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防己诺林碱抑制前列腺癌PC-3细胞增殖的机制研究
作 者: 黄建国
导 师: 何光源
学 校: 华中科技大学
专 业: 生物制药工程
关键词: 防己诺林碱 前列腺癌PC-3细胞 裸鼠模型 细胞凋亡
分类号: R737.25
类 型: 硕士论文
年 份: 2010年
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内容摘要
粉防己(fenfangji),Radix Stephaniae Tetrandrae,别名汉房己,白木香,为房己科植物石蟾蜍Stephania Tetrandra S. Moore的根。含多种异喹啉生物碱,主要药用成分为粉防己碱(tetrandrine)和防己诺林碱(fangchinoline)。其目前主要的功效有利水消肿,祛风止痛。用于水肿脚气,小便不利,风湿痹痛,湿疹疮毒,高血压症。目前研究发现粉防己碱能显著抑制肿瘤细胞增殖,因此具有很好的药物开发价值。但是对其结构非常相似的防己诺林碱的抗肿瘤研究则相对甚少,本文将以人类前列腺癌PC-3细胞为研究材料,应用RT-PCR,Western blotting以及裸鼠模型等实验方法研究防己诺林碱对PC-3细胞的增殖影响,主要研究结果包括以下几个方面:1)防己诺林碱具有剂量和时间依赖性地抑制前列腺癌PC-3细胞增殖的作用。MTT实验显示分别用10、20、30μm/ml防己诺林碱处理PC-3细胞1-4天后,30μm/ml防己诺林碱处理细胞4天后的抑制效果最好,达到86%抑制率;通过对细胞周期研究发现30μm/ml防己诺林碱处理PC-3细胞1天后,PC-3细胞明显被阻断在G1/S期。Western blotting结果则进一步证实防己诺林碱能调节PC-3细胞中细胞周期相关蛋白Cyclin D1、p27以及PCNA的表达。30μm/ml防己诺林碱处理PC-3细胞1天后,参与细胞周期G1/S期的Cyclin D1和PCNA明显下降,而抑制细胞增殖的p27蛋白表达量显著性上升。2) Western blotting检测PC-3细胞在经过防己诺林碱处理后,细胞内参与细胞凋亡的相关蛋白的表达量变化。PC-3细胞在30μm/ml防己诺林碱处理1天后,细胞内的促凋亡蛋白Bax和激活型Caspase-3蛋白表达量都显著上升,同时抗细胞凋亡的Bcl-2蛋白表达量则显著下降。3)本文构建裸鼠模型来进一步验证防己诺林碱的抑制肿瘤生长效果,结果显示连续用防己诺林碱处理16天的裸鼠体内的肿瘤生长明显被抑制,抑制率为57.8%。Western blotting检测到相关细胞周期调控蛋白以及凋亡蛋白表达量都发生显著变化。Cyclin D1和PCNA mRNA以及蛋白水平都下降,而p27的蛋白水平明显上升。促凋亡蛋白Bax和激活型Caspase-3蛋白表达量也显著上升,同时抑制细胞凋亡蛋白Bcl-2相应下降。以上结果表明,防己诺林碱有可能成为前列腺癌治疗的一种潜在的药物。
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全文目录
摘要 4-6 Abstract 6-9 1 绪论 9-21 1.1 前列腺癌发病机制 9-12 1.2 中晚期前列腺癌治疗方案 12-15 1.3 抗肿瘤中药的研究 15-17 1.4 治疗中晚期前列腺癌的中药研究进展 17-19 1.5 防己诺林碱抗肿瘤机制研究进展 19-21 2 防己诺林碱抑制前列腺癌PC-3 细胞增殖 21-33 2.1 实验材料 21 2.2 实验方法 21-27 2.3 结果 27-31 2.4 讨论 31-33 3 防己诺林碱促使PC-3 细胞凋亡 33-40 3.1 实验材料 33 3.2 实验方法 33-36 3.3 结果 36-38 3.4 讨论 38-40 4 防己诺林碱抑制肿瘤生长 40-46 4.1 实验材料 40 4.2 实验方法 40-41 4.3 结果 41-44 4.4 讨论 44-46 5 总结与展望 46-48 5.1 课题总结 46-47 5.2 课题展望 47-48 致谢 48-49 参考文献 49-56 附录1 攻读硕士学位期间发表的论文目录 56
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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 泌尿生殖器肿瘤 > 男性生殖器肿瘤 > 前列腺肿瘤
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