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益气健脾法与益气健脾祛痰化瘀法对脑老化小鼠的影响及其作用机制的比较研究

作　者: 詹向红
导　师: 李德新
学　校: 辽宁中医学院
专　业: 中医基础理论
关键词: 益气健脾法益气健脾祛痰化瘀法脑老化脂质过氧化神经递质受体线粒体膜电位细胞凋亡
分类号: R242
类　型: 博士论文
年　份: 2004年
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内容摘要

祖国医学认为，五脏是人体生命活动的中心，五脏虚损是衰老的根本原因。其中，肾中精气渐亏与脑的老化密切相关。肾受五脏六腑之精而藏之，而脾主运化升清，乃后天之本，气血生化之源，五脏皆禀气于脾胃，故精髓之海必赖后天为之资。人过中年，其气降者多，升者少，清气不升则脑髓失养，神衰健忘。因此，补益脾胃是干预脑老化，延缓衰老的重要措施之一。同时，脾虚易生湿聚痰，痰凝气滞或脾虚气亏又可致血瘀，痰浊瘀血是影响衰老的重要因素，据虚实衰老说又当补泻并施。本课题根据脾胃为后天之本的理论，以补益脾胃为切入点，设益气健脾及益气健脾祛痰化瘀两种治法，旨在观察其防治脑老化的作用及其机制，并进行初步比较，为脾虚衰老及脑老化提供理论支持和实验依据。本项研究主要采用以下方法： 1．选用昆明种2.5月龄的成年小鼠96只，随机分成正常对照组、模型对照组、中药A组、中药B组各24只。除正常对照组外，其余各组均采用D-半乳糖(D-galactose,D-gal)连续6周大剂量颈后部皮下注射，复制亚急性衰老及脑老化动物模型：造模同时，胃饲中药A组益气健脾药物、B组益气健脾祛痰化瘀药物。 2．实验第37天始用Morris水迷宫法观察脑老化模型小鼠学习记忆能力的变化，历时6天，之后取材并检测以下指标：①亚硝酸盐法、硫代巴比妥酸比色法、荧光法分别检测小鼠血清超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)、心肝组织丙二醛(methylenedioxyamphetamine，MDA)、脂褐素(liposcin，LPF)；②免疫组织化学SABC法和计算机图文分析系统检测小鼠大脑皮质、海马烟碱型乙酰胆碱受体(nicotinicacetylcholine receptor，nACh-R)、谷氮酸N-甲基-D-门冬氨酸受体(N-methyl-D-aspartate receptor，NMDA-R1)：③流式细胞术检测小鼠大脑神经元线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential，MMP)和神经元凋亡(apoptosis,博士学位论文APOP)百分率:④计算机图文分析系统检侧大脑皮层、海马神经元密度的变化;⑥放免法检测小鼠血清白介素一2(interleukin一2，工L一2):⑥光学显微镜观察小鼠大脑皮质、海马组织形态学的变化。结果表明: 1.与正常对照组相比，模型对照组小鼠学习记忆能力明显下降、大脑皮质和海马部位的结构变化与老龄动物一致，说明D一gal造模小鼠发生了脑的拟衰老变化。 2.益气健脾与益气健脾祛痰化疲法均能有效千预脑的老化，改善学习记忆能力。 3.益气健脾和益气健脾祛痰化疲法对脑老化小鼠的影响表现在:①提高血清及心、肝SOD活力，不同程度地降低心、肝组织的娜A及沙F含t，降低肝组织沙F的作用益气健脾祛痰化痪法优于益气健脾法;②抑制大脑皮质及海马nACh一R和确DA一R1表达的降低，对皮质部位nACh一R表达的作用益气健脾祛痰化癖法优于益气健脾法;③稳定切眼，，保护线粒体功能，益气健脾法优于益气健脾祛痰化癖法:④益气健脾法抑制大脑神经元凋亡，益气健脾祛痰化癖法作用不显著;⑤维持大脑皮质神经元密度，保护神经元:⑥提高血清IL一2含量:⑦益气健脾法阳氏脚腺老化指数，益气健脾祛痰化察法作用不显著:⑧改善神经元结构，延缓神经元老化。结论: 1.补益脾胃是干预脑老化，延缓衰老的重要措施之一。 2.益气健脾与益气健脾祛痰化癖法均能有效干预脑的老化，改善学习记忆能力。两者作用的途径、环节和程度有一定差别，但它们可能均是通过多途径和环节，作用于多个靶点产生整合调节从而发挥防治作用。 3.益气健脾与益气健脾祛痰化癖法千预脑老化的共同作用机制可能是 (l)调节机体过氧化损伤与抗氧化系统之间的平衡失调，提高抗氧化能力，作为抗氧化剂，干预机体及脑组织的衰老。 (2)提高N一乙酞胆碱受体及谷氨酸卜压。A受体表达，改善神经元之间的信息传递，维护神经环路通讯联络。 (3)稳定大脑神经元入仆护，维护线粒体功能。 (4)增加大脑皮质神经元密度，保护神经元。 (5)提高血清IL一2含量，改善机体免疫功能。 (6)改善神经元结构，延缓神经元老化。 4.益气健脾法与益气健脾祛痰化癖法干预脑老化作用机制的不同在于 (l)益气健脾法还能明显①抑制大脑神经元凋亡:②降低脚腺老化指数。博士学位论文 (2)益气健脾法稳定神经元h伍任的作用优于益气健脾祛痰化癖法。 (3)益气健脾祛痰化癖法①降低肝组织LPF:②提高nAC卜R在大脑皮质的表达优于单纯益气健脾法。

全文目录

中英文名词术语对照  3-4
英文摘要  4-10
中文摘要  10-13
前言  13-15
材料与方法  15-22
  1 实验动物与分组  15
  2 亚急性衰老及脑老化动物模型的建立与评估  15-16
  3 处理因素  16-17
  4 标本采集及制备  17
  5 观察指标与检测方法  17-21
  6 统计学方法  21-22
结果与分析  22-33
  1 对脑老化小鼠空间学习记忆能力的影响  22-23
  2 对脑老化小鼠脂质过氧化物及其相关抗氧化酶的影响  23-26
  3 对脑老化小鼠大脑皮质、海马神经元nACh-R、NMDA-R1表达的影响  26-28
  4 对脑老化小鼠大脑神经元线粒体膜电位的影响  28-29
  5 对脑老化小鼠大脑神经元凋亡百分率的影响  29-30
  6 对脑老化小鼠大脑皮层、海马神经元密度的影响  30
  7 对脑老化小鼠免疫功能的的影响  30-32
  8 对脑老化小鼠大脑组织形态学的影响  32-33
讨论  33-62
  1 中医学对脑老化的认识  33-39
  2 生命科学对脑老化的认识  39-44
  3 益气健脾与益气健脾祛痰化瘀法干预脑老化作用机理探析  44-55
  4 补益脾胃法延缓衰老的科学思路  55-60
  5 中西医衰老模型评述  60-62
结论  62-63
参考文献  63-71
致谢  71-72
综述  72-88
个人简历  88-89
附片  89-92

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