学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

诱导表达细胞CaM/CaMBP对烟草超氧化物歧化酶及其同工酶的调控效应

作　者: 樊玉颖
导　师: 龚明
学　校: 云南师范大学
专　业: 环境科学
关键词: 转基因烟草钙调素超氧化物歧化酶同工酶叶圆片
分类号: S572
类　型: 硕士论文
年　份: 2005年
下　载: 78次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载

内容摘要

本文以诱导性表达细胞质CaM/CaMBP两个转基因烟草株系为实验材料,研究了诱导上调和下调CaM活性对SOD及其三类同工酶活性的影响。实验内容共分两部分: 第一部分测定了10个诱导表达细胞核CaM的转基因烟草株系的活性,从中筛选出3个能良好诱导表达的株系(5C、5L、13):进一步深入研究了烟草幼苗经Tc诱导48小时,以及烟草离体叶圆片经Tc诱导24小时过程中CaM活性的动态变化。第二部分利用已经检测出的诱导表达细胞质CaM的转基因烟草H1—2C,以及诱导表达细胞质CaMBP的转基因烟草H3-19,进行SOD及其同工酶的研究。结果表明:经Tc诱导的转基因烟草H1—2C,SOD总活性、以及三种同工酶的活性明显高于对照HO2020及未经Tc诱导的;相反,经Tc诱导的转基因烟草H3-19,SOD总活性、以及三类同工酶的活性明显低于对照HO2020及未经Tc诱导的。最后通过聚丙烯酰胺凝胶电泳、活性定位染色鉴别了转基因烟草叶片中SOD同工酶类型。

全文目录

缩写表  5-7
中文摘要  7-8
英文摘要  8-9
Ⅰ 引言  9-12
Ⅱ 材料与方法  12-16
  一、植物材料  12
  二、处理方法  12
  三、测定方法  12-15
    1、CaM的提取  12-13
    2、CaM的测定  13
    3、无机磷的测定  13
    4、蛋白质的测定  13
    5、超氧化物歧化酶的提取  13-14
    6、超氧化物歧化酶总活性测定  14
    7、超氧化物歧化酶三类同工酶测定  14
    8、SOD的聚丙烯酰胺凝胶电泳及活性染色  14-15
    9、鉴别SOD同工酶类型的染色定位法  15
  四、试剂与仪器  15-16
Ⅲ 实验结果  16-38
  一、诱导表达细胞核CaM转基因烟草的筛选  16-25
    1、Tc诱导24小时或48小时转基因烟草的检测结果  16-18
    2、Tc诱导过程中转基因烟草幼苗CaM的动态变化  18-21
    3、Tc诱导过程中转基因烟草离体叶圆片CaM的动态变化  21-25
  二、诱导表达细胞质CaM／CaMBP对烟草SOD及其同工酶活性的影响  25-38
    1、Tc诱导过程中转基因烟草离体叶圆片总SOD的活性变化  25-26
    2、Tc诱导过程中转基因烟草离体叶圆片SOD同工酶的活性变化  26-34
      2．1 SOD同工酶活性测定抑制剂终浓度的摸索  26-29
      2．2 Tc诱导过程中转基因烟草离体叶圆片Cu、Zn-SOD的活性变化  29-31
      2．3 Tc诱导24小时转基因烟草离体叶圆片Mn-SOD的活性变化  31-32
      2．4 Tc诱导24小时转基因烟草叶圆片Fe-SOD的活性变化  32-34
    3、转基因烟草离体叶圆片SOD电泳图谱及其同工酶类型  34-38
Ⅳ 讨论  38-42
  一、转基因烟草各株系间的CaM表达差异与原因分析  38-39
  二、Tc诱导表达系统的表达渗漏问题  39
  三、诱导表达细胞质CaM／CaMBP对烟草SOD及其同工酶的调控作用  39-41
  四、利用凝胶电泳活性染色方法鉴别转基因烟草SOD同工酶  41-42
Ⅴ 全文总结  42-43
参考文献  43-50
致谢  50

诱导表达细胞CaM/CaMBP对烟草超氧化物歧化酶及其同工酶的调控效应

内容摘要

全文目录

相似论文