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大豆肽的制备及其免疫调节作用的研究

作　者: 国明明
导　师: 华欲飞
学　校: 江南大学
专　业: 粮食、油脂及植物蛋白工程
关键词: 大豆肽水解正电荷肽免疫衰老
分类号: R392
类　型: 硕士论文
年　份: 2007年
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内容摘要

论文主要研究大豆肽的制备及其免疫调节功能,并初步探讨大豆肽免疫活性与其电荷及相对分子质量之间的关系。通过单因素实验制备了不同水解条件下水解的大豆肽,采用SP—Sephadex C-25阳离子交换树脂测定水解肽正电荷肽含量,高效液相测定其相对分子质量的分布,发现水解肽的相对分子质量主要集中在1000以下,说明小肽是水解物中的主要成分。通过淋巴细胞增殖和巨噬细胞吞噬中性红实验,测得大豆肽对小鼠淋巴细胞增殖和巨噬细胞吞噬能力均有一定的促进作用,且大豆肽免疫活性大小与正电荷肽含量的相关性较好,而与平均分子量的相关性不大。其中,Alcalase为水解酶,酶用量为o.02g/g蛋白,底物浓度为5%,温度60℃,pH值8.0,水解时间225min,活性最高。通过给昆明种雄性小鼠(5.6周龄)连续3 d注射40mg/Kg的环磷酰胺,并灌胃16mg/Kg、40mg/Kg、80mg/Kg的大豆肽,发现大豆肽不仅能显著提高正常小鼠免疫功能,而且能显著提高环磷酰胺致免疫低下小鼠的脏器指数,提高脾脏淋巴细胞转化率、抗体生成细胞含量及血清溶血素含量(P<0.05)。用60mg/Kg的D-半乳糖连续42 d腹腔注射昆明种雄性小鼠(5.6周龄),同时灌胃16mg/Kg、40mg/Kg的大豆肽,结果表明,不同剂量大豆肽均能提高小鼠脏器指数,脾脏淋巴细胞转化率、抗体生成细胞含量及血清溶血素含量。

全文目录

摘要  3-4
Abstract  4-8
第一章绪论  8-15
  1.1 免疫系统及免疫应答简述  8
  1.2 免疫活性肽概述  8-11
    1.2.1 食物来源的免疫活性肽  9-10
    1.2.2 免疫活性肽的制备  10
    1.2.3 免疫活性肽的功能性评价方法  10-11
  1.3 大豆肽概述  11-13
    1.3.1 大豆肽的化学组成  11
    1.3.2 大豆肽的理化特性  11
    1.3.3 大豆肽的营养功能  11-12
    1.3.4 大豆肽的生理功能  12-13
  1.4 大豆活性肽的发展现状及前景  13
  1.5 课题的立题背景及意义  13-14
  1.6 课题的研究内容  14-15
第二章酶水解大豆蛋白制备大豆肽的研究  15-25
  2.1 引言  15
  2.2 实验材料及设备  15-16
    2.2.1 实验材料  15
    2.2.2 实验设备  15-16
  2.3 测定方法  16-17
    2.3.1 蛋白质含量的测定  16
    2.3.2 水解度（DH）的测定  16
    2.3.3 蛋白水分的测定  16
    2.3.4 大豆蛋白的制备  16
    2.3.5 大豆蛋白酶水解方法  16-17
    2.3.6 三氯乙酸氮溶解指数(TCA－NSI)的测定  17
    2.3.7 水解蛋白得率的测定  17
    2.3.8 相对分子质量分布的测定  17
    2.3.9 水解物氨基酸组成分析  17
  2.4 结果与讨论  17-24
    2.4.1 底物种类对水解的影响  17-18
    2.4.2 酶种类对水解的影响  18-20
    2.4.3 酶底物比和水解时间对水解的影响  20-21
    2.4.4 底物浓度水解的影响  21
    2.4.5 温度对水解的影响  21-22
    2.4.6 pH 对水解的影响  22-23
    2.4.7 水解物的相对分子质量分布  23-24
    2.4.8 水解物的氨基酸分析  24
  2.5 本章小结  24-25
第三章大豆肽免疫活性及其与电荷及相对分子质量关系的研究  25-34
  3.1 引言  25
  3.2 材料及设备  25-26
    3.2.1 实验材料  25
    3.2.2 实验仪器  25-26
  3.3 实验方法  26
    3.3.1 带正电荷肽相对含量的测定  26
    3.3.2 相对分子质量分布的测定  26
    3.3.3 淋巴细胞增殖实验（MTT 法）  26
    3.3.4 中性红吞噬实验  26
  3.4 结果与讨论  26-32
    3.4.1 正电荷肽含量的测定  26-28
    3.4.2 相对分子质量的测定  28-29
    3.4.3 大豆肽对正常小鼠脾淋巴细胞增殖的影响  29-30
    3.4.4 正电荷肽含量对正常小鼠脾淋巴细胞增殖的影响  30
    3.4.5 平均分子量对正常小鼠脾淋巴细胞增殖的影响  30-31
    3.4.6 大豆肽对正常小鼠巨噬细胞吞噬能力的影响  31-32
    3.4.7 正电荷肽的含量对正常小鼠巨噬细胞吞噬能力的影响  32
    3.4.8 平均分子量对正常小鼠巨噬细胞吞噬能力的影响  32
  3.5 本章小结  32-34
第四章大豆肽对环磷酰胺致免疫低下小鼠的调节作用  34-39
  4.1 引言  34
  4.2 材料及设备  34-35
    4.2.1 实验材料  34-35
    4.2.2 实验仪器  35
  4.3 实验方法  35-36
    4.3.1 免疫低下模型的设计  35
    4.3.2 检测指标  35-36
  4.4 结果与讨论  36-38
    4.4.1 大豆肽对小鼠形态的影响  36
    4.4.2 大豆肽对小鼠胸腺指数、脾脏指数的影响  36
    4.4.3 大豆肽对小鼠淋巴细胞增殖作用的影响  36-37
    4.4.4 大豆肽对小鼠抗体生成细胞的影响  37-38
    4.4.5 大豆肽对小鼠血清溶血素的影响  38
  4.5 本章小结  38-39
第五章大豆肽对D-半乳糖致衰老小鼠的免疫调节作用  39-43
  5.1 引言  39
  5.2 材料及设备  39-40
    5.2.1 实验材料  39
    5.2.2 实验仪器  39-40
  5.3 实验方法  40
    5.3.1 衰老模型的建立  40
    5.3.2 检测指标  40
  5.4 结果与讨论  40-42
    5.4.1 大豆肽对小鼠胸腺指数、脾脏指数的影响  40-41
    5.4.2 大豆肽对小鼠淋巴细胞增殖作用的影响  41
    5.4.3 大豆肽对小鼠抗体生成细胞的影响  41-42
    5.4.4 大豆肽对小鼠血清溶血素的影响  42
  5.5 本章小结  42-43
结论  43-44
致谢  44-45
参考文献  45-48
攻读硕士期间发表的相关论文  48

大豆肽的制备及其免疫调节作用的研究

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