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河南省小麦纹枯病菌致病力分化及遗传多样性研究

作 者: 吕柏林
导 师: 李洪连;汪敏
学 校: 河南农业大学
专 业: 作物安全生产
关键词: 小麦纹枯病 丝核菌 rDNA-ITS ISSR 遗传多样性
分类号: S435.121
类 型: 硕士论文
年 份: 2011年
下 载: 16次
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内容摘要


从河南省周口、安阳、南阳、新乡、焦作、驻马店、鹤壁、许昌、濮阳、洛阳、商丘、信阳、漯河等13个地区30个县(市)分别采集具有典型症状的小麦纹枯病样本,经组织分离、保存,共得到小麦纹枯病菌157株。细胞核染色结果表明,所分离菌株均为双核丝核菌。菌丝融合测定及rDNA-ITS测序结果表明,156株纹枯病菌为AG-D融合群,1株为AG-BO融合群。温室测定113株小麦纹枯病菌菌株在陕229、豫麦49、冀5385等3个小麦品种上的致病力,结果表明:河南省小麦纹枯病菌菌株间致病力存在显著性差异,分为强、中、弱三种致病力类型,分别占58.40%、35.40%和6.19%。河南省不同地区间小麦纹枯病菌致病力存在一定差异,以鹤壁、周口、漯河等地区菌株致病力最强,信阳地区菌株致病力最弱。河南省同一地区不同小麦纹枯病菌菌株之间致病力存在显著差异。小麦纹枯病菌对3个小麦品种的致病力存在显著性差异,其中对陕229致病力最强,对冀5385致病力最弱。选取部分具有代表性及与标准菌株不完全融合的29株小麦纹枯病菌,进行rDNA-ITS扩增,测序结果表明小麦纹枯病菌ITS1区长度为212bp,5.8S区长度为153bp,ITS2区长度为234bp。对小麦纹枯病菌ITS1-5.8S- ITS2序列比对结果表明,小麦纹枯病菌5.8S区高度保守,而ITS1和ITS2区序列变异性较大。通过UPGMA聚类结果表明,小麦纹枯病菌不同菌丝融合群ITS1-5.8S- ITS2序列差异较大,而同一菌丝融合群菌株间差异性较小。在优化ISSR反应体系的基础上,从52条ISSR引物中筛选出7条多态性好的引物,对河南省13个地区119株小麦纹枯病菌进行ISSR-PCR扩增。利用popgene1.32软件处理扩增数据,得到各地理群内基因多样度Hs平均值为0.1513,种群基因分化系数Gst平均值为0.3046,基因流Nm为1.1416。结果表明,河南省13个小麦纹枯病菌地理群内存在一定的基因多样性,地理群间存在着一定的遗传分化,地理群间还存在着较大的基因流动。利用NTSYSpc2.10e软件对扩增结果进行聚类、分析后发现,水稻纹枯病菌菌株与小麦纹枯病菌菌株在相似系数为0.52时分成两大组,说明水稻纹枯病菌和小麦纹枯病菌的差异性较大。小麦纹枯病菌菌株在相似系数为0.67时分成三大组,其中一组为AG-BO融合群的HZZ-5菌株,另两组为AG-D融合群,说明小麦纹枯病菌不同融合群菌株间也存在一定的差异性。小麦纹枯病菌菌株在相似系数为0.82时,南阳地区菌株聚集为一组,而其它地区小麦纹枯病菌菌株的分布比较分散,说明南阳地区小麦纹枯病菌是一个比较孤立的群体,而河南省其它地区小麦纹枯病菌菌株间的基因交流比较频繁。

全文目录


摘要  7-81 文献综述  8-15  1.1 小麦纹枯病的概况  8-9    1.1.1 小麦纹枯病的发生及危害  8    1.1.2 小麦纹枯病的病原  8-9    1.1.3 小麦纹枯病菌致病力分化研究  9  1.2 核糖体基因转录间隔区 ITS  9-10  1.3 常用分子标记方法及应用  10-14    1.3.1 限制性片段长度多态性  11    1.3.2 随机扩增多态性 DNA  11-12    1.3.3 限制性扩增片段长度多态性  12    1.3.4 简单重复序列  12-13    1.3.5 简单重复序列区间  13-14  1.4 研究目的及意义  14-152 引言  15-163 材料与方法  16-23  3.1 实验材料  16-18    3.1.1 标准菌株及小麦品种  16    3.1.2 供试菌株  16-17    3.1.3 实验试剂  17-18      3.1.3.1 购买试剂  17      3.1.3.2 配制试剂  17-18  3.2 实验方法  18-23    3.2.1 小麦纹枯病菌的分离、鉴定及保存  18-19    3.2.2 小麦纹枯病菌菌丝细胞核数目的观察  19    3.2.3 小麦纹枯病菌菌丝融合群鉴定  19    3.2.4 小麦纹枯病菌生长速度测定  19    3.2.5 小麦纹枯病菌致病力测定  19-20    3.2.6 小麦纹枯病菌菌丝的收集  20    3.2.7 小麦纹枯病菌DNA 的提取及纯化  20-21    3.2.8 小麦纹枯病菌rDNA-ITS 序列的扩增、测序和比对  21    3.2.9 ISSR 引物的筛选及退火温度的确定  21-23    3.2.10 ISSR-PCR 反应  23    3.2.11 数据分析  234 结果与分析  23-47  4.1 小麦纹枯病菌的鉴定及菌丝细胞核数目的观察结果  23-24  4.2 小麦纹枯病菌菌丝融合结果  24-25  4.3 河南省小麦纹枯病菌生长速度测定相关统计  25-27  4.4 小麦纹枯病菌致病力测定结果  27-35    4.4.1 河南省不同地区小麦纹枯病菌致病力差异分析  27-29    4.4 2 河南省同一地区不同菌株小麦纹枯病菌致病力差异分析  29-30    4.4.3 河南省小麦纹枯病菌致病力测定结果及相关统计  30-35  4.5 河南省小麦纹枯病菌菌株生长速度与致病力之间的关系  35-36  4.6 河南省小麦纹枯病菌rDNA-ITS 分析  36-39  4.7 小麦纹枯病菌ISSR 分析  39-47    4.7.1 小麦纹枯病菌DNA 检测  39    4.7.2 ISSR 引物的筛选及退火温度的确定结果  39-41    4.7.3 ISSR 引物随机扩增产物的检测  41-43    4.7.4 河南省小麦纹枯病菌遗传变异和遗传分化  43    4.7.5 河南省小麦纹枯病菌遗传多样性聚类分析  43-475 结论与讨论  47-49  5.1 河南省小麦纹枯病菌的群体组成研究  47  5.2 河南省小麦纹枯病菌致病力分化研究  47-48  5.3 河南省小麦纹枯病菌遗传多样性研究  48-49参考文献  49-55ABSTRACT  55-57附录  57-67

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中图分类: > 农业科学 > 植物保护 > 病虫害及其防治 > 农作物病虫害及其防治 > 禾谷类作物病虫害 > 麦类病虫害 > 病害
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