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核转录因子NF-κB在兔慢性高眼压视网膜上的表达及其与细胞凋亡的关系

作　者: 张琪
导　师: 李平华
学　校: 重庆医科大学
专　业: 眼科
关键词: NF-κB 视网膜 兔 慢性高眼压 细胞凋亡
分类号: R774.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2007年
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内容摘要


目的探讨兔慢性高眼压视网膜上核转录因子NF-κB(Nuclea factor-κB)的表达及其与视网膜细胞凋亡的关系,为寻求临床上视功能保护的有效方法提供新的思路。方法健康新西兰大白兔51只,随机分为4组:正常组、慢性高眼压组(CH组)、慢性高眼压对照组(CH对照组)、慢性高眼压+PDTC干预组(CH+PDTC组)和慢性高眼压+PBS对照组(CH+PBS组)。除正常组(3只)外,另四组再按观察的时间点不同,随机分为1周、2周、4周和6周组,每时间点各3只。从CH组、CH+PDTC组和CH+PBS组兔前房各抽出0.2ml房水后注入2%甲基纤维素溶液0.2ml建立慢性高眼压模型,同样方法予CH对照组兔前房注入平衡盐溶液0.2 ml作为对照。CH +PDTC组和CH+PBS组同时分别行玻璃体腔注射NF-κB特异拮抗剂吡咯醛二硫氨基甲酸酯(PDTC)溶液和PBS溶液50ul,每周一次直至观察时间结束后摘除眼球,常规制备切片、HE染色、光学显微镜下观察视网膜形态学改变、免疫组织化学SP法观察NF-κB的表达情况及原位缺口末端标记法(TUNEL法)观察细胞凋亡情况。结果1.术后实验动物无严重眼部并发症出现。各组眼压在实验前无明显差异(P>0.05), CH组、CH+PDTC组和CH+PBS组术后眼压均显著升高(P<0.01)并维持在较高水平。2.光镜下见CH组视网膜细胞损伤随高眼压时间延长逐渐加重,由1周时的神经纤维层变薄、神经节细胞固缩减少逐渐向视网膜外层累及,出现内、外核层细胞逐渐固缩消失形成空泡,视网膜全层萎缩变薄;CH对照组与正常组类似,未见明显视网膜损伤表现;CH + PDTC组各时间段视网膜损伤较CH组相应时间段加重;CH+PBS组各时间段视网膜变化与CH组相似。3. NF-κB在正常组视网膜少量表达。随慢性高眼压时间延长,NF-κB在视网膜上的表达逐渐增强。1周时,CH组视网膜面密度值比正常组增高(P<0.05),神经节细胞胞核呈棕黄色着染;2周时阳性表达累及少量内核层细胞,面密度值与1周时比具有显著差异(P<0.05);4周NF-κB阳性表达较2周时明显加强(P<0.01);6周时,NF-κB几乎强烈表达于视网膜全层,面密度值继续显著增高(P<0.01)。CH+PDTC组视网膜NF-κB表达强度在各相应时间段较CH组减弱。1周时面密度值与CH组1周时比较有显著性差异(P<0.05);2-6周时,分别较CH组相应时间段明显减弱(P<0.01)。CH+PBS组各时间段NF-κB表达与CH组相似(P>0.05)。CH对照组NF-κB表达与正常组相似(P>0.05)。4.正常组视网膜几乎未见凋亡细胞。随着高眼压时间的延长,CH组视网膜凋亡细胞逐渐增多。1周时视网膜凋亡细胞主要出现于神经节细胞层,与正常组比较均有显著性差异(P<0.05);2周时凋亡细胞同时出现于神经节细胞层和部分内核层,与1周时相比有显著性差异(P<0.05);4周时凋亡细胞继续增加(P<0.05),神经节细胞层、内核层及部分外核层均可见及;到6周凋亡细胞几乎出现在视网膜全层,面密度值较4周时有显著差异(P<0.05)。CH+PDTC组视网膜细胞凋亡在1-4周时均较CH组相应各时间段增多(P<0.05),6周时与CH组6周相比有高度显著性差异(P<0.01),凋亡累及视网膜全层多数细胞。CH对照组与正常组相比无显著差异(P>0.05)。CH+PBS组视网膜细胞凋亡与CH组相似(P>0.05)。结论1.兔眼前房内注入2%甲基纤维素可建立良好的慢性高眼压动物模型。2.慢性高眼压所致视网膜损伤从内层逐渐向外层累及,由最初的神经纤维层变薄、神经节细胞减少逐渐加重最终导致视网膜全层萎缩变薄。3.慢性高眼压可致视网膜组织NF-κB活化,并随高眼压时间延长其表达逐渐加强。4.慢性高眼压促使视网膜组织细胞发生凋亡,并随高眼压时间延长凋亡细胞逐渐增多。5.玻璃体腔注射NF-κB特异拮抗剂PDTC后慢性高眼压视网膜上NF-κB表达明显减弱,但细胞凋亡明显增多。由此推测NF-κB可能具有抑制慢性高眼压视网膜细胞凋亡的作用。

全文目录


英汉缩略语名词对照  5-6
中文摘要  6-9
英文摘要  9-12
论文正文：核转录因子NF-κB 在兔慢性高眼压视网膜上的表达及其与细胞凋亡的关系  12-31
  前言  12
  1 材料和方法  12-17
  2 结果  17-24
  3 讨论  24-30
  小结  30-31
参考文献  31-35
附图  35-38
文献综述  38-48
致谢  48-49
在读研究生期间发表论文  49

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中图分类: > 医药、卫生 > 眼科学 > 视网膜及视神经疾病 > 视网膜疾病
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