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大肠埃希菌和克雷伯菌AmpC酶检测、耐药特征及基因分型研究

作　者: 胡锡池
导　师: 赵英伟
学　校: 苏州大学
专　业: 病原生物学
关键词: AmpC酶 基因分型 ESBLs 耐药性
分类号: R450
类　型: 硕士论文
年　份: 2008年
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内容摘要


目的:通过对耐头孢西丁的123株大肠埃希菌和克雷伯菌中AmpC酶和ESBLs的表型及基因型的检测及其耐药性分析,揭示其主要耐药机制,从而指导临床合理用药。方法:运用三维试验、双纸片氯唑西林增效试验测定AmpC酶的表型,采用双纸片确诊试验测定ESBLs的表型,采用PCR法分析AmpC酶和ESBLs的基因型。最后运用最小抑菌浓度法测定这些菌株对13种抗菌药物的耐药性。采用统计学软件EpiInfor2000对实验数据进行分析。耐药率分析采用统计软件WHONE5.4。结果:123株受检菌中三维试验与纸片法分别检出产AmpC酶菌57株、69株,检出率分别为46.3%、56.1%,经检验无显著性差异(P>0.05)。双纸片确诊试验共检出产ESBLs菌87株,检出率为70.7%。PCR法结果显示:所有受检菌中携带DHA、ACT、CMY、FOX型AmpC酶基因及TEM、SHV、CTX、OXA型ESBLs基因的株数分别为51、63、10、2、75、48、12、12,分别占41.5%、51.2%、8.1%、1.6%、61%、39%、9.8%、9.8%。69株大肠埃希菌中携带DHA、ACT、CMY、FOX型AmpC酶基因及TEM、SHV、CTX、OXA型ESBLs基因的株数分别为12、39、6、1、45、6、12、6,分别占17.4%、56.5%、8.7%、1.4%、65.2%、8.7%、17.4%、8.7%,54株克雷伯菌中携带DHA、ACT、CMY、FOX型AmpC酶基因及TEM、SHV、CTX、OXA型ESBLs基因的株数分别为39、24、4、1、30、42、0、6,分别占72.2%、44.4%、7.4%、1.9%、55.6%、77.8%、0%、11.1%。药敏结果显示:单产AmpC酶菌对氨曲南、头孢曲松、头孢噻肟、哌拉西林的耐药率明显高于非产酶菌,而单产AmpC酶菌与非产酶菌对氨苄西林,氨苄西林/舒巴坦、环丙沙星、头孢唑林的耐药率均较高,对阿米卡星、头孢吡肟、亚胺培南,头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦的耐药率均较低。AmpC酶阳性菌对哌拉西林、头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦均存在不同程度的耐药(43.9%～70.2%),其耐药率明显高于AmpC酶阴性菌(25.8%～51.5%),两者相比有显著性差异(P<0.05)。而AmpC酶阳性菌对氨苄西林,氨苄西林/舒巴坦、环丙沙星、头孢唑林、头孢吡肟、头孢曲松、氨曲南、头孢噻肟的耐药率均较高(72.2%～100%),对阿米卡星、亚胺培南的耐药率均较低(0～49.1%),AmpC酶阴性菌相应的耐药率分别为(63.6%～97.0%)及(0～36.4%),两者相比无显著性差异(P>0.05)。AmpC酶阳性菌的4重耐药率(70.2%)与8重耐药率(61.4%)均明显高于AmpC酶阴性菌(45.3%)和(30.3%),两者相比有显著性差异(P<0.05)。结论:由于纸片法与三维试验测定AmpC酶的结果无显著性差异,但是三维试验操作复杂,不易掌握。因此建议临床可采用较简便的氯唑西林双纸片增效试验检测AmpC酶的表型。由PCR法结果可知:受检菌中AmpC酶(68.3%)和ESBLs(76.4%)的检出率较高,说明耐药酶在临床常见的致病菌中已普遍存在。受检菌AmpC酶基因型以DHA(41.5%)和ACT(51.2%)为主,ESBLs基因型以TEM(61%)与SHV(39%)为主。大肠埃希菌中AmpC酶基因型主要为ACT(56.5%),ESBLs基因型主要为TEM(65.2%),克雷伯菌中AmpC酶基因型主要为DHA(72.2%),ESBLs基因型主要为SHV(77.8%)。从本研究药敏结果来看,耐药酶如AmpC酶与ESBLs已成为细菌耐药的重要原因之一。建议临床可选用碳青霉烯类抗生素如亚胺培南治疗同时产AmpC酶与ESBLs细菌引起的感染,或采用四代头孢如头孢吡肟治疗单产AmpC酶菌造成的感染,也可根据药敏试验结果选用头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦或阿米卡星等抗生素治疗。由本研究亦可得知AmpC酶阳性菌比AmpC酶阴性菌更容易发展成为多重耐药菌。由此可见加强耐药菌的鉴定、药敏分析及耐药酶表型、基因型检测工作,从而合理选择抗菌药物对于延缓细菌耐药性的产生,提高抗感染治疗的效果,控制和监测院内感染的发生和转移有着十分积极的作用。

全文目录


中文摘要  4-6
Abstract  6-9
前言  9-11
材料与方法  11-15
结果  15-19
讨论  19-23
结论  23-24
参考文献  24-27
攻读学位期间发表论文  27-28
外文略缩词表  28-29
附录  29-30
综述  30-39
致谢  39

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中图分类: > 医药、卫生 > 临床医学 > 治疗学
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