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三氧化二砷逆转白血病耐药细胞凋亡抑制中耐药基因mdr1和凋亡抑制基因的表达

作　者: 张亚莉
导　师: 魏虎来
学　校: 兰州大学
专　业: 生物化学与分子生物学
关键词: 三氧化二砷 多药耐药 凋亡抑制 逆转 Mdr1 P-糖蛋白(P-gp) Bcl-2 Survivin Caspase-3 活性氧(ROS) 白血病
分类号: R733.7
类　型: 硕士论文
年　份: 2006年
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内容摘要


目的: 研究As2O3诱导白血病K562/ADM耐药细胞凋亡过程中多药耐药基因（mdr1）和凋亡调控基因的表达,探讨As2O3逆转耐药白血病细胞凋亡抑制的分子机制。 方法: 以高表达mdr1的白血病多药耐药细胞K562/ADM为靶细胞,应用噻唑蓝（MTT）比色法检测细胞增殖活性,细胞形态学、DNA片段化、细胞周期改变和AnnexinV/PI双标记检测K562/ADM细胞凋亡;流式细胞术（FCM）测定K562/ADM细胞Bcl-2蛋白和P-gp表达水平、Caspase-3活性和细胞内阿霉素（ADM）含量;ROS水平分别采用激光共聚焦显微镜和FCM检测;RT-PCR检测Bcl-2、Survivin、Caspase-3和mdr1 mRNA的表达。 结果: As2O3可抑制K562/ADM细胞增殖,呈浓度依赖性和时间依赖性(γ24h=0.921,γ48h=0.939,γ72h=0.865,P<0.01);As2O3诱导K562/ADM细胞出现典型凋亡形态改变,包括膜起泡,染色体凝集,及凋亡小体的形成;DNA电泳出现梯状条带（DNAladder）;AnnexinV/PI双染显示凋亡细胞明显增高,5μmol/L As2O3处理24h和48h细胞凋亡率分别为31.6%和55.8%;2-5μmol/L As2O3作用24h,细胞被阻滞在G2/M期,G1期细胞减少,72h时Sub-G1期细胞分别为25.6%和52.9%。K562/ADM细胞mdr1/P-gp高表达,As2O3作用24-48h后,K562/ADM细胞mdr1基因mRNA的表达明显下调,72h时P-gp阳性率变化不明显,96h时P-gp合成量降低,表达阳性率由97.2%

全文目录


中文摘要  4-6
英文摘要  6-10
前言  10-25
材料与方法  25-32
结果  32-55
讨论  55-61
结论  61-62
参考文献  62-69
攻读学位期间完成的科研成果目录  69-70
致谢  70-71
缩略词表  71-72

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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 造血器及淋巴系肿瘤 > 白血病
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