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EGFR-JNK信号通路在系膜细胞增殖中的作用及肝素对其影响

作 者: 黄霖
导 师: 曾红兵
学 校: 华中科技大学
专 业: 肾脏内科学
关键词: 肝素 大鼠系膜细胞 细胞增殖 表皮生长因子受体 c-Jun N端激酶
分类号: R965
类 型: 硕士论文
年 份: 2011年
下 载: 3次
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内容摘要


目的:观察表皮生长因子受体(EGFR)- c-Jun N端激酶(JNK)信号途径在大鼠肾小球系膜细胞(GMCs)的增殖中的作用及肝素对其的影响。方法:采用体外大鼠肾小球系膜细胞培养技术,利用LPS诱导GMCs增殖,实验分为①对照组,②LPS诱导组③LPS+肝素组,④LPS+EGFR抑制剂AG1478组,观察各组GMCs的增殖状况及GMCs中EGFR、磷酸化的JNK(P-JNK)的表达。用甲基噻唑基四唑(MTT)比色法测定各组在不同药物浓度刺激24h时的细胞增殖情况;免疫印迹法(WB)定量和细胞免疫组化法半定量检测各组内不同刺激时间及不同刺激药物浓度时GMCs中EGFR和P-JNK的表达。结果(:1)、10mg/L的LPS能促进GMCs的增殖,100ug/ml, 250ug/ml,500ug/ml的肝素及20umol/L的AG1478能抑制LPS诱导的GMCS增殖,各组间的差异具有统计学意义(p<0.01)。(2)、GMCs能表达一定量的EGFR和P-JNK,肝素能抑制LPS诱导的EGFR,P-JNK表达的上调。(p<0.05)(3)、EGFR拮抗剂AG1478对LPS诱导的P-JNK的表达增多有显著的抑制趋势。结论:中等浓度的肝素及20umol/L的AG1478能抑制LPS诱导的GMCs的增殖,肝素对GMCs的增殖的抑制作用可能通过抑制EGFR-JNK信号通路起作用。

全文目录


中英文缩略词表  5-7
前言  7-8
摘要  8-9
Abstract  9-10
Introduction  10
材料与方法  10-16
  1 主要实验仪器  10
  2 细胞来源  10
  3 GMCs 培养  10-11
  4 MTT 法测 LPS 诱导的 GMCs 的增殖作用及肝素对其的抑制作用  11-12
  5 细胞组化法测定 GMCs 中 EGFR 及 P-JNK 表达  12-13
  6 免疫印迹法(WB) 测 GMCs 中 EGFR 及 P-JNK 的表达量  13-15
  7 统计分析  15-16
结果  16-21
  1 肝素及 AG1478 对 LPS 诱导的 GMCs 增殖的影响  16-17
  2 LPS 对 GMCs 中 EGFR 表达的影响及肝素的作用  17-18
  3 LPS 对 GMCs 中 P-JNK 的作用及肝素和 AG1478 对其的影响  18-21
讨论  21-27
参考文献  27-30
总结  30-31
综述  31-46
  参考文献  41-46
致谢  46

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中图分类: > 医药、卫生 > 药学 > 药理学 > 实验药理学
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