学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

榄香烯对视网膜母细胞瘤HXO-RB_（44）细胞Survivin、NF-κB基因表达和端粒酶活性的影响

作　者: 魏为
导　师: 唐罗生
学　校: 中南大学
专　业: 眼科
关键词: 视网膜母细胞瘤 HXO-RB44细胞 榄香烯 足叶乙甙 凋亡 survivin NF-κB 端粒酶活性 hTERT
分类号: R739.7
类　型: 博士论文
年　份: 2007年
下　载: 199次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载
 

内容摘要


视网膜母细胞瘤（retinoblastoma，RB）是婴幼儿最常见的眼内恶性肿瘤，严重危害患者的视力和生命，近年来化学治疗已逐渐成为治疗RB最重要的方法之一。目前应用于RB化疗的药物多存在副作用大、易导致耐药等缺点，寻找高效、低毒的化疗药物具有重要意义。榄香烯（elemene，化学名：1-甲基-1-乙烯基-2，4-二异丙基环已烷）是从中药温莪术挥发油中提取的油状物单体，属于不含氮的倍半烯烴类，为非细胞毒性的国家二类抗癌新药。研究证实榄香烯对体内外多种肿瘤具有较强的抑制和杀伤效应，但它的抗瘤机制尚未完全阐明。本实验采用榄香烯作用于视网膜母细胞瘤HXO-RB44细胞，探讨其抗癌机理，为临床应用榄香烯治疗RB提供理论和实验依据。第一章榄香烯抑制视网膜母细胞瘤HXO-RB44细胞生长的实验研究目的：观察榄香烯体外抑制视网膜母细胞瘤HXO-RB44细胞生长的作用。方法：应用台盼蓝拒染及MTT比色法观察榄香烯及足叶乙甙对视网膜母细胞瘤HXO-RB44细胞的生长抑制作用，通过统计分析确立榄香烯处理HXO-RB44细胞的浓度。结果：榄香烯对视网膜母细胞瘤HXO-RB44细胞体外增殖有显著抑制作用，呈时间和剂量依赖性，榄香烯作用HXO-RB44细胞24h、48h、72h的IC50值分别为127.75μg／mL、85.43μg／mL和52.95μg／mL：榄香烯和足叶乙甙联合用药其对HXO-RB44细胞的抑制率大于单独应用榄香烯或足叶乙甙。结论：榄香烯可抑制视网膜母细胞瘤HXO-RB44细胞生长，榄香烯及和足叶乙甙联合用药可加强杀伤肿瘤细胞的作用。第二章榄香烯诱导视网膜母细胞瘤HXO-RB44凋亡及对凋亡相关基因Survivin、NF-κB表达的影响目的：探讨榄香烯对视网膜母细胞瘤HXO-RB44细胞凋亡及对survivin、NF-κB基因表达的影响方法：体外培养人视网膜母细胞瘤HXO-RB44细胞，取对数生长期细胞分对照组和药物处理组，药物处理组榄香烯终浓度为40μg／mL、80μg／mL、120μg／mL，作用24h、48h、72h后收集细胞。应用流式细胞术观察榄香烯对HXO-RB44细胞的凋亡及细胞周期的影响；应用免疫细胞化学方法和Western Blot法检测各实验组survivin、NF-κB p65蛋白表达；用RT-PCR方法检测各组细胞survivin mRNA的表达。结果：榄香烯诱导HXO-RB44细胞凋亡，细胞凋亡率随着榄香烯作用时间和剂量的增加而增加；随着榄香烯作用时间延长，HXO-RB44细胞出现G2／M期的阻滞。survivin、NF-κB p65在HXO-RB44细胞中均有表达；随着榄香烯作用时间延长，survivin、NF-κB p65表达下降。结论：人视网膜母细胞瘤HXO-RB44细胞株存在survivin、NF-κBp65的高表达，榄香烯可通过下调survivin、NF-κB p65基因的表达而诱导HXO-RB44细胞凋亡。第三章榄香烯对视网膜母细胞瘤HXO-RB44细胞端粒酶、端粒酶逆转录酶活性的影响目的：探讨端粒酶和端粒酶逆转录酶在榄香烯抑制视网膜母细胞瘤HXO-RB44细胞生长、诱导其凋亡过程中的作用及其意义。方法：体外培养人视网膜母细胞瘤HXO-RB44细胞，分对照组和药物处理组，药物处理组榄香烯终浓度为80μg／mL，分别作用24h、48h、72h后收集细胞。应用MTT比色法观察榄香烯对视网膜母细胞瘤HXO-RB44细胞的生长抑制作用；应用流式细胞术观察榄香烯对HXO-RB44细胞的凋亡的影响；应用端粒重复扩增（TRAP）法检测各实验组细胞端粒酶活性，Western Blot法测定hTERT蛋白表达。结果：随着榄香烯作用时间延长，HXO-RB44细胞生长抑制率和凋亡率增加。HXO-RB44细胞中端粒酶活性和hTERT蛋白表达随着榄香烯作用时间延长而明显降低。结论：HXO-RB44细胞株存在端粒酶活性的表达，榄香烯可通过下调hTERT蛋白表达，抑制端粒酶活性从而抑制HXO-RB44细胞生长，诱导其凋亡。榄香烯有望成为抗视网膜母细胞瘤的新的化疗药物。

