学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示
PI3K/AKT信号通路在AD发病中的作用
作 者: 尹刚
导 师: 龚成新;王建枝;周新文
学 校: 华中科技大学
专 业: 病理学与病理生理学
关键词: 阿尔茨海默病 β淀粉样蛋白(β-amyloid,Aβ) AKT BCL-2 JNK 细胞凋亡 PI3K/AKT GSK-3 PP2A PTP1B
分类号: R749.16
类 型: 博士论文
年 份: 2011年
下 载: 302次
引 用: 0次
阅 读: 论文下载
内容摘要
第一部分PI3K/AKT信号通路对Aβ诱导细胞凋亡影响【背景】β淀粉样蛋白(β-amyloid, Aβ)的过度产生和聚集是引起阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease, AD)的重要发病启动因素。AKT是调节神经元再生和维持神经元存活的重要分子之一,然而对于上调AKT是否能对抗Aβ诱导的神经元凋亡,至今仍未见报道。【目的】探讨上调PI3K/AKT通路对Aβ诱导细胞凋亡的保护作用和机制【方法】在转染AKT、非转染AKT及用或不用Wortmanin (AKT特异性抑制剂)的条件下,同时用20uM Aβ处理HEK293细胞。AnnexinV- PI双染和流式细胞仪检测HEK293细胞活性和细胞凋亡,RT-PCR检测AKTmRNA表达变化。免疫印迹法(western blot)检测HEK293细胞内凋亡相关蛋白caspase-3和bcl-2家族(包括Bcl-xL, Bcl-w, Bad, and Bax)和AKT、JNK、ERK的表达变化。【结果】Aβ(1-42)在不同的浓度(10 uM,20uM,50uM)作用24h后,AnnexinV-PI双染和流式结果显示Aβ(1-42)可以明显的增加HEK293细胞活性降低和细胞凋亡;瞬转高表达AKT可以有效的减少Aβ(1-42)引起的细胞毒性和促凋亡作用;AKT高表达能显著降低HEK293细胞中caspase-3表达量;高表达AKT的HEK293细胞中Bad和Bax表达量显著低于Aβ(1-42)处理组,而且AKT组Bcl-xL,Bcl-w表达量较Aβ(1-42)处理组显著增加;HEK293细胞高表达AKT后JNK活性明显增加;Wortmanine抑制AKT活性后,消除了高表达AKT对抗Ap诱导的HEK293细胞凋亡。【结论】高表达AKT可以有效的对抗AB诱导的细胞毒性,减少细胞凋亡,其机制是通过JNK激酶,促使抗凋亡蛋白Bcl-xL, Bcl-w表达减少和促凋亡Bad和Bax蛋白表达增加来实现的。第二部分上调PI3K/AKT信号通路对Aβ诱导的tau磷酸化的影响【背景】神经原纤维缠结(neurofibrillary tangles, NFTs)是阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease, AD)的主要病理学特征,NFTs的主要成分是异常过度磷酸化的微管相关蛋白tau,尽管一些研究报道β-淀粉样蛋白(β-amyloid, Aβ)可以通过抑制PI3K/AKT通路激活糖原合成激酶-3(Glycogen synthase kinase 3. GSK3),增加tau磷酸化,但上调AKT表达是否可以保护Aβ诱导的tau磷酸化,仍未见报道。【目的】本实验通过在HEK293/tau细胞株中上调PI3K/AKT通路观察神经元中tau磷酸化相关位点的改变及探讨其机制。【方法】本实验在HEK293/tau细胞上稳转野生型AKT后,在培养液中加入Aβ1-4220 uM,免疫印迹法检测tau磷酸化位点S396, S214, S404的改变,p-GSK3β-Ser9, m-PP2A-Leu309, PTP1B,表达的变化。