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一氧化氮合酶在早期糖尿病小鼠视网膜神经细胞凋亡中的作用

作　者: 张祎草
导　师: 袁志兰
学　校: 南京医科大学
专　业: 眼科学
关键词: 糖尿病视网膜神经细胞 3－硝基酪氨酸一氧化氮合酶凋亡
分类号: R774.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
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内容摘要

目的：测定一氧化氮合酶（iNOS，nNOS）在早期糖尿病小鼠（2w，20w）视网膜组织中的表达，探讨一氧化氮合酶（iNOS，nNOS）在早期糖尿病小鼠视网膜神经细胞凋亡中的作用，方法：链脲佐菌素制备小鼠糖尿病模型，注射生理盐水作为对照，分别取正常对照（C组）及模型制备成功后2周(DM1组)及20周（DM2组）小鼠视网膜标本进行以下实验：（1）视网膜石蜡包埋，组织切片，HE染色显示视网膜神经上皮层各层组织；（2）应用原位凋亡标记技术TUNEL法检测视网膜神经细胞凋亡及存在的部位；（3）分别提取各组视网膜蛋白，用间接竞争性酶联免疫吸附法（Competitive Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay，ELISA）检测3－硝基酪氨酸（3－NT）在各组视网膜蛋白中的表达量；（4）用免疫印迹法（Western-blot）测定一氧化氮合酶（iNOS, nNOS）在各组视网膜蛋白中的表达。结果:（1）HE染色显示DM1组与C组无明显差别，DM2组视网膜厚度明显变薄，神经节细胞减少，排列紊乱；（2）TUNEL测得：C组几乎没有凋亡阳性细胞，DM1组可见少量凋亡细胞且位于神经节细胞层，DM2组凋亡细胞明显增多，神经节细胞层及内核层均见大量凋亡阳性细胞表达，外核层也可见凋亡细胞（3）ELISA结果显示：糖尿病大鼠视网膜内的3－硝基酪氨酸（3－NT）在DM1组的表达升高，在DM2组的表达量明显增高；（4）Western-blot测得：nNOS在DM1组表达较C组减少，在DM2组中则几乎消失，iNOS在DM1组和DM2组中表达较C组显著增多，但DM1和DM2两组间相比没有明显差异。结论:早期糖尿病视网膜在形态还未明显变化时，细胞内就已经开始出现凋亡迹象。3-NT的表达增加出现在糖尿病视网膜病变早期。一氧化氮合酶（iNOS,nNOS）活性的改变，尤其是nNOS的活性降低对早期糖尿病视网膜神经细胞的凋亡起到重要作用。

全文目录

中文摘要  4-6
英文摘要  6-8
前言  8-10
材料与方法  10-19
实验结果  19-20
分析与讨论  20-27
小结  27-28
附图  28-32
参考文献  32-36
文献综述  36-50
  综述参考文献  44-50
附录  50-51
攻读学位期间发表文章情况  51-52
致谢  52

一氧化氮合酶在早期糖尿病小鼠视网膜神经细胞凋亡中的作用

内容摘要

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