学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

抑制趋化因子受体CCR5保护小鼠及灵长类动物同种异体移植心脏的实验研究

作　者: 李军
导　师: 张凯伦；夏家红
学　校: 华中科技大学
专　业: 心血管外科学
关键词: 心脏移植 排斥反应 调节性T细胞 CCR5 环孢素 Maravirc AAM PPARγ MVC/CsA Th2
分类号: R654.2
类　型: 博士论文
年　份: 2011年
下　载: 31次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载
 

内容摘要


第一部分CCR5单克隆抗体延长小鼠异位移植心脏存活时间的研究目的：研究抑制趋化因子受体CCR5对小鼠异位移植心脏的保护作用。方法：近交系BALB/c小鼠做为供体,近交系C57小鼠做为受体建立小鼠腹部异位心脏移植模型,将其随机分为4组：CCR5 mAb+环孢素组(16只),CCR5 mAb组(8只),环孢素组(8只),空白对照组(8只)。联合治疗组于术后第18天处死8只小鼠,取出异位心脏,其他小鼠于异位移植心脏功能丧失时取出心脏。流式细胞术检测各组异位移植心脏内Treg细胞水平；实时荧光定量法检测各组异位移植心脏内Foxp3以及细胞因子IL-2、IL-10、TGF-β、INF-γmRNA的表达水平；免疫组化方法检测各组异位心脏内CCR5+、CD4+、CD8以及CD4+CD25+Foxp3+ T细胞的浸润情况；HE/EvG染色观察各组异位心脏急慢性排斥反应的程度。结果：CCR5 mAb联合环孢素组可以明显延长异位移植物存活时间(>90d,P<0.001),减少移植物内CD4+和CD8+T细胞的数量(P<0.005),增加CD4+CD25+Foxp3+ T细胞的比例(23.98±1.55%vs 6.30±0.57%,P<0.005)。同时,CCR5 mAb联合环孢素组还可以降低移植物内IL-2,INF-γmRNA的水平,增加IL-10和Foxp3 mRNA的水平,TGF-βmRNA的水平在联合治疗组第18天明显升高,但在第90天又降至对照组水平。过继性输注Treg细胞可以明显延长移植物存活时间。结论：CCR5 mAb联合环孢素可以有效的减轻急慢性排斥反应,保护异位移植心脏。第二部分CCR5拮抗剂Maraviroc保护灵长类动物异位移植心脏的研究目的：研究CCR5拮抗剂Maraviroc对灵长类动物异位移植心脏的保护作用方法：建立灵长类动物恒河猴腹部异位心脏移植模型,将其随机分为4组：MVC+CsA组(MVC/CsA), MVC组,CsA组和对照组。MVC/CsA组分别于术后第9,30,45行直视下心内膜活检,并于第240天取出异位心脏。MVC组和CsA组于术后第9天行直视下心内膜活检,并于异位移植心脏功能丧失时取出心脏。利用组织化学的方法检测异位移植心脏内C3d, CCR5, CD4, CD8, CD68, Arg1, Mrc1 and PPARy的表达情况,同时应用流式细胞术检测不同时间点受体外周血T细胞亚类包括Thl, Th2, Th17 and Treg的表达情况。结果：MVC/CsA组可以明显延长异位移植物存活时间至240天(P<0.001)。同时MVC/CsA还可以延缓受体体内抗供体抗体的产生,减少移植物内CCR5+, CD4+, CD8+和CD68+细胞的数量(P<0.005),减少Th1,Th17细胞的浸润,增加Th2, Treg细胞的聚集。另外MVC/CsA还可以增加受体外周血及异位心脏内AAM以及PPARy的表达。结论：CCR5拮抗剂Maraviroc联合环孢素可以有效地抑制排斥反应,从而保护灵长类动物异位移植心脏。第三部分MVC/CsA通过PPARγ信号通路激活AAM目的：探讨MVC/CsA与AAM以及PPARγ之间的相互关系方法：在体外淋巴细胞混合实验中,加入CCR5拮抗剂Maraviroc以及环孢素,观察AAM表面标志Argl和Mrc1 mRNA的表达情况,对照组除了加入MVC/CsA外,还加入特异性的PPARγ抑制剂BADGE,然后观察Argl和Mrc1 mRNA的表达情况。体内实验进一步观察PPARγ抑制剂BADGE对异位移植心脏内Arg1和Mrc1表达情况的影响。进而,我们通过体内淋巴细胞混合实验观察CCR5拮抗剂Maraviroc对Th2类细胞因子表达的影响,体外实验观察Th2类细胞因子IL-4和IL-13对PPARγ以及Arg1和Mrc1表达情况的影响。结果：体外淋巴细胞混合实验及体内实验均证明MVC/CsA可以有效促进Arg1和Mrc1mRNA的表达,而应用PPARγ抑制剂BADGE后,Arg1和Mrc1 mRNA的表达水平也受到明显的抑制。另外,MVC/CsA可以促进Th2类细胞因子IL-4和IL-13的释放,而IL-4和IL-13可以有效的促进PPARγ以及Arg1和Mrc1表达。结论:MVC/CsA可以通过促进Th2类细胞因子IL-4和IL-13的释放,进而激活PPARγ,促进AAM的分化和成熟。

