链格孢菌的抑菌效果通过测定杀菌剂的ECso值和病原菌的敏感性,研究了13种杀菌剂对灰葡萄孢菌、链格孢菌2种病原菌的抑菌效果,其中对2种病原菌抑菌效果均良好的杀菌剂为：啶菌噁唑、丁子香酚、咪鲜胺、腐霉利、多抗霉素B、枯草芽孢杆菌、绿色木霉菌等7种杀菌剂。(4)采前田间喷施杀菌剂对樱桃番茄采后贮藏保鲜的影响利用筛选出的3种杀菌剂(啶菌噁唑、枯草芽孢杆菌、绿色木霉菌),对夏季栽培的金珠和红樱桃2个品种樱桃番笳进行采前田间喷施,并比较了其对采后贮藏保鲜的影响。结果表明：采前田间喷施啶菌嗯唑、枯草芽孢杆菌、绿色木霉菌三种杀菌剂,均可显著减少金珠和红樱桃采后发病率,减少采后腐烂损失,以发病率20%为评价指标,可分别将红熟后期的金珠和红樱桃20℃贮藏的贮藏期延长至21d和15d以上；采前田间喷施啶菌噁唑可显著提高了金珠和红樱桃中Vc含量并且减少红樱桃20℃贮藏时的失重率(P<0.05)；采前田间喷施枯草芽孢杆菌对减少金珠和红樱桃采后贮藏过程中Vc、可滴定酸、可溶性固形物等品质损失的保鲜效果较好；绿色木霉菌可显著提高金珠采前可溶性固形物的含量。本实验中贮藏保鲜效果最好的采前田间喷施杀菌剂为：啶菌噁唑,喷施浓度为0.4mL.L-1。(5)樱桃番茄采后保鲜剂配方的研究结果以夏季栽培樱桃番茄为实验材料,分别用单因素试验确定了以枯草芽孢杆菌、丁子香酚、柠檬酸、壳聚糖等正交实验的四个因素；采用L9(34)的正交试验,并进行了验证试验,得到最佳樱桃番茄采后保鲜剂配方为：枯草芽孢杆菌1÷108cfu.ml-1、丁子香酚0.015g.L"1、壳聚糖浓度1.0wt%、柠檬酸浓度1.0wt%,该保鲜剂处理后,可显著减少樱桃番茄采后发病率,减少采后腐烂损失,以发病率20%为评价指标,可将樱桃番茄20℃贮藏的贮藏期延长至21d以上；同时,使樱桃番茄贮藏期失重率和Vc损失显著减少(P<0.05),具有显著的保鲜效果。对该樱桃番茄保鲜剂进行了急性毒性试验,结果表明：雌、雄两性小鼠急性经口毒性(LDso)均大于40.0mL.kg-1体重,根据急性毒性(LDso)剂量分级表,该樱桃番茄保鲜剂属无毒类。(6)采前与采后综合保鲜方法研究结果研究了秋季樱桃番茄采前田间喷施啶菌噁唑与采后保鲜剂处理的综合保鲜处理及其单一因素处理对樱桃番茄贮藏保鲜的效果。结果表明：①秋季樱桃番茄采前田间喷施0.4mL.L"1啶菌噁唑,使秋季樱桃番茄中Vc含量有一定的升高,但效果不显著(P<0.05)；从贮藏效果来看,樱桃番茄采后发病率、失重率、Vc的损失显著减少,贮藏21d后,樱桃番茄发病率为15.00±10.00%,低于20%,显著低于空白处理组的33.33+2.89%。②秋季樱桃番茄采后用保鲜剂处理,樱桃番茄采后发病率、失重率、Vc的损失显著减少,贮藏21d后,樱桃番茄发病率为6.67±2.88%,低于20%,显著低于空白处理组的33.33+2.89%；且保鲜剂处理的贮藏保鲜效果优于采前田间喷施啶菌噁唑的效果；③采前与采后综合保鲜方法对樱桃番茄采后贮藏保鲜效果优于单一田间啶菌噁唑喷施和单一采后保鲜剂处理：综合保鲜处理樱桃番茄贮藏21d后,发病率为3.33+2.89%,低于20%,显著低于单一采前田间喷施啶菌嗯唑处理组的15.00±10.00%和空白处理组的33.33±2.89%,也低于单一采后樱桃番茄保鲜剂处理组的6.67±2.88%,使樱桃番茄20℃贮藏的贮藏期延长至21d以上；同时,使樱桃番茄贮藏期失重率和Vc损失显著减少(P<0.05),对减少樱桃番茄采后损失,延长樱桃番茄贮藏期,保鲜效果更加显著。此樱桃番茄采前与采后综合保鲜方法为：采前田间喷施0.4mL.L"1的啶菌噁唑与采后保鲜剂(枯草芽孢杆菌1×108cfu.ml-1、丁子香酚0.015g.L-1、壳聚糖浓度1.0wt%、柠檬酸浓度1.0wt%)处理。(7)采后樱桃番茄中啶菌噁唑残留安全的结果本实验建立了樱桃番茄果实中啶菌噁唑残留的高效液相色谱分析方法：样品经乙酸乙酯提取,C18固相萃取柱净化；高效液相色谱仪配有紫外检测器检测。该方法在0.05mg.L-1～100mg.L-1浓度范围内回归方程为y=104040x+302.68,相关系数r为0.9999；3个添加水平(0.5、1.0、5.0mg.kg-1)下回收率为88.69～96.82%,相对标准偏差为2.21-3.03%；方法检出浓度为0.01mg.kg-1。樱桃番茄果实中啶菌嗯唑残留变化的研究表明：樱桃番茄中啶菌噁唑残留量采前田间和采后贮藏中均呈下降趋势,啶菌嗯唑残留在采后的下降速度比采前下降的慢；采后樱桃番茄中啶菌噁唑残留降解与贮藏温度有关,贮藏温度越低,啶菌嗯唑降解越慢。本研究计算得到啶菌噁唑的ADI为0.1mg.kg-1,从而得到啶菌噁唑在樱桃番茄中的理论最大残留限量(MRL)为17.24mg.kg-1;对樱桃番茄中啶菌噁唑农药残留安全的研究表明：啶菌噁唑喷施后2h,在金珠樱桃番茄中残留量为1.19mg.kg-1,在综合保鲜樱桃番茄中的残留量为0.96mg.kg-1,均远远低于其理论MRL,因此,按照本实验啶菌噁唑残留测定的的结果,啶菌噁唑农药按照该药剂推荐用量和采前间隔期在田间使用,樱桃番茄采后食用是安全的。

