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千层塔依存环境与石杉碱甲积累量季节变化关系的研究

作 者: 赵晓丹
导 师: 罗建平;周忠泽
学 校: 合肥工业大学
专 业: 农产品加工及贮藏工程
关键词: 千层塔 石杉碱甲 内生真菌 稀土
分类号: S567.239
类 型: 硕士论文
年 份: 2006年
下 载: 218次
引 用: 4次
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内容摘要


干层塔是我国的珍稀药用植物,资源面临枯竭,其活性成分石杉碱甲(Huperzine A)用于治疗重症肌无力和老年痴呆症,应用前景广阔,本文旨在考察九华山地区千层塔的依存及与对石杉碱甲在千层塔体内的积累水平变化间可存在的关系,为保护千层塔资源,合理的开发利用其次生代谢生物活性物质提供基础。 论文采用HPLC法测定九华山地区各月份的千层塔根、茎、叶中石杉碱甲的含量,以茎和叶中含量最大,根中最少。各月份含量中4月份为最高,茎中达到0.0444%,叶中为0.0559%。同时测定根际土壤养分,微生物数量,温度降雨量等气象因素以及内生真菌的数量、种类和季节分布特点。发现温度和降水量偏高对石杉碱甲的合成不利,在石杉碱甲含量最高的4月,有机质和全氮含量分别为分别为13.84g/kg和0.77g/kg。石杉碱甲含量偏高的季节,全氮含量维持在0.5~0.6g/kg,铵态氮平均为7~10mg/g。灰关联分析表明,有机质、全氮、全磷为关联度影响最大的3要素,降雨量和温度对石杉碱甲含量的影响最小。同时,硝态氮比铵态氮更有利于石杉碱甲的合成。 全年共从千层塔中分离出407株内生真菌,分别属于青霉属(Penicillium Lk.exFr.);木霉属(Trichoderma Pers.ex Fr.);轮枝孢属(Verticillium Nees);头孢霉属(Cephalosporium Corda);镰刀菌属(Fusarium Lk ex Fr.);曲霉属(Aspergillus Mich.exFr.);组丝核菌属(Phacodium Pers.ex Wallr);茎点霉属(Phoma Sacc.);瓶梗青霉属(Paecilomyces Bain.);间座壳属(Diaporthe Nits.);无孢类群(Mycelia Sterillia)等11个属。其中木霉属(Trichoderma Pers.ex Fr.);头孢霉属(Cephalosporium Corda);组丝核菌属(Phacodium Pers.ex Wallr)为优势菌种。 考察了稀土元素La3+对水培千层塔根系活力以及石杉碱甲合成的影响。La3+在10μmol/L时,对根系活力有促进作用,在50μmol/L时,对石杉碱甲的合成促进作用明显,叶和茎中石杉碱甲含量分别为对照组的2和2.2倍。

