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两株海洋来源微生物次级代谢产物抗肿瘤活性成分研究
作 者: 李冬
导 师: 崔承彬;顾谦群
学 校: 中国海洋大学
专 业: 生药学
关键词: 海洋放线菌 海洋真菌 次级代谢产物 抗肿瘤活性
分类号: R73-3
类 型: 硕士论文
年 份: 2005年
下 载: 256次
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内容摘要
为有效地从海洋微生物中寻找抗肿瘤活性成分,本文采用小鼠乳腺癌细胞tsFT210,以细胞周期抑制、细胞凋亡诱导及细胞坏死为活性指标,从采自青岛近海海域的24个海泥样品中共筛选出110株放线菌,其中具有抗肿瘤活性的菌株10株,活性率为9.1%。并采用活性追踪分离方法对一株放线菌和一株真菌的代谢产物活性成分进行了初步研究 采用减压硅胶柱层析、凝胶柱层析(Sephadex LH-20)、反相硅胶柱层析和反相制备高效液相(HPLC)等分离手段,从具有细胞坏死活性的放线菌H2003分离得到22个单体化合物。利用理化性质和光谱学方法(UV、IR、MS、1D-NMR和2D-NMR),21个单体化合物分别鉴定为:邻苯二甲酸二丁酯(1);丁二烯二甲酯(2);3,4-二羟基-2-甲基-吡啶(3);对羟基苯甲酸(5);3,4-二羟基苯甲酸甲酯(6);环-(脯-异亮)(7);环-(脯-亮)(8);环-(脯-缬)(9);4,4’硝基—联苄基(10);环-(脯-苯丙)(11);环-(脯-丙)(12);环-(丙-缬)(13);N-[2-(4-羟基苯基)乙基]乙酰胺(14);环-(羟脯-亮)(15);环-(丙-异亮)(16);环-(丙-亮)(17);环-(缬-亮)(18);环-(脯-酪)(19);环-(甘-苯丙)(20);环-(丙-苯丙)(21);环-(甘-脯)(22)。化合物4初步鉴定为环-(脯-脯-亮-亮),其结构有待进一步确定。从具有周期抑制活性的真菌Aspergillus terreus Thom中分离得到13个单体化合物分别鉴定为:麦角甾醇(23);十八碳二烯酸单甘油酯(24);大黄酚(25);大黄素(26);芦荟大黄素(27);苯甲酸(28);邻苯二甲酸二异丁酯(29);3,4-二甲氧基苯酚(30);二硫甲基胶霉毒素(31);3-甲氧基苯酚(32);对羟基苯乙腈(33);反-对羟基苯乙烯酰氨(34);顺-对羟基苯乙烯酰氨(35)。 生物活性测试结果表明,化合物1、23、24、26、29、30、32对tsFT210小鼠乳腺癌细胞具有显著的坏死性细胞毒活性,化合物14、34具有显著的诱导细胞调亡活性,化合物3、25具有G2/M周期抑制活性,化合物4、5、11具有G0/G1周期抑制活性。
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全文目录
缩略语说明 4-5 摘要 5-11 前言 11-13 1 研究部分 13-68 1.1 生物活性测试 13-15 1.2 菌株筛选及发酵 15-19 1.2.1 实验材料 15-16 1.2.2 海洋微生物样品的处理 16 1.2.3 海洋放线菌株发酵液提取 16 1.2.4 活性初筛 16-17 1.2.5 活性复筛 17 1.2.6 发酵物稳定性测试 17 1.2.7 萃取预实验 17 1.2.8 菌株H2003发酵条件考察 17-18 1.2.9 发酵 18-19 1.3 代谢产物的提取分离 19-22 1.3.1 菌株H2003代谢产物的提取分离 19-22 1.3.2 菌株Aspergillus terreus Thom代谢产物的提取分离 22 1.4 22-58 1.4.1 菌株H2003化合物的结构研究 25-44 1.4.2 菌株Aspergillus terreus Thom化合物的结构研究 44-58 1.5 单体化合物的抗肿瘤活性研究 58-67 1.5.1 菌株H2003单体化合物的抗肿瘤活性研究 58-63 1.5.2 菌株Aspergillus terreus Thom单体化合物的抗肿瘤活性研究 63-67 1.6 小节与讨论 67-68 2 实验部分 68-77 2.1 生物活性的测试 68-70 2.2 化合物的分离和鉴定 70-77 3 结语 77-79 4 综述 79-85 5 参考文献 85-90 6 致谢 90
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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 肿瘤学实验研究
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