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长白山姬松茸提取物对MGC-803胃癌细胞株诱导凋亡作用的研究

作　者: 李颖
导　师: 孙抒
学　校: 延边大学
专　业: 病理学与病理生理学
关键词: 长白山姬松茸 MGC-803胃癌细胞株细胞凋亡 Bcl-2蛋白 Bax蛋白
分类号: R285
类　型: 硕士论文
年　份: 2004年
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内容摘要

目的：研究姬松茸乙醇提取物体外对MGC-803胃癌细胞株有诱导细胞凋亡作用，并探讨其作用机制。方法：采用体外细胞培养方法，应用MTT法、集落形成率的测定，检测长白山姬松茸乙醇提取物对MGC-803胃癌细胞株的抗增殖作用；通过倒置显微镜、HE染色以及吖啶橙(AO)／溴化乙锭(EB)荧光染色法，检测长白山姬松茸乙醇提取物对MGC-803细胞的诱导凋亡作用；通过免疫组化(S-P法)检测用药前后凋亡相关基因bcl-2、Bax蛋白表达改变，探讨长白山姬松茸在体外对MGC-803胃癌细胞株诱导凋亡作用的可能机制。结果：(1)通过细胞培养和MTT法，表明长白山姬松茸在体外对MGC-803细胞株有明显的抑制作用，加药组与对照组相比其生长抑制率有显著性差异(P＜0.01)，而且这种抑制作用呈现浓度和时间的依赖性；(2)通过集落形成率的测定结果表明，加药组与对照组相比其集落形成率和集落形成抑制率有明显差异(P＜0.01)，说明长白山姬松茸对MGC-803胃癌细胞株有明显抗增殖作用；(3)光镜观察结果表明，加药组可见细胞脱水浓缩伊红染色增强，胞体缩小，内含高度浓缩的胞核呈深蓝色等典型细胞凋亡形态；经AO／EB荧光染色观察结果表明，当终浓度为1.0mg／ml的姬松茸提取物作用于MGC-803胃癌细胞24h后，其凋亡率和破膜率与自然凋亡率与破膜率相比，均有显著性差异，其凋亡率86.3％(P＜0.001)，破膜率为41.6％(P＜0.01)，说明姬松茸确实有诱导MGC-803胃癌细胞凋亡的作用，同时也有细胞毒作用，但以诱导细胞凋亡为主；(4)免疫组化结果表明，用药前后凋亡相关基因的BCl-2、Bax蛋白均有显著性的改变(P＜0.001)。结论:长白山姬松茸乙醇提取物在体外对人MGc一803胃癌细胞株有显著的诱导细胞凋亡作用，其诱导肿瘤细胞凋亡的可能机制是通过凋亡相关基因Bcl一2、BaS蛋白的表达改变有关。本实验结果为长白山姬松茸作为保健品开发利用以及姬松茸的临床应用和深入研究提供了理论及实验依据。

全文目录

摘要  4-6
Abstract  6-8
前言  8-9
第一章材料与方法  9-13
  1.1 材料  9-10
    1.1.1 细胞株  9
    1.1.2 药物与试剂  9
    1.1.3 主要仪器  9-10
  1.2 方法  10-12
    1.2.1 体外细胞培养  10
    1.2.2 检测MGC-803胃癌细胞株存活率  10
    1.2.3 体外细胞药物处理  10
    1.2.4 体外细胞抑制作用观察  10-11
    1.2.5 对MGC-803胃癌细胞株诱导凋亡作用的探讨  11-12
  1.3 统计学处理  12-13
第二章结果  13-17
  2.1 体外对MGC-803胃癌细胞株的生长抑制作用  13
  2.2 集落形成率测定结果  13-14
  2.3 倒置显微镜观察结果  14
  2.4 HE染色下观察结果  14
  2.5 AO／EB染色观察结果  14-16
  2.6 测定凋亡相关基因Bcl-2、Bax蛋白的表达水平  16-17
第三章讨论  17-21
  3.1 姬松茸醇提取物对MGC-803胃癌细胞株的抗增殖作用  17-18
  3.2 姬松茸醇提取物在体外引起MGC-803细胞的形态学改变  18-19
  3.3 姬松茸提取物诱导MGC-803细胞凋亡机制的探讨  19-21
第四章结论  21-22
致谢  22-23
参考文献  23-25
附图  25-29
附: 综述  29-36
参考文献  36-37

长白山姬松茸提取物对MGC-803胃癌细胞株诱导凋亡作用的研究

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