全文目录


中英文缩词略表  6-7
前言  7-12
  参考文献  9-12
摘要  12-15
Abstract  15-19
第一部分 CCR5单克隆抗体延长小鼠异位移植心脏存活时间的研究  19-37
  概述  19
  材料和方法  19-26
  结果  26-31
  讨论  31-33
  参考文献  33-36
  小结  36-37
第二部分 CCR5拮抗剂MARAVIROC保护灵长类动物异位移植心脏的研究  37-61
  概述  37
  材料和方法  37-45
  结果  45-51
  讨论  51-54
  参考文献  54-60
  小结  60-61
第三部分 MVC/CSA通过PPARΓ信号通路激活AAM  61-72
  概述  61
  材料和方法  61-63
  结果  63-66
  讨论  66-68
  参考文献  68-71
  小结  71-72
全文总结  72-73
展望  73-74
综述 趋化因子受体与心脏移植  74-85
  参考文献  79-85
攻读博士学位期间完成的学术论文  85-86
致谢  86-88
附录  88-151

相似论文

  1. TRAIL对肿瘤侵润CD4~+CD25~+ Treg的调节作用,R730.2
  2. MCMV感染同种异型皮肤移植小鼠急性间质性肺炎模型的建立,R-332
  3. 维生素A不同给药途径对持续性哮喘大鼠CD4~+CD25~+调节性T细胞及IL-4、IFN-γ细胞因子的影响,R562.25
  4. 辛伐他汀对伴高脂血症的阿尔茨海默病双转基因小鼠作用研究,R589.2
  5. 低温复苏对失血性休克大鼠肺组织PPAR-γ及相关基因表达的影响,R605.971
  6. 外周血CD4+CD25+Treg细胞、TGF-β1在斑秃患者的表达研究,R758.71
  7. 脓毒症肺损伤（ALI/ARDS）患者外周血免疫指标Th1、Th2、HLA-DR和Treg的变化及中西医结合治疗,R459.7
  8. PPARγ在子宫内膜上皮细胞中的表达及其功能的初步研究,R321
  9. 骨髓间充质干细胞对重症急性胰腺炎大鼠CD4~+CD25~+调节性T细胞的影响及中西医结合治疗,R576
  10. 骨髓间充质干细胞在同种心脏移植中对Treg细胞作用的实验研究,R654.2
  11. 环孢素A纳米粒丝素蛋白—聚乙烯醇共混膜剂的研究,R943
  12. 同种异体气管移植再上皮化的实验研究,R653
  13. 原发性肾病综合征患儿CD4~+CD25~+调节性T细胞动态变化及意义,R726.91
  14. B7-H1/PD-1在人结肠癌中的表达及其与调节性T细胞关系的研究,R392
  15. 急性冠脉综合征患者调节性T细胞稳态变化研究,R541.4
  16. 调节性T细胞在不同期COPD的变化,R563.9
  17. 1.tmTNF-α改善脂肪细胞胰岛素抵抗及其分子机制 2.TNF-α保守序列突变体的构建及改构TNFRBP三聚体化研究,R587.1
  18. SOCS3基因转染延长同种异体小鼠心脏移植物生存时间及其机制,R654.2
  19. BisⅧ对大鼠心脏移植排斥反应的抑制作用,R654.2
  20. 0.05%环孢素滴眼液治疗干眼病的疗效观察,R777
  21. 变应性鼻炎外周血Th17、CD4+IL-10+Treg、Th1/2细胞功能研究,R765.21

中图分类: > 医药、卫生 > 外科学 > 外科学各论 > 心脏血管和淋巴系外科学 > 心脏
© 2012 www.xueweilunwen.com