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光皮桦天然群体遗传多样性研究

作　者: 谢一青
导　师: 黄儒珠；李志真
学　校: 福建师范大学
专　业: 生物化学与分子生物学
关键词: 光皮桦 天然群体 遗传多样性 表型标记 RAPD
分类号: S792.15
类　型: 硕士论文
年　份: 2006年
下　载: 88次
引　用: 2次
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内容摘要


运用表型标记和RAPD标记对福建境内9个光皮桦（Betula luminifera H. Winkl.）天然群体共135个个体样本进行遗传多样性和遗传结构分析，初步揭示了研究群体的遗传多样性现状及其分布格局，同时对两种标记方法进行了比较分析，旨在为光皮桦种质资源的保护、遗传改良以及永续利用提供依据。本研究的主要内容和结果如下： 1．对9个光皮桦天然群体135个单株的7个叶片性状、3个果序性状及5个种子性状等15项形态指标进行表型多样性分析，探讨群体间和群体内的表型变异程度与规律。结果表明，光皮桦种内表型性状在群体间和群体内存在丰富的遗传变异：光皮桦叶、果序和种子3类表型性状的变异系数分别为0.1779、0.1056和0.1930。其中果序性状稳定性高于叶性状和种子性状；群体间平均表型分化系数（Vst）为0.3503，群体间的变异（35.03％）小于群体内的变异（64.97％）；群体内表型变异系数由火到小的排序为：WP（0.1288）＞YA（0.1264）＞LC（0.1153）＞YX（0.1126）＞SW（0.1078）＞WY（0.0966）＞MX（0.0953）＞SX（0.0755）＞SL（0.0509）。光皮桦表型性状间及其与地理气候因子相关分析表明，光皮桦表型性状间存在显著或极显著相关关系，种内群体的叶、果序、种子性状变异也存在较明显的地理变异趋势。聚类分析将9个光皮桦天然群体划分为3类：SX、MX、LC、YA和WP五个群体聚为一类，SW、WY和YX三个群体聚为一类，SL群体独立为一类。 2．通过比较实验，建立了光皮桦基因组DNA的简便提取方法和叶片保存方法；通过参数优化，筛选出一套适合于光皮桦RAPD反应的扩增程序和扩增体系。 （1） 为从富含次生代谢物的光皮桦嫩叶中获得高质簧的DNA，实验设计了5种先提核再提DNA的CTAB法Ⅰ、CTAB法Ⅱ、CTAB法Ⅲ、CTAB法Ⅳ和改良的SDS法，应用于光皮桦基因组DNA的提取，并采用琼脂糖凝胶电泳、A260／A280比值测定、限制性内切酶消化和PCR扩增等对所提取的DNA进行比较分析。结果表明：用改良的CTAB法Ⅰ提取的DNA完全可满足RAPD分析的要求。 （2） 以光皮桦新鲜嫩叶为对照，比较了-20℃冷藏、硅胶干燥、改进的饱和NaCl-CTAB溶液保存和核分离缓冲液固定4种鲜叶保存方法对光皮桦基因组DNA提取效果的影响，并以提取的核酸得率、纯度、片段分布情况、是否含有PCR反应抑制剂等指标来评价其保存效果。结果表明：-20℃冷藏的样品未能提到DNA；鲜叶、改进的饱和NaCl-CTAB溶液保存和核分离缓冲液保存的叶片均能提到纯度较蚶的DNA，大小在48kb左右，得率约为400μg·g-1鲜叶，并获得条带清晰、多态性好的PCR扩增图谱；用硅胶干燥保存的叶片也能提到DNA，但得率低(51.2μg·g-1鲜叶)，且未获得条带完整、清晰的PCR扩增图谱。

