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异常黑胆质成熟剂总酚与化疗药联合对Hela细胞的影响
作 者: 王国宁
导 师: 古扎丽努尔·阿不力孜
学 校: 新疆医科大学
专 业: 肿瘤学
关键词: 异常黑胆质成熟剂总酚 化疗 Hela细胞 端粒酶 细胞凋亡
分类号: R737.33
类 型: 硕士论文
年 份: 2011年
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内容摘要
目的:探讨异常黑胆质成熟剂总酚与顺铂、多西他赛联合应用对体外培养的人宫颈癌细胞Hela生长的影响,以期寻找药物治疗宫颈癌更完善的途径。方法:体外培养Hela细胞,分别用顺铂、多西他赛、异常黑胆质成熟剂总酚、顺铂+异常黑胆质成熟剂总酚、多西他赛+异常黑胆质成熟剂总酚处理Hela细胞后,倒置显微镜下观察各组细胞生长情况,MTT法检测细胞增殖抑制情况,流式细胞术检测细胞早期凋亡率、Bcl-2、端粒酶表达,实时荧光定量PCR法检测FHIT和Survivin的表达。结果:1.异常黑胆质成熟剂总酚及顺铂、多西他赛对Hela细胞有明显的抑制作用,联合作用对Hela细胞的抑制作用更明显,差异均有统计学意义(P<0.05)。小剂量的异常黑胆质成熟剂总酚(50μg/ml)作用24h对Hela细胞无抑制作用,但能提高顺铂、多西他赛埘Hela细胞的抑制率。显微镜下观察实验组细胞形态变化明显。2.异常黑胆质成熟剂总酚、顺铂和多西他赛对Hela细胞作用48h后,都有很好地促进凋亡的作用(P<0.001),早期凋亡率分别为(12.8±0.70)%、(18.87±3.79)%、(15.87±3.81)%;异常黑胆质成熟剂总酚与顺铂、多西他赛联合有交互作用(P<0.01),凋亡率分别为(31.87±3.82)%、(36.47±3.98)%,有明显地促进凋亡的作用。3.异常黑胆质成熟剂总酚、顺铂、多西他赛对Hela细胞作用48h的Bcl-2蛋白表达率明显降低(P<0.001),分别为(63.63±3.84)%、(49.2±4.08)%、(51.40±6.35)%;异常黑胆质成熟剂总酚与顺铂联合有很好的交互作用(P=0.019),Bcl-2蛋白表达率为(14.57±2.32)%,与多西他赛联合无交互作用,但也能明显降低Bcl-2表达,单因素方差分析组间比较有差异(P<0.001),表达率为(18.93±4.83)%。4.异常黑胆质成熟剂总酚、顺铂、多西他赛埘Hela细胞作用48h的端粒酶表达率明显降低(P<0.001),分别为(51.37±4.68)%、(40.83±5.30)%、(36.83±5.26)%;异常黑胆质成熟剂总酚与顺铂、多西他赛联合均无交互作用,但也能明显降低端粒酶表达,单因索方差分析组间比较有差异(P<0.001),端粒酶表达率分别为(14.9±2.50)%、(18.93±3.97)%。5.异常黑胆质成熟剂总酚、顺铂、多西他赛对Hela细胞作用48h的FHIT定量表达明显升高;异常黑胆质成熟剂总酚与顺铂、多西他赛联合有交互作用(P<0.001),有明显地升高FHIT表达的作用。6.异常黑胆质成熟剂总酚、顺铂、多西他赛对Hela细胞作用48h的Survivin表达明显降低(P<0.001);异常黑胆质成熟剂总酚与顺铂、多西他赛联合有交互作用(P<0.01),有明显地降低Survivin表达的作用。结论:异常黑胆质成熟剂总酚对Hela细胞有明显的抑制作用,并且能提高Hela对顺铂、多西他赛的敏感性。顺铂、多西他赛浓度不变时,异常黑胆质成熟剂总酚对Hela细胞的抑制率呈浓度及时间依赖性。异常黑胆质成熟剂总酚与顺铂、多西他赛联合能促进Hela细胞凋亡,其作用机制可能与降低Bcl-2蛋白、端粒酶活性和Survivin表达,升高FHIT表达有关。
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全文目录
摘要 7-9 Abstract 9-11 前言 11-14 材料与方法 14-23 1 材料 14-16 1.1 细胞株和来源 14 1.2 主要试剂 14-15 1.3 主要材料和仪器 15-16 1.4 主要液体的配制 16 2 方法 16-21 2.1 细胞培养 16-17 2.2 MTT法检测细胞增殖抑制率 17-19 2.3 倒置显微镜下观察细胞形态 19 2.4 流式细胞术检测细胞早期凋亡率 19 2.5 流式细胞术检测Bd-2蛋白、端粒酶表达 19 2.6 实时荧光定量PCR(Real TimePCR,RT-PCR)检测FHIT和 Survivin的表达 19-21 3 统计方法 21-22 4 技术路线图 22-23 结果 23-30 讨论 30-37 小结 37-38 致谢 38-39 参考文献 39-43 附录 43-47 综述 47-56 参考文献 53-56 攻读硕士学位期间发表的学术论文 56-57 导师评阅表 57
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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 泌尿生殖器肿瘤 > 女性生殖器肿瘤 > 子宫肿瘤
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