全文目录

摘要  4-7
Abstract  7-11
目录  11-14
1 序言  14-27
  1.1 樱桃番茄概述  14
    1.1.1 樱桃番茄简介  14
    1.1.2 樱桃番茄在我国的生产现状  14
  1.2 樱桃番茄采后贮藏保鲜的评价指标  14-18
    1.2.1 感官品质  14-16
    1.2.2 营养品质  16
    1.2.3 腐烂率  16-17
    1.2.4 失重率  17
    1.2.5 贮藏期和货架期  17-18
  1.3 采前田间药剂喷施保鲜技术的研究进展  18-19
    1.3.1 化学合成杀菌剂  18
    1.3.2 生物源杀菌剂  18-19
  1.4 采后保鲜技术研究进展  19-21
    1.4.1 低温冷藏  19
    1.4.2 保鲜剂  19-21
  1.5 樱桃番茄采后农药残留安全  21-24
    1.5.1 我国番茄中农药登记情况  21-22
    1.5.2 我国标准对樱桃番茄化学残留安全的规定  22
    1.5.3 樱桃番茄采后农药残留安全研究  22-23
    1.5.4 啶菌噁唑农药残留的研究进展  23-24
  1.6 论文研究目的意义和研究内容  24-27
    1.6.1 论文研究目的和意义  24-25
    1.6.2 研究内容  25-26
    1.6.3 技术路线  26-27
2 材料与方法  27-44
  2.1 试验材料  27-29
    2.1.1 主要原材料  27-28
    2.1.2 引物  28
    2.1.3 主要仪器和设备  28-29
    2.1.4 主要试剂  29
  2.2 试验方法  29-44
    2.2.1 樱桃番茄采后病原菌的分离与定性分析  29-31
    2.2.2 分离菌株对采后樱桃番茄的致病性研究  31
    2.2.3 杀菌剂对灰葡萄孢菌和链格孢菌的抑菌效果研究  31-33
    2.2.4 采前田间喷施杀菌剂对樱桃番茄采后贮藏保鲜的影响研究  33-35
    2.2.5 樱桃番茄采后保鲜剂配方研究  35-38
    2.2.6 采前与采后综合保鲜研究  38-39
    2.2.7 樱桃番茄果实中啶菌噁唑残留安全的研究方法  39-41
    2.2.8 樱桃番茄各指标的测定方法  41-44
3 结果与分析  44-63
  3.1 采后樱桃番茄病原菌分离与定性分析结果  44-45
    3.1.1 致病菌的分离与纯化结果  44
    3.1.2 定性分析结果  44-45
  3.2 分离菌株对采后樱桃番茄致病性研究结果  45-46
  3.3 杀菌剂对灰葡萄孢菌和链格孢菌的抑菌效果研究  46-48
    3.3.1 杀菌剂对灰葡萄孢菌抑菌效果研究结果  46-47
    3.3.2 杀菌剂对链格孢菌的抑菌效果研究结果  47-48
  3.4 采前田间喷施杀菌剂对樱桃番茄采后贮藏保鲜的影响  48-53
    3.4.1 采前田间喷施杀菌剂  48
    3.4.2 采前田间喷施杀菌剂对樱桃番茄贮藏期发病率的影响  48-50
    3.4.3 采前田间喷施杀菌剂对樱桃番茄贮藏期失重率的影响  50
    3.4.4 采前田间喷施杀菌剂对樱桃番茄中Vc含量的影响  50-51
    3.4.5 采前田间喷施杀菌剂对樱桃番茄中可滴定酸含量的影响  51-52
    3.4.6 采前田间喷施杀菌剂对樱桃番茄中可溶性固形物含量的影响  52-53
  3.5 樱桃番茄采后保鲜剂配方研究结果  53-58
    3.5.1 供试杀菌剂选择的结果  53-54
    3.5.2 有机酸选择的结果  54
    3.5.3 壳聚糖浓度选择的结果  54-55
    3.5.4 樱桃番茄保鲜剂配方正交试验优化的结果  55-57
    3.5.5 验证试验的结果  57-58
    3.5.6 保鲜剂配方安全性评价结果  58
  3.6 采前与采后综合保鲜研究结果  58-59
  3.7 樱桃番茄果实中啶菌噁唑残留安全的研究结果  59-63
    3.7.1 樱桃番茄果实中啶菌噁唑农药残留检测方法  59-61
    3.7.2 樱桃番茄果实中啶菌噁唑残留变化的研究结果  61-63
    3.7.3 樱桃番茄果实中啶菌噁唑残留安全的研究结果  63
4 讨论  63-64
5 结论  64-67
参考文献  67-74
附件  74-81
致谢  81

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