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异常黑胆质成熟剂总酚与化疗药联合对Hela细胞的影响

作 者: 王国宁
导 师: 古扎丽努尔·阿不力孜
学 校: 新疆医科大学
专 业: 肿瘤学
关键词: 异常黑胆质成熟剂总酚 化疗 Hela细胞 端粒酶 细胞凋亡
分类号: R737.33
类 型: 硕士论文
年 份: 2011年
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内容摘要


目的:探讨异常黑胆质成熟剂总酚与顺铂、多西他赛联合应用对体外培养的人宫颈癌细胞Hela生长的影响,以期寻找药物治疗宫颈癌更完善的途径。方法:体外培养Hela细胞,分别用顺铂、多西他赛、异常黑胆质成熟剂总酚、顺铂+异常黑胆质成熟剂总酚、多西他赛+异常黑胆质成熟剂总酚处理Hela细胞后,倒置显微镜下观察各组细胞生长情况,MTT法检测细胞增殖抑制情况,流式细胞术检测细胞早期凋亡率、Bcl-2、端粒酶表达,实时荧光定量PCR法检测FHIT和Survivin的表达。结果:1.异常黑胆质成熟剂总酚及顺铂、多西他赛对Hela细胞有明显的抑制作用,联合作用对Hela细胞的抑制作用更明显,差异均有统计学意义(P<0.05)。小剂量的异常黑胆质成熟剂总酚(50μg/ml)作用24h对Hela细胞无抑制作用,但能提高顺铂、多西他赛埘Hela细胞的抑制率。显微镜下观察实验组细胞形态变化明显。2.异常黑胆质成熟剂总酚、顺铂和多西他赛对Hela细胞作用48h后,都有很好地促进凋亡的作用(P<0.001),早期凋亡率分别为(12.8±0.70)%、(18.87±3.79)%、(15.87±3.81)%;异常黑胆质成熟剂总酚与顺铂、多西他赛联合有交互作用(P<0.01),凋亡率分别为(31.87±3.82)%、(36.47±3.98)%,有明显地促进凋亡的作用。3.异常黑胆质成熟剂总酚、顺铂、多西他赛对Hela细胞作用48h的Bcl-2蛋白表达率明显降低(P<0.001),分别为(63.63±3.84)%、(49.2±4.08)%、(51.40±6.35)%;异常黑胆质成熟剂总酚与顺铂联合有很好的交互作用(P=0.019),Bcl-2蛋白表达率为(14.57±2.32)%,与多西他赛联合无交互作用,但也能明显降低Bcl-2表达,单因素方差分析组间比较有差异(P<0.001),表达率为(18.93±4.83)%。4.异常黑胆质成熟剂总酚、顺铂、多西他赛埘Hela细胞作用48h的端粒酶表达率明显降低(P<0.001),分别为(51.37±4.68)%、(40.83±5.30)%、(36.83±5.26)%;异常黑胆质成熟剂总酚与顺铂、多西他赛联合均无交互作用,但也能明显降低端粒酶表达,单因索方差分析组间比较有差异(P<0.001),端粒酶表达率分别为(14.9±2.50)%、(18.93±3.97)%。5.异常黑胆质成熟剂总酚、顺铂、多西他赛对Hela细胞作用48h的FHIT定量表达明显升高;异常黑胆质成熟剂总酚与顺铂、多西他赛联合有交互作用(P<0.001),有明显地升高FHIT表达的作用。6.异常黑胆质成熟剂总酚、顺铂、多西他赛对Hela细胞作用48h的Survivin表达明显降低(P<0.001);异常黑胆质成熟剂总酚与顺铂、多西他赛联合有交互作用(P<0.01),有明显地降低Survivin表达的作用。结论:异常黑胆质成熟剂总酚对Hela细胞有明显的抑制作用,并且能提高Hela对顺铂、多西他赛的敏感性。顺铂、多西他赛浓度不变时,异常黑胆质成熟剂总酚对Hela细胞的抑制率呈浓度及时间依赖性。异常黑胆质成熟剂总酚与顺铂、多西他赛联合能促进Hela细胞凋亡,其作用机制可能与降低Bcl-2蛋白、端粒酶活性和Survivin表达,升高FHIT表达有关。

全文目录


摘要  7-9
Abstract  9-11
前言  11-14
材料与方法  14-23
  1 材料  14-16
    1.1 细胞株和来源  14
    1.2 主要试剂  14-15
    1.3 主要材料和仪器  15-16
    1.4 主要液体的配制  16
  2 方法  16-21
    2.1 细胞培养  16-17
    2.2 MTT法检测细胞增殖抑制率  17-19
    2.3 倒置显微镜下观察细胞形态  19
    2.4 流式细胞术检测细胞早期凋亡率  19
    2.5 流式细胞术检测Bd-2蛋白、端粒酶表达  19
    2.6 实时荧光定量PCR(Real TimePCR,RT-PCR)检测FHIT和 Survivin的表达  19-21
  3 统计方法  21-22
  4 技术路线图  22-23
结果  23-30
讨论  30-37
小结  37-38
致谢  38-39
参考文献  39-43
附录  43-47
综述  47-56
  参考文献  53-56
攻读硕士学位期间发表的学术论文  56-57
导师评阅表  57

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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 泌尿生殖器肿瘤 > 女性生殖器肿瘤 > 子宫肿瘤
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