全文目录


第一章 前言  14-21
  1.1 千层塔资源简介  14-16
    1.1.1 千层塔的分布及形态特征  14-15
    1.1.2 干层塔中已分离的化学成分  15
    1.1.3 石杉碱甲  15-16
      1.1.3.1 石杉碱甲的结构  15-16
      1.1.3.2 石杉碱甲的药理作用  16
  1.2 植物内生真菌的研究  16-18
    1.2.1 植物内生真菌的研究  16-17
    1.2.2 内生真菌的生态学作用  17-18
      1.2.2.1 内生真菌的专一性  17
      1.2.2.2 内生真菌对宿主植物的作用  17-18
  1.3 稀土元素对植物次生代谢产物合成的影响  18
  1.4 本论文研究的目的、意义及内容  18-21
第二章 千层塔的依存环境与石杉碱甲含量季节变化的关系考察  21-48
  2.1 材料  21-22
    2.1.1 供试样品  21
    2.1.2 培养基  21
    2.1.3 主要试剂  21
    2.1.4 主要仪器设备  21-22
  2.2 测定方法  22-24
    2.2.1 千层塔中石杉碱甲含量的测定  22
      2.2.1.1 石杉碱甲HPLC条件的建立  22
      2.2.1.2 石杉碱甲标照品溶液的制备  22
      2.2.1.3 样品溶液的制备  22
      2.2.1.4 样品溶液中石杉碱甲的测定  22
    2.2.2 根际土壤微生物的分离  22-23
      2.2.2.1 土壤悬液的制备  22-23
      2.2.2.2 平板涂布  23
      2.2.2.3 平板培养  23
      2.2.2.4 菌落记数  23
    2.2.3 土壤养分测定  23
    2.2.4 灰关联分析计算方法  23-24
      2.2.4.1 灰关联分析程序  24
  2.3 实验结果  24-45
    2.3.1 石杉碱甲HPLC标准曲线的建立  24-25
    2.3.2 千层塔石杉碱甲含量的季节变化  25-28
      2.3.2.1 石杉碱甲HPLC图谱  25-27
      2.3.2.2 千层塔各部位石杉碱甲含量的季节变化  27-28
    2.3.3 生长环境的气象条件测定  28
    2.3.4 根际土壤养分与微生物数量的测定  28-29
    2.3.5 气象、土壤养分及土壤微生物数量与千层塔石杉碱甲含量之间的变化关系  29-43
      2.3.5.1 气象条件与石杉碱甲含量  30-32
      2.3.5.2 土壤养分与石杉碱甲含量  32-39
      2.3.5.3 土壤微生物数量与石杉碱甲含量  39-43
    2.3.6 气象、土壤养分与千层塔石杉碱甲含量的灰关联分析  43-45
  2.4 讨论  45-46
    2.4.1 千层塔石杉碱甲的提取及HPLC检测  45
    2.4.2 气象、土壤养分及土壤微生物数量与千层塔石杉碱甲含量之间的变化关系  45-46
  2.5 结论  46-48
第三章 千层塔内生真菌的分离培养鉴定  48-66
  3.1 材料  48-49
    3.1.1 供试样品  48
    3.1.2 培养基  48
    3.1.3 主要试剂  48
    3.1.4 主要仪器设备  48-49
  3.2 方法  49-50
    3.2.1 内生真菌的分离  49
    3.2.2 内生真菌的纯化  49
    3.2.3 内生真菌的鉴定  49-50
      3.2.3.1 直接制片观察法  49
      3.2.3.2 载玻片培养观察法  49-50
  3.3 实验结果  50-64
    3.3.1 内生真菌种类鉴定  50-62
    3.3.2 内生真菌在千层塔植株内的分布  62-64
  3.4 讨论  64-65
  3.5 结论  65-66
第四章 稀土La~(3+)对水培千层塔根系活力和石杉碱甲合成的影响  66-72
  4.1 材料  66-67
    4.1.1 供试样品  66
    4.1.2 试剂  66
    4.1.3 仪器设备  66-67
  4.2 实验方法  67-68
    4.2.1 TTC法测定La~(3+)对千层塔根系活力的影响  67-68
      4.2.1.1 水培条件的建立  67
      4.2.1.2 根系活力指标  67
      4.2.1.3 测定步骤  67-68
      4.2.1.4 结果计算  68
    4.2.2 La~(3+)对水培千层塔石杉碱甲含量的影响  68
      4.2.2.1 水培条件的建立  68
      4.2.2.2 石杉碱甲含量测定  68
  4.3 实验结果  68-71
    4.3.1 TTC标准曲线的建立  68
    4.3.2 La~(3+)对水培千层塔根系活力的影响  68-70
    4.3.3 稀土对水培千层塔石杉碱甲含量的影响  70-71
  4.4 讨论  71
  4.5 结论  71-72
第五章 结论与展望  72-74
参考文献  74-77

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中图分类: > 农业科学 > 农作物 > 经济作物 > 药用作物 > 草本 > 多年生 > 其他
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