全文目录


中文摘要  4-8
英文摘要  8-12
英文缩略语  12-14
前言  14-17
第一章 榄香烯抑制视网膜母细胞瘤HXO-RB_(44)细胞生长的实验研究  17-29
  1 材料与方法  17-20
  2 结果  20-24
  3 讨论  24-26
  4 结论  26
  参考文献  26-29
第二章 榄香烯诱导视网膜母细胞瘤HXO-RB_(44)细胞及对凋亡相关基因survivin、NF-kB表达的影响  29-51
  1 材料与方法  29-33
  2 结果  33-43
  3 讨论  43-47
  4 结论  47
  参考文献  47-51
第三章 榄香烯对视网膜母细胞瘤HXO-RB_(44)细胞端粒酶、端粒酶逆转录酶活性的影响  51-62
  1 材料与方法  51-54
  2 结果  54-56
  3 讨论  56-59
  结论  59
  参考文献  59-62
综述一 视网膜母细胞瘤的治疗进展  62-70
综述二 Survivin与眼科疾病  70-81
致谢  81-82
攻读学位期间发表论文及获奖情况  82

相似论文

  1. 西施舌精子冷冻保存及其冷冻损伤机理研究,S968.3
  2. CADPE抗肿瘤作用及对胃癌细胞凋亡的影响,R735.2
  3. 塞来昔布与β-榄香烯联合给药的抗肿瘤作用及其机制研究,R96
  4. TRAIL对肿瘤侵润CD4~+CD25~+ Treg的调节作用,R730.2
  5. 醋酸铅对鲤鱼卵巢上皮细胞毒性的研究,X174
  6. 地克珠利对柔嫩艾美耳球虫第二代裂殖子甘油醛-3-磷酸脱氢酶的影响,S858.31
  7. PCV2对体外培养仔猪淋巴细胞钙信号的影响及其机理初探,S858.28
  8. 血管生成调节因子对性成熟小鼠卵泡及其血管发育的影响,S852.2
  9. β-catenin在猪卵巢组织中的表达以及对猪卵巢颗粒细胞凋亡及类固醇生成酶的影响,S828
  10. 伏马菌素B1和黄曲霉毒素B1联合诱导Vero细胞凋亡的研究,S856.9
  11. 黄曲霉毒素B1和脱氧雪腐镰刀菌烯醇诱导锦鲤原代肝细胞凋亡机制的初步研究,S856.9
  12. 沉默BMPR-IB基因对猪卵巢颗粒细胞凋亡及BMP通路相关基因表达的影响,S828
  13. 脱氧雪腐镰刀菌烯醇对鸡软骨细胞增殖、分化及凋亡的影响,S858.31
  14. Foxol对小鼠颗粒细胞凋亡的影响,S865.13
  15. 蜂毒素对人肝癌HepG-2细胞株裸鼠移植瘤生长的抑制作用及部分机制研究,R735.7
  16. 核蛋白NDP52与肿瘤坏死因子受体相关因子TRAF6相互作用及临床意义的研究,R363
  17. 卷曲螺旋蛋白52与TRAF6及其家族成员相互作用对NF-κB通路的影响研究,R363
  18. 骨髓间充质干细胞预移植1周对大鼠心肌缺血再灌损伤的修复作用,R542.22
  19. 硒对饮水型氟中毒致脑损伤的干预分子机理研究,R599
  20. Toll样受体4信号通路在脂多糖促进肺癌细胞增殖中的机制探讨,R734.2
  21. WWOX在胆管癌组织中的表达及其对胆管癌细胞生物学行为的影响,R735.8

中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 眼肿瘤
© 2012 www.xueweilunwen.com