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槲皮素、没食子酸对SMMC-7721肝癌细胞PI3K/AKT信号通路影响的探讨

作　者: 孙佳
导　师: 叶丽红
学　校: 南京中医药大学
专　业: 中医学
关键词: 槲皮素没食子酸原发性肝癌人肝癌细胞SMMC-7721 细胞凋亡 PI3K/AKT信号通路
分类号: R735.7
类　型: 硕士论文
年　份: 2012年
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内容摘要

研究目的：探讨国医大师经验方“抗癌扶正方”中泽漆的单体槲皮素、没食子酸在抗肝癌、促进细胞凋亡方面的作用机制。研究方法：体外培养肝癌细胞SMMC-7721,顺铂为阳性组,观察不同浓度槲皮素、没食子酸对细胞凋亡的作用及其相关机制。采用MTT法检测槲皮素、没食子酸对细胞生长的影响,并观察在不同时间点的细胞形态；利用流式细胞仪检测药物作用后的细胞凋亡情况及细胞周期分布；运用RT-PCR及Western Blot法检测单体对SMMC-7721细胞PI3K/AKT信号通路相关凋亡蛋白表达的影响。研究结果：槲皮素、没食子酸对人肝癌细胞SMMC-7721增殖有明显抑制作用,呈浓度依赖性和时间依赖性。流式结果提示,槲皮素可将SMMC-7721细胞周期阻滞于G0/G1期,并且其凋亡率随浓度增加而逐渐增加；没食子酸可使SMMC-7721细胞周期阻滞于Go/G1期,凋亡率随药物浓度增加的上升趋势不显著。细胞形态观察,药物组细胞呈现不规则形,甚至变圆,体积缩小,细胞结构没有对照组紧密,某些细胞甚至出现脱落、漂浮现象。RT-PCR、Western Blot司亡相关蛋白表达检测表明,药物组AKT的表达受抑制,PTEN、Caspase9蛋白的表达率随着药物浓度的增加而增加。研究结论：槲皮素、没食子酸均能诱导人肝癌细胞SMMC-7721凋亡,其机制可能是使细胞周期阻滞于G0/G1期,PTEN的过表达抑制AKT活化,激活Caspase9从而促进细胞凋亡。PI3K/AKT言号通路的表达,可能是槲皮素、没食子酸诱导肝癌细胞SMMC-7721凋亡的机制之一。

全文目录

目录  5-6
摘要  6-7
Abstract  7-8
中英文对照表  8-9
前言  9-10
第一部分文献研究  10-20
  1 名中医治疗肝癌经验总结  10-13
    1.1 病因病机  10
    1.2 辨证论治  10-11
    1.3 遣方用药  11-12
    1.4 临床经验  12-13
  2 PI3K/AKT信号通路研究  13-14
  3 泽漆及其单体槲皮素、没食子酸的研究  14-20
    3.1 泽漆  14-15
    3.2 槲皮素  15-17
    3.3 没食子酸  17-20
第二部分实验研究  20-41
  前期研究  20-21
  1 槲皮素对SMMC-7721 肝癌细胞PI3K/AKT信号通路的影响  21-34
    1.1 仪器与材料  21-22
    1.2 实验方法  22-28
    1.3 实验结果与分析  28-33
    1.4 讨论  33-34
  2 没食子酸对SMMC-772 1肝癌细胞PI3K/AKT信号通路的影响  34-41
    2.1 仪器与材料  34
    2.2 实验方法  34-35
    2.3 实验结果与分析  35-40
    2.4 讨论  40-41
参考文献  41-44
结语  44-45
攻读硕士学位期间取得的学术成果  45-46
致谢  46

槲皮素、没食子酸对SMMC-7721肝癌细胞PI3K/AKT信号通路影响的探讨

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