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辽细辛非挥发性化学成分、质量控制和抗菌活性研究

作　者: 张磊
导　师: 孙立新；毕开顺；陈晓辉
学　校: 沈阳药科大学
专　业: 药物分析学
关键词: 辽细辛 L-细辛脂素 L-芝麻脂素 卡枯醇 96孔板法
分类号: R284
类　型: 硕士论文
年　份: 2008年
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内容摘要


细辛为马兜铃科植物北细辛Asarum heterotropoides Fr.var.mandshuricum（Maxim）Kitaga.、汉城细辛Asarum sieboldii Mip.var.seoulense Nakai或华细辛Asarum rieboldii Mip.的根及根茎,前两种习称辽细辛,是我国传统中药材,收载于《中国药典》2005年版一部,具有祛风散寒、通窍止痛、温肺化饮的功能,用于治疗风寒感冒、头痛鼻塞、风湿痹痛、痰饮喘咳等症。本研究以辽细辛为研究对象,收集了12个不同产地的辽细辛样品,并对其进行化学成分、抑菌活性和含量测定方法的研究。采用硅胶柱层析、凝胶柱层析以及半制备液相等多种色谱分离技术,结合反复重结晶等分离手段,对辽细辛经70%乙醇回流提取后的氯仿层进行了分离纯化,得到了4个化合物。通过理化性质和波谱分析并结合文献数据确定了其中3个化合物的结构,分别为:L-细辛脂素、L-芝麻脂素和卡枯醇。采用纸片法和96孔板法,考察了辽细辛中L-细辛脂素、L-芝麻脂素、卡枯醇、胡萝卜甘和β-谷甾醇对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌和白色念珠菌的抑菌活性,分别测定了此五种化合物对大肠杆菌等五种细菌的最低抑菌浓度（MIC）。结果表明:L-细辛脂素、L-芝麻脂素、卡枯醇、β-谷甾醇对五种细菌均具有较强的抑菌活性,胡萝卜甘没有抑菌活性。本研究所采用的96孔板法用药量少,结果易于观察,为辽细辛化学成分药效学的研究提供了参考。建立了同时测定辽细辛中L-细辛脂素、L-芝麻脂素和卡枯醇含量的反相高效液相色谱分析方法,以Diamonsil C18为色谱柱,流动相为乙腈-水溶液,等度洗脱,检测波长:勾230 nm。L-细辛脂素、L-芝麻脂素和卡枯醇分别在3.50-35.0μg·mL-1（r=0.9997）,1.52-76.0μg·mL-1（r=0.9992）和0.38-7.60μg·mL-1（r=0.9999）范围内呈良好线性关系,回收率分别为99.7%（RSD=2.7%）,96.7%（RSD=1.9%）和97.7%（RSD=1.5%）。结果表明,本方法简便可靠,重复性好,为辽细辛的质量控制提供了方法。采用正交实验设计,对辽细辛提取工艺进行了优化,辽细辛中L-细辛脂素、L-芝麻脂素和卡枯醇的最佳提取工艺为:加入10倍量乙酸乙酯,超声提取3次,每次20 min。

全文目录


摘要  9-10
ABSTRACT  10-12
第一章 前言  12-18
  1.1 辽细辛研究概况  12-15
    1.1.1 辽细辛基源  12-13
    1.1.2 辽细辛本草考证  13
    1.1.3 辽细辛化学成分研究  13-14
    1.1.4 辽细辛药理作用  14-15
  1.2 立题依据  15-16
  1.3 研究思路  16-18
第二章 辽细辛非挥发性化学成分提取分离  18-24
  2.1 辽细辛非挥发性化学成分提取分离流程  19-21
  2.2 化合物结构鉴定  21-22
  2.3 讨论  22-23
  2.4 本章小结  23-24
第三章 辽细辛非挥发性化学成分含量测定方法研究  24-35
  3.1 样品收集及预处理  25
  3.2 辽细辛中L-细辛脂素、L-芝麻脂素和卡枯醇的同时含量测定  25-28
    3.2.1 色谱条件  25-26
    3.2.2 系统适用性实验  26
    3.2.3 溶液的制备  26
    3.2.4 线性关系考察  26
    3.2.5 精密度实验  26-27
    3.2.6 稳定性实验  27
    3.2.7 回收率实验  27
    3.2.8 样品测定  27-28
  3.3 提取工艺优化  28-34
  3.4 讨论  34
  3.5 本章小结  34-35
第四章 辽细辛非挥发性化学成抗菌活性研究  35-44
  4.1 溶液的配制  36-37
    4.1.1 菌悬液的配制  36-37
    4.1.2 供试品溶液的配制  37
  4.2 纸片法测定辽细辛中L-细辛脂素、L-芝麻脂素和卡枯醇的抗菌活性  37-38
  4.3 96孔板法测定L-细辛脂素、L-芝麻脂素和卡枯醇的最低抑菌浓度  38-42
  4.4 讨论  42
  4.5 本章小结  42-44
第五章 结果与讨论  44-46
参考文献  46-48
附录  48-52
硕士在读期间发表论文情况  52

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中图分类: > 医药、卫生 > 中国医学 > 中药学 > 中药化学
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