全文目录


摘要  3-5
Abstract  5-11
第1章 绪论  11-25
  1.1 光皮桦树种特性和用途  11-14
    1.1.1 形态特征  11
    1.1.2 天然分布  11-13
    1.1.3 生物生态学特性  13-14
    1.1.4 木材特性和用途  14
  1.2 光皮桦的研究概况  14-18
    1.2.1 光皮桦生长特性研究  14-15
    1.2.2 光皮桦育苗造林技术研究  15-16
    1.2.3 群落生态学特性研究  16-17
    1.2.4 光皮桦的综合利用研究  17-18
  1.3 植物遗传多样性研究方法及其应用  18-21
    1.3.1 植物遗传多样性研究方法  18-19
    1.3.2 形态学标记及其在植物表型多样性研究上的应用  19-20
    1.3.3 RAPD标记及其在植物群体遗传多样性研究上的应用  20-21
  1.4 本研究的目的意义及主要内容  21-25
    1.4.1 研究目的意义  21-22
    1.4.2 研究主要内容  22-25
第2章 光皮桦天然群体表型多样性研究  25-35
  2.1 材料与方法  25-26
    2.1.1 群体选择与取样  25-26
    2.1.2 表型性状测定  26
    2.1.3 数据统计分析  26
  2.2 结果与分析  26-32
    2.2.1 光皮桦天然群体表型变异分析  26-30
    2.2.2 光皮桦天然群体间表型分化  30
    2.2.3 光皮桦表型性状间及其与地理生态因子间的相关分析  30-31
    2.2.4 光皮桦天然群体表型性状的聚类分析  31-32
  2.3 结论与讨论  32-35
第3章 光皮桦群体遗传多样性的RAPD分析  35-69
  3.1 光皮桦基因组 DNA提取方法比较  35-41
    3.1.1 材料与方法  35-37
    3.1.2 结果与分析  37-39
    3.1.3 结论与讨论  39-41
  3.2 用于DNA提取的光皮桦嫩叶保存方法探讨  41-47
    3.2.1 材料与方法  41-43
    3.2.2 结果与分析  43-44
    3.2.3 结论与讨论  44-47
  3.3 光皮桦 RAPD反应程序筛选及体系优化方案比较  47-57
    3.3.1 材料与方法  47-49
    3.3.2 结果与分析  49-55
    3.3.3 结论与讨论  55-57
  3.4 光皮桦天然群体遗传多样性的RAPD分析  57-69
    3.4.1 材料与方法  57-58
    3.4.2 结果与分析  58-65
    3.4.3 小结  65-66
    3.4.4 讨论  66-69
第4章 光皮桦天然群体遗传多样性表型标记与RAPD标记的比较  69-71
  4.1 比较研究的实验样本组成  69
  4.2 两种研究结果的遗传多样性分析  69-70
    4.2.1 基本的指标和结论比较  69
    4.2.2 两种方法群体间聚类结果的比较  69-70
    4.2.3 两种方法揭示光皮桦群体遗传分化结果比较  70
  4.3 光皮桦遗传多样性的量化评价比较  70-71
第5章 结论与建议  71-75
  5.1 结论  71-72
    5.1.1 光皮桦天然群体遗传多样性的表型标记  71
    5.1.2 光皮桦 DNA提取方法及其叶片保存方法的建立  71
    5.1.3 光皮桦 RAPD扩增体系及程序的优化  71-72
    5.1.4 光皮桦天然群体遗传多样性的RAPD标记  72
    5.1.5 光皮桦天然群体遗传多样性表型标记与 RAPD标记的比较  72
  5.2 讨论与建议  72-75
    5.2.1 福建境内光皮桦天然林资源分布特点  72-73
    5.2.2 福建境内光皮桦遗传资源现状分析  73
    5.2.3 光皮桦天然群体的遗传改良  73-74
    5.2.4 建境内光皮桦天然林的经营和保护对策  74-75
参考文献  75-82
攻读学位期间发表的论文  82-83
致谢  83-84
个人简历  84-85
福建师范大学学位论文使用授权声明  85

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中图分类: > 农业科学 > 林业 > 森林树种 > 阔叶乔木 > 桦木
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