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丹参酮ⅡA微乳抗H22小鼠肝癌的研究

作 者: 马辉
导 师: 范青
学 校: 大连医科大学
专 业: 药理学
关键词: 丹参酮ⅡA微乳 H22 Bcl-2 Bax Caspase-3
分类号: R285.5
类 型: 硕士论文
年 份: 2011年
下 载: 4次
引 用: 0次
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内容摘要


目的:将抗肿瘤活性物质丹参酮ⅡA( TanⅡA )制成靶向微乳(microemulsion, ME)制剂,在体内外观察其对H22小鼠肝癌的抗肿瘤作用与机制。方法:体外实验中,实验组是TanⅡA ME组,给药剂量分别是0.5μM和2μM,对照组是0.5μM空ME组及2μM TanⅡA溶液组。给药48h后,倒置显微镜下观察细胞形态,流式细胞仪检测Bcl-2的表达情况,并采用RT-PCR方法检测TanⅡA ME对H22细胞Bcl-2、BaxCaspase-3 mRNA表达的影响。体内实验中,建立H22肝癌小鼠肿瘤模型,24小时后给药治疗,随机分为6组,实验组为TanⅡA ME组,给药剂量分别是2、4、8mg/kg,尾静脉连续给药7天;阴性对照组为4mg/kg空ME组及8mg/kg TanⅡA溶液组,尾静脉连续给药7天;阳性对照组为25mg/kg 5-FU,腹腔连续给药7天。给药7天后,观察小鼠体重、脾指数,计算抑瘤率,RT-PCR方法检测肿瘤组织中Bcl-2、Bax、Caspase-3 mRNA表达情况,并采用双重免疫荧光组织化学染色检测Bcl-2/Bax及Bcl-2/Caspase-3蛋白的表达情况。结果:一、TanⅡA溶液组细胞内Bcl-2表达率为27.17,空ME组表达率为28.68,0.5μM TanⅡAME组表达率为27.36,2μM TanⅡAME组表达率为2.65。二、TanⅡA溶液组中细胞内Bcl-2、Bax、Caspase-3 mRNA表达水平与β-actin的比值分别是0.10、1.55、0.75;空ME组中Bcl-2、Bax、Caspase-3 mRNA表达水平与β-actin的比值分别是0.09、0.85、0.40;0.5μM TanⅡAME组中Bcl-2、Bax、Caspase-3mRNA表达水平与β-actin的比值分别是0.16、0.70、0.85;2μM TanⅡA ME组中Bcl-2、Bax、Caspase-3mRNA表达水平与β-actin的比值分别是0.33、0.44、1.24。三、2、4、8mg/kg TanⅡAME对H22肝癌小鼠肿瘤的抑瘤率分别为1.32%、34.68%及47.17%,5-FU组小鼠的体重、脾指数显著降低。四、TanⅡA溶液组肿瘤组织Bcl-2、Bax、Caspase-3 mRNA表达水平与β-actin的比值分别是0.65、1.23、0.12;空ME组中Bcl-2、Bax、Caspase-3 mRNA表达水平与β-actin的比值分别是0.26、1.34、0.09;5-FU组中Bcl-2、Bax、Caspase-3 mRNA表达水平与β-actin的比值分别是1.43、0.68、0.30;2mg/kg TanⅡA ME组中Bcl-2、Bax、Caspase-3mRNA表达水平与β-actin的比值分别是0.87、0.97、0.09;4mg/kg TanⅡA ME组中Bcl-2、Bax、Caspase-3mRNA表达水平与β-actin的比值分别是1.06、0.94、0.18;8mg/kg TanⅡA ME组中Bcl-2、Bax、Caspase-3mRNA表达水平与β-actin的比值分别是1.36、0.59、0.31。五、双重免疫荧光组织化学结果显示,TanⅡA溶液组肿瘤组织中Bax、Caspase-3表达较弱,Bcl-2表达丰富;4、8mg/kg TanⅡA ME组Bax、Caspase-3表达显著增强,Bcl-2表达减弱。结论:一、与TanⅡA溶液相比较,TanⅡA ME具有明显的促进小鼠肝癌H22细胞凋亡作用,且呈浓度依赖性。二、TanⅡA ME对H22肝癌小鼠肿瘤有明显的抑制率,且呈浓度依赖性,副作用较5-FU明显减小。三、TanⅡA ME抗肿瘤作用机制可能是通过上调Bax、Caspase-3、下调Bcl-2基因的表达来实现的。

全文目录


摘要  6-8Abstract  8-11前言  11-12材料和方法  12-17结果  17-25讨论  25-27结论  27-28参考文献  28-31综述  31-38  参考文献  36-38附录  38-41  一、硕士在读期间发表论文  38-39  二、硕士在读期间参与课题  39-40  三、主要英文缩写  40-41致谢  41

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