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西洋参茎叶皂苷对大鼠局灶性脑缺血损伤的保护作用研究

作　者: 关利新
导　师: 苏云明
学　校: 黑龙江中医药大学
专　业: 中西医结合基础
关键词: 西洋参茎叶皂苷 脑缺血 细胞凋亡 自由基 细胞内钙
分类号: R285.5
类　型: 博士论文
年　份: 2008年
下　载: 232次
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内容摘要


目的:研究西洋参茎叶皂苷（PQS）对大鼠局灶性脑缺血损伤的保护作用及作用机制。方法:1.采用雄性Wistar大鼠,PQS 50、100 mg·kg-1ig,连续7d后利用线栓法建立大鼠大脑中动脉栓塞模型,造模后24h检测下列指标:（1）按Longa法进行神经症状评分,光镜和电镜观察脑组织病理形态改变,TTC染色法测定脑梗死范围;（2）比色法检测患侧脑组织LDH、SOD、NOS活性及LA、MDA、NO含量;（3）TUNEL法和流式细胞仪检测大脑皮质细胞凋亡情况,RT-PCR技术及免疫组化法检测大脑皮质凋亡相关基因Bcl-2、Bax、Caspase-3 mRNA和蛋白表达。2.采用体外PC12细胞培养,PQS终浓度为40、100、250μg·mL-1,以倒置相差显微镜、MTT法和比色法检测缺糖缺氧、谷氨酸（Glu）、H2O2、NO损伤后PC12细胞形态学变化、细胞活力和培养液中LDH活性,比色法检测缺糖缺氧和Glu损伤后细胞内SOD或NOS活性、细胞内MDA或培养液中NO含量;荧光分光光度法检测应用缺糖缺氧、Glu、高K+、钙离子载体A23187及咖啡因等刺激因素后细胞内Ca2+浓度([Ca2+]i)变化。结果:1.PQS能明显改善局灶性脑缺血大鼠神经功能缺损体征,减少神经功能缺损评分,缩小脑梗死范围,减轻病理形态改变。2.PQS能明显升高局灶性脑缺血大鼠脑组织LDH和SOD活性,降低NOS活性及LA、MDA和NO含量。3.PQS能明显降低局灶性脑缺血大鼠脑组织凋亡阳性细胞表达及细胞凋亡率,增加Bcl-2 mRNA和蛋白表达,降低Bax和Caspase-3 mRNA及蛋白表达,提高Bcl-2/Bax比值。4.PQS能明显增加缺糖缺氧、Glu、H2O2、NO损伤后PC12细胞活力,降低培养液中LDH活性,改善细胞形态学变化;增加缺糖缺氧损伤后SOD活性、降低MDA和NO含量;降低Glu损伤后NOS活性和NO含量。5.PQS能明显降低缺糖缺氧、Glu、高K+、A23187及咖啡因介导的PC12细胞内[Ca2+]i升高。结论:PQS对局灶性脑缺血损伤具有保护作用,其作用机制可能与抗氧化损伤、减轻酸中毒及NO的细胞毒作用、影响凋亡相关基因表达而抑制细胞凋亡、直接拮抗脑缺血损伤级联反应中某些病理因素的作用及多途径抑制细胞内钙超载有关。

全文目录


缩略语表  4-5
中文摘要  5-7
英文摘要  7-9
前言  9-11
文献综述  11-48
  综述一 脑缺血损伤机制的研究进展  11-29
  综述二 脑缺血的中医药研究  29-41
  综述三 西洋参茎叶皂苷的药理研究概况  41-48
实验研究  48-115
  第一部分 西洋参茎叶皂苷对大鼠局灶性脑缺血后神经功能缺损和脑组织病理学改变的影响  48-57
    材料与方法  48-51
    结果  51-53
    讨论  53-55
    小结  55
    参考文献  55-57
  第二部分 西洋参茎叶皂苷对局灶性脑缺血大鼠脑组织酸中毒及自由基代谢的影响  57-67
    材料与方法  57-59
    结果  59-61
    讨论  61-64
    小结  64
    参考文献  64-67
  第三部分 西洋参茎叶皂苷对局灶性脑缺血大鼠神经细胞凋亡及凋亡相关基因表达的影响  67-87
    材料与方法  67-76
    结果  76-80
    讨论  80-84
    小结  84
    参考文献  84-87
  第四部分 西洋参茎叶皂苷对PC12细胞损伤的保护作用  87-102
    材料与方法  87
    结果  87-96
    讨论  96-99
    小结  99-100
    参考文献  100-102
  第五部分 西洋参茎叶皂苷对PC12细胞内钙离子浓度的影响  102-115
    材料与方法  102-105
    结果  105-109
    讨论  109-112
    小结  112-113
    参考文献  113-115
结论  115-117
附图  117-125
致谢  125-126
攻读博士学位期间发表的论文  126-128
个人简历  128

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