学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

绵羊卵母细胞体外成熟培养及冷冻保存研究

作　者: 周佰成
导　师: 赵有璋；刘丑生
学　校: 甘肃农业大学
专　业: 动物遗传育种与繁殖
关键词: 卵母细胞成熟培养冷冻保存绵羊
分类号: S826
类　型: 硕士论文
年　份: 2006年
下　载: 121次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载

内容摘要

卵母细胞冷冻研究在家畜遗传资源保存方面具有广泛和潜在的应用价值,通过对绵羊卵母细胞冷冻保存的研究,探讨和建立绵羊卵母细胞冷冻保存的最佳条件和可行技术路线。本研究以地方绵羊品种为研究对象,利用屠宰场废弃的绵羊卵巢获取卵母细胞,进行体外成熟培养和冷冻保存研究。体外成熟培养主要从采集方法、激素配比、性周期阶段、卵丘细胞、添加谷氨酰胺、表皮生长因子(EGF)等方面进行了探讨;冷冻保存主要从冷冻保护剂筛选、冷冻方法、卵母细胞不同发育阶段、CB处理以及解冻方法等方面进行了研究。试验研究结果指出:1.不同采卵方法在采卵效果上存在差异。综合法和切割法从每个卵巢上得到的可用卵母细胞数为1.71和1.58,显著高于抽吸法(0.92,P<0.05);成熟率切割法和综合法与抽吸法之间没有差异显著性(58.9%、62.3%、62.0%;P>0.05),但受精后卵裂率都显著高于抽吸法(28.6%、49.5%、45.8%;P<0.05)。2.四组不同激素配比成熟率分别为55.6%、67.2%、66.7%、73.8%,D组成熟率极显著高于A组( P<0.01),A组与B组之间差异显著(P<0.05);卵裂率各组为32.9%、42.4%、40.7%、45.2%,无差异显著性,但呈升高趋势,D组激素配比进行卵母细胞成熟培养效果最佳。3. A、B、C三级卵母细胞的成熟率分别为75.3%、64.4%、29.1%,A、B级卵母细胞成熟率显著高于C级(P<0.01);卵裂率分别为42.5%、35.8%、16.0%,A级与B级之间差异不显著,但均显著高于C级(P<0.05)。4.从卵泡期和黄体期卵巢采集到的卵母细胞的体外成熟率和卵裂率分别为67.1%、63.0%;42.9%、41.3%,没有差异显著性(P>0.05)。5.添加不同浓度的谷氨酰胺并没有显著增加绵羊卵母细胞的体外成熟率以及卵裂率,各组与对照组之间差异不显著(P>0.05)。6.添加100ng/mlEGF可显著提高卵母细胞成熟率(72.4% vs 56.8%,P<0.05)和卵裂率(46.0% vs 25.9%,P<0.05)。7. EG、DMSO和GL三种保护剂程序化冷冻卵母细胞后体外成熟率分别为21.9%、18.3%、8.97%,冷冻效果EG>DMSO>GL,EG与GL之间差异显著(P<0.05);不同冷冻剂组合玻璃化冷冻卵母细胞后成熟率分别为39.1%、26.0%、24.7%,(EG+DMSO)组>(EG+GL)组>(GL+DMSO)组,(EG+DMSO)组和(GL+DMSO)组之间差异显著(P<0.05);三种组合不同发育阶段卵裂率分别为20.6%、30.5%、16.0%、25.3%、9.09%、20.4%,与对照组相比较差异极显著(P<0.01),GV期卵母细胞冷冻后卵裂率均低于

全文目录

中文摘要  5-7
SUMMARY  7-11
第一部分文献综述  11-27
  1. 家畜遗传资源保存研究概况  11-12
  2. 哺乳动物卵母细胞体外成熟培养研究概况  12-16
  3. 哺乳动物卵母细胞冷冻保存研究进展  16-26
  4. 实验目的及意义  26-27
第二部分实验研究  27-52
  实验一绵羊卵母细胞的体外成熟培养  27-38
    1. 材料与方法  27-30
    2. 结果与分析  30-34
    3. 讨论  34-37
    4. 结论  37-38
  实验二绵羊卵母细胞冷冻保存的研究  38-52
    1. 材料与方法  39-42
    2. 结果与分析  42-47
    3. 讨论  47-51
    4. 结论  51-52
第三部分总结论  52-60
  参考文献  54-58
  实验附图  58-60
致谢  60-61
导师简介  61-63
个人简介  63-64

绵羊卵母细胞体外成熟培养及冷冻保存研究

内容摘要

全文目录

相似论文