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唑来膦酸对胃癌细胞SGC-7901及其耐药株SGC-7901/ADR生物学作用的实验研究

作　者: 郁皓
导　师: 华东
学　校: 苏州大学
专　业: 肿瘤内科
关键词: 唑来膦酸 SGC-7901细胞株 SGC-7901/ADR细胞株 增殖 侵袭力 黏附
分类号: R735.2
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要


目的:探讨唑来膦酸对胃癌SGC-7901细胞及其耐阿霉素SGC-7901/ADR细胞增殖、侵袭和黏附的影响,并进一步研究其与阿霉素的协同抗肿瘤作用。方法:采用MTT法检测不同剂量的唑来膦酸和阿霉素对胃癌细胞SGC-7901及其耐药株SGC-7901/ADR的增殖和细胞黏附作用;Transwell实验分析细胞侵袭能力的变化;ELISA法检测细胞上清液MMP-2、sICAM-1蛋白的变化;Real-time PCR检测MMP-2mRNA、TIMP-2 mRNA、MMP-9 mRNA、ICAM-1 mRNA、CD44 mRNA的表达。结果:①唑来膦酸浓度在10-6、10-5、10-4、10-3mol/l时,作用于胃癌SGC-7901和SGC-7901/ADR细胞48h后,抑制率分别为4.98%、12.19%、27.34%、73.13%和8.30%、9.50%、12.50%、92.1%,各组与空白对照组比较,抑制率均显著升高（P<0.01）,抑制作用随着剂量的升高和时间的延长而增强（P<0.05）。②10-4 mol/l浓度的唑来膦酸（Z）和0.5μg/ml浓度的阿霉素（A）分别以及联合用药（Z+A）作用于两种细胞,观察2h、4h、6h后,黏附率普通株分别为:对照（C）组5.03%、24.38%、59.65%,Z组4.40%、19.77%、51.22%,A组4.28%、18.62%、51.02%,Z+A组为4.02%、15.02%、46.95%;黏附率耐药株分别为:C组2.97%、14.80%、44.32%,Z组2.34%、9.63%、34.73%,A组2.05%、9.70%、33.85%,Z+A组为2.06%、8.47%、31.30%。与各自对照组相比,加入药物后,细胞的黏附能力有不同程度的降低（P<0.05）,且呈时间依赖性。③在研究侵袭能力的实验中,上述浓度的药物作用于两种细胞,每个高倍视野细胞数（个）普通株的C组、Z组、A组、Z+A组分别为:105.11±10.43、98.37±15.75、96.19±9.24、83.02±19.72,耐药株细胞的C组、Z组、A组、Z+A组分别为:103.73±7.84、47.64±9.62、63.47±14.42、21.58±18.57。与对照组比较,单药有减弱普通株细胞侵袭力的趋势,但作用较弱（P>0.05）,联合用药时,细胞的侵袭能力明显下降（P<0.05）,单药对耐药株细胞的侵袭力抑制作用则较强,并且联合用药时表现出协同作用（P<0.01）。④在RT-PCR实验中,以耐药细胞空白对照组作为参考标准,同样的药物浓度和给药方式处理两种细胞,上清液中CD44mRNA表达在普通细胞株的C组、Z组、A组、Z+A组中分别为0.48±0.03、0.26±0.02、0.25±0.02、0.13±0.01,耐药细胞株的C组、Z组、A组、Z+A组分别为1.00±0.02、0.26±0.00、0.47±0.03、0.10±0.01;ICAM-1mRNA表达在普通细胞株的C组、Z组、A组、Z+A组中分别为0.74±0.05、0.55±0.04、0.37±0.03、0.20±0.02,在耐药细胞株的C组、Z组、A组、Z+A组中分别为1.00±0.05、0.89±0.04、0.66±0.03、0.15±0.01;MMP-2mRNA表达在普通细胞株的C组、Z组、A组、Z+A组中分别为0.77±0.09、0.59±0.16、0.74±0.08、0.46±0.05,耐药细胞株的C组、Z组、A组、Z+A组分别为1.00±0.06、0.54±0.27、0.48±0.03、0.22±0.02;MMP-9mRNA表达在普通细胞株的C组、Z组、A组、Z+A组中分别为0.13±0.02、0.11±0.01、0.06±0.00、0.05±0.00,耐药细胞株的C组、Z组、A组、Z+A组分别为1.00±0.04、0.20±0.01、0.39±0.05、0.13±0.01;TIMP-2mRNA表达在普通细胞株的C组、Z组、A组、Z+A组中分别为0.58±0.07、1.15±0.06、0.88±0.10、1.42±0.06,耐药细胞株的C组、Z组、A组、Z+A组中分别为1.00±0.05、2.39±0.11、4.64±0.54、8.38±1.17。结论:唑来膦酸对胃癌细胞株SGC-7901具有一定的抑制增殖、降低细胞黏附和侵袭能力、一定程度上逆转SGC-7901/ADR细胞株对阿霉素的耐药作用,并与阿霉素存在抗肿瘤协同作用。这些作用可能和下调ICAM-1、MMP-2、MMP-9、CD44 mRNA的转录,和上调TIMP-2 mRNA的转录有关。

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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 消化系肿瘤 > 胃肿瘤
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