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组蛋白H2A变异体在小鼠卵母细胞和早期胚胎发育过程中的变化

作　者: 吴宝江
导　师: 刘红林
学　校: 南京农业大学
专　业: 动物遗传育种与繁殖
关键词: 胚胎 卵母细胞 组蛋白变异体 减数分裂 有丝分裂
分类号: S865.13
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要


组蛋白变异体在不同的细胞周期建立特殊的核小体结构来替换核心组蛋白,形成明显不同的核小体结构和功能。在组蛋白变异体中H2A家族变异体多样性最高,它替换核心组蛋白H2A来起作用。这些组蛋白变异体主要包括H2AZ. macroH2A、H2A-Bbd和H2AX,它们与核心组蛋白H2A碳末端有不同的结构。这些组蛋白变异体掺入核小体中影响转录活性、DNA修复、减数分裂和细胞凋亡过程。本文用免疫荧光方法和分子水平研究小鼠卵母细胞、早期胚胎发育、卵母细胞减数分裂过程和体细胞有丝分裂过程中组蛋白变异体的分布变化情况,结果如下：(1)在小鼠1-,5-,10-和15-天生长卵母细胞染色体(质)中没有检测到H2A.Bbd、H2A.Z和MacroH2A.1荧光信号,除了在5-天的卵母细胞核周围检测到H2A.Bbd荧光信号外。在20-天的生长卵母细胞质和细胞核中H2A.Bbd、H2A.Z和MacroH2A.1的荧光信号没有明显的差异。在整个卵母细胞发育过程中细胞核染色体(质)上都能检测到H2A.X荧光信号。在卵母细胞发育过程中组蛋白H2A变异体虽然不能在细胞核染色体(质)上定位,除了H2A.X,但是在卵母细胞质中存在组蛋白H2A变异体mRNA.(2)小鼠卵母细胞减数分裂过程中,在GV期卵母细胞染色体(质)上H2A.Bbd和MacroH2A.1点状分布,而在GVBD和MⅡ期卵母细胞染色体(质)上没有检测到H2A.Bbd和MacroH2A.1荧光信号。在GV和GVBD期卵母细胞染色体(质)上检测到较弱的H2A.Z荧光信号；在MⅡ期卵母细胞染色体(质)上没有检测到H2A.Z荧光信号。整个卵母细胞减数分裂过程中在卵母细胞染色体(质)上都能检测到H2A.X和H2A.X-S,39荧光信号。虽然在GVBD和MⅡ期卵母细胞染色体(质)中没有检测到组蛋白H2A变异体荧光信号,但是在卵母细胞质中存在它们的mRNA.(3)在NIH3T3细胞有丝分裂过程中组蛋白H2A变异体的分布发生变化。在NIH3T3细胞分裂中期核染色体(质)上没有检测到H2A.Bbd荧光信号；NIH3T3细胞有丝分裂整个过程中都没有检测到MacroH2A.1荧光信号。实验结果表明,在NIH3T3细胞有丝分裂过程中有组蛋白H2A变异体的掺入。(4)在小鼠早期胚胎发育过程中,1-细胞胚胎和2-细胞胚胎核染色体(质)上检测到很弱的H2A.Bbd荧光信号,4-细胞胚胎到囊胚核染色体(质)上检测到很强的H2A.Bbd荧光信号。在1-细胞胚胎核染色体(质)上检测到很弱的MacroH2A.1荧光信号,2-细胞胚胎到桑椹胚核染色体(质)上检测到较强的MacroH2A.1荧光信号,在囊胚核染色体(质)上没有检测到MacroH2A.1荧光信号。在小鼠胚胎发育整个过程中胚细胞核染色体(质)上都能检测到很强的H2A.X荧光信号。在1-细胞胚胎、4-细胞胚胎和8-细胞胚胎核染色体(质)上检测到较强的H2A.X-S139荧光信号,而在2-细胞胚胎和桑椹胚核染色体(质)上H2A.X-S139荧光信号很弱,在囊胚核染色体(质)上没有检测到H2A.X-S139荧光信号。实验结果表明,小鼠卵母细胞发育、早期胚胎发育过程、卵母细胞减数分裂调节和体细胞有丝分裂过程可能与组蛋白H2A变异体分布有关。

全文目录


摘要  6-8ABSTRACT  8-11第一章 文献综述  11-29  1 组蛋白变异体的研究进展  11-23    1.1 组蛋白变异体H2A.Bbd  11-15    1.2 组蛋白变异体H2A.Z  15-19    1.3 组蛋白变异体MacroH2As  19-21    1.4 组蛋白变异体H2A.X  21-23  2 卵母细胞成熟及早期胚胎发育研究进展  23-27    2.1 卵母细胞成熟概述  23-26    2.2 早期胚胎发育研究概述  26-27  3 研究目的和意义  27-29第二章 实验研究  29-51  1 材料与方法  29-38    1.1 实验材料  29-31    1.2 实验方法  31-38  2 结果与分析  38-46    2.1 小鼠卵母细胞发育过程中组蛋白H2A变异体的掺入  38    2.2 小鼠卵母细胞减数分裂和体细胞有丝分裂过程中组蛋白H2A变异体的掺入  38-43    2.3 小鼠早期胚胎发育过程中组蛋白H2A变异体的掺入  43-45    2.4 小鼠卵母细胞发育过程和减数分裂过程中组蛋白H2A变异体mRNA表达情况  45-46  3 讨论  46-51全文结论  51-53论文创新点  53-55参考文献  55-67附录  67-71致谢  71

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中图分类: > 农业科学 > 畜牧、动物医学、狩猎、蚕、蜂 > 狩猎、野生动物驯养 > 各种野生动物驯养 > 实验用动物 > 小白鼠
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