【结果】(1)在IIEK293/tau细胞中瞬时高表达AKT24小时后,用Aβ处理HEK293/tau细胞,结果显示AKT明显逆转了Aβ诱导的tau多个位点(S396、S214、S404、S198、199、202)磷酸化,总tau含量没有明显改变。(2)转染AKT+Aβ处理组p-GSK3β-Ser9的水平和m-PP2A-Leu309水平比单独Aβ处理组显著升高,而dm-PP2A-Leu309水平明显降低(3)PTPIB表达在AKT+Aβ处理组比单独Aβ处理组明显升高。【结论】过表达AKT可以明显的逆转Aβ诱导的tau蛋白磷酸化,其机制是通过PTP1B增加PP2A活性和降低GSK3β活性水平。
|
全文目录
中文摘要 5-8 ABSTRACT 8-11 第一部分 上调PI3K/AKT通路的表达对Aβ诱导的细胞凋亡影响 11-36 前言 11-12 材料与方法 12-20 结果 20-26 讨论 26-29 小结 29 创新点 29-30 参考文献 30-36 第二部分 上调PI3K/AKT通路的表达对AB诱导的TAU磷酸化影响 36-51 前言 36 材料与方法 36-38 结果 38-45 讨论 45-47 小结 47 创新点 47-48 参考文献 48-51 综述 51-69 参考文献 61-69 攻读博士期间发表的文章和参加的会议 69 攻读博士期间获得奖励 69-70 致谢 70
|
相似论文
- 西施舌精子冷冻保存及其冷冻损伤机理研究,S968.3
- CADPE抗肿瘤作用及对胃癌细胞凋亡的影响,R735.2
- 蛋白磷酸酶2A Cα亚基敲除所致心脏能量代谢重塑的研究,Q78
- 醋酸铅对鲤鱼卵巢上皮细胞毒性的研究,X174
- 地克珠利对柔嫩艾美耳球虫第二代裂殖子甘油醛-3-磷酸脱氢酶的影响,S858.31
- PCV2对体外培养仔猪淋巴细胞钙信号的影响及其机理初探,S858.28
- β-catenin在猪卵巢组织中的表达以及对猪卵巢颗粒细胞凋亡及类固醇生成酶的影响,S828
- 伏马菌素B1和黄曲霉毒素B1联合诱导Vero细胞凋亡的研究,S856.9
- 黄曲霉毒素B1和脱氧雪腐镰刀菌烯醇诱导锦鲤原代肝细胞凋亡机制的初步研究,S856.9
- 沉默BMPR-IB基因对猪卵巢颗粒细胞凋亡及BMP通路相关基因表达的影响,S828
- 脱氧雪腐镰刀菌烯醇对鸡软骨细胞增殖、分化及凋亡的影响,S858.31
- Foxol对小鼠颗粒细胞凋亡的影响,S865.13
- 骨髓间充质干细胞预移植1周对大鼠心肌缺血再灌损伤的修复作用,R542.22
- 18氟—氟代脱氧葡萄糖诱导Eca-109食管癌细胞凋亡的初步研究,R735.1
- 脱氧雪腐镰刀菌烯醇诱导仓鼠肾细胞凋亡信号转导机制的研究,S856.9
- 脱氧雪腐镰刀菌烯醇诱导人结肠癌细胞凋亡线粒体信号转导机制的研究,R735.35
- 磷脂酶C和D在木聚糖酶诱导的水稻悬浮细胞抗病反应中的作用,S511
- 组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古抑菌素A对猪卵巢颗粒细胞增殖和凋亡的影响,S828
- 榄香烯对人肝癌HepG-2细胞拓扑异构酶Ⅰ和Ⅱ的影响,R735.7
- sCD40L对白血病HL-60细胞株生物学行为的影响及机制,R733.7
- 常规化疗联合节拍化疗对乳腺癌裸鼠移植瘤的实验研究,R737.9
中图分类: > 医药、卫生 > 神经病学与精神病学 > 精神病学 > 脑器质性精神障碍 > 老年及早老性精神障碍
© 2012 www.xueweilunwen.com
|