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RNA干扰对p21电离辐射生物效应的影响

作　者: 闫风琴
导　师: 鞠桂芝
学　校: 吉林大学
专　业: 放射医学
关键词: p21 电离辐射 RNAi 细胞周期阻滞 细胞周期解偶联 细胞凋亡
分类号: R811.5
类　型: 博士论文
年　份: 2007年
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内容摘要


p21是目前已知的具有最广泛激酶活性的细胞周期抑制蛋白,可广泛的抑制cyclin-CDK复合物活性,在细胞增殖、分化、衰老、凋亡中起重要的调控作用。另外,p21还可直接参与调节细胞生长阻滞、成熟及衰老相关基因的表达。随着研究的深入,发现p21基因尚有其它功能,最近有报道指出p21在DNA损伤诱导细胞周期解偶联中起重要的调控作用。本实验通过化学合成法合成小的干扰RNA片段,构建了p21干扰质粒pSilencer3.1-H1 neo-p21,利用RNAi技术,从细胞周期阻滞、细胞周期解偶联及细胞凋亡等方面探讨电离辐射对p21基因辐射生物效应的影响,结果表明,p21基因可诱导细胞发生G1期、G2期周期阻滞,并在细胞周期解偶联及细胞凋亡的发生中起重要的调控作用。本项研究将为肿瘤放射治疗提供重要的理论和实验依据。

全文目录


内容提要  5-9
第一章 绪论  9-28
  1. p21 的来源  9
  2. p21 的结构  9-10
  3. p21 活化的机制  10-11
  4. p21 失活的机制  11-13
  5. p21 的生物学作用  13-19
  6. RNAi 技术及其应用  19-28
第二章 材料与方法  28-41
  1. 主要试剂及器材  28-29
  2. 主要仪器  29-30
  3. 细胞株  30
  4. 细胞生物学实验方法  30-33
  5. 细菌培养技术  33-36
  6. 分子生物学实验方法  36-40
  7. 统计学方法  40-41
第三章 实验结果  41-79
  1. X 射线照射对EL-4 细胞、CHO 细胞p21 蛋白表达的影响  41-44
  2. X 射线照射对EL-4 细胞、CHO 细胞p21 基因转录的影响  44-49
  3. X 射线照射对EL-4 细胞、CHO 细胞周期进程的影响  49-54
  4. X 射线照射对EL-4 细胞、CHO 细胞倍体的影响  54-58
  5. X 射线照射对EL-4 细胞、CHO 细胞凋亡的影响  58-61
  6. pSilence13.1-H1 neo-p21 干扰质粒的构建及鉴定  61-63
  7. siRNA 干扰对EL-4 细胞、CHO 细胞p21 蛋白表达的影响  63-64
  8. siRNA 干扰对EL-4 细胞、CHO 细胞p21 基因转录的影响  64-67
  9. siRNA 干扰对EL-4 细胞、CHO 细胞周期进程的影响  67-70
  10. siRNA 干扰对EL-4 细胞、CHO 细胞倍体的影响  70-74
  11. siRNA 干扰对EL-4 细胞、CHO 细胞凋亡的影响  74-79
第四章 讨论  79-87
  1. 电离辐射对p21 表达的影响  79-81
  2. 干扰载体的构建及干扰效率的检测  81-82
  3. 电离辐射诱导p21 表达的生物学意义  82-86
  4. 研究展望  86-87
结论  87-88
参考文献  88-98
攻博期间发表的学术论文及其他成果  98-99
致谢  99-100
中文摘要  100-103
Abstract  103-106

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中图分类: > 医药、卫生 > 特种医学 > 放射医学 > 放射医学基础理论 > 医用放射生物学
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