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hTERT反义寡核苷酸对乳腺癌细胞增殖的影响及其作用机制

作　者: 彭帮国
导　师: 吴成秋
学　校: 南华大学
专　业: 卫生毒理学
关键词: hTERT 反义寡核苷酸 端粒酶 乳腺癌细胞 细胞增殖
分类号: R737.9
类　型: 硕士论文
年　份: 2006年
下　载: 35次
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内容摘要


目的： hTERT反义寡核苷酸通过脂质体转染入乳腺癌细胞，观察其对MCF-7细胞端粒酶活性、细胞周期、细胞凋亡和癌基因bcl-2的影响，探讨hTERT反义寡核苷酸对MCF-7细胞增值的影响及其影响机制，为乳腺癌的基因治疗提供理论依据。 方法： 本实验以体外培养的人乳腺癌细胞株MCF-7为研究对象，观察hTERT反义寡核苷酸对乳腺癌细胞增殖的影响；利用脂质体介导hTERT反义寡核苷酸转染MCF-7细胞，采用多聚酶链式反应-酶联免疫测定法(PCR-ELISA)检测乳腺癌细胞端粒酶活性；通过MTT法检测细胞增殖活性；以流式细胞仪检测细胞周期及细胞凋亡；用免疫细胞化学方法检测Bcl-2蛋白的表达，用平板集落形成实验检测细胞集落的形成。 结果： 1．MTT法检测结果显示：ASDON不同浓度组间细胞增殖抑制率差异有显著性(P＜0.01)，且随浓度的增加，其抑制作用增强；并且ASDON作用不同时间对细胞增殖抑制率不同，72h组的抑制率高于48h和24h组的抑制率(P＜0.01)，而对照组、正义寡核苷酸组、脂质体组对细胞的增殖无抑制作用。 2．平板集落形成实验结果显示，反义寡核苷酸可使细胞集落形成率降低，抑制率为66.6％，高于正义寡核苷酸、脂质体组、对照组的抑制率(P＜0.01)，表明ASODN对MCF-7细胞集落形成能力有明显的抑制作用。

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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 泌尿生殖器肿瘤 > 乳腺肿瘤
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