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银杏叶提取物对大强度运动小鼠抗氧化能力和免疫功能的影响

作　者: 赵婉辰
导　师: 牛英鹏
学　校: 河南大学
专　业: 运动人体科学
关键词: 银杏叶提取物自由基抗氧化免疫细胞因子
分类号: R285.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

目的:随着科技的发展,银杏叶提取物越来越广泛地被应用于人类的保健及临床医疗等领域。其特殊的化学成分以及其特有的清除自由基的功效越来越受到重视,而提高运动员抗氧化能力、维持正常的免疫机能,成为提高运动能力的重要措施。本研究试图通过动物实验,探讨银杏叶提取物对大强度运动后小鼠抗氧化能力和免疫功能的影响,为银杏叶提取物在改善运动员大强度运动训练后造成的机体抗氧化能力下降和免疫抑制的应用方面提供参考,也为银杏叶提取物的深度开发利用提供理论依据。方法:将32只8周龄的C57BL/6小鼠随机分为4组:安静对照组6只(C)、单纯灌药组8只(G)、大强度运动组8只(HS)、大强度运动灌药组10只(HS+G)。安静对照组既不灌药也不运动,单纯灌药组每天通过灌胃给予一定剂量的银杏叶提取物,大强度运动组每天进行大强度运动训练,大强度运动灌药组既进行大强度运动训练又给予与灌药组同样剂量的银杏叶提取物。所有小鼠分笼饲养,国家标准固体混合饲料自由饮食。8周实验后提取各组小鼠血清,-20℃保存,检测MDA、SOD、T-AOC等指标。同时打开小鼠腹腔,取脾器官,进行脾淋巴细胞悬液的制备,RT-PCR检测基因IL-2的表达情况,流式细胞术检测淋巴细胞凋亡及IL-10表达情况。结果:1.血清MDA的活性:与C组相比,HS组小鼠MDA含量升高,有极显著差异性(P<0.01);HS+G组小鼠MDA含量稍有升高,差异性不显著(P>0.05);G组小鼠MDA含量降低,差异性不显著(P>0.05);和HS组相比,HS+G组MDA含量升高幅度较小,具有显著性差异,(P<0.05)。与HS组相比,HS+G组小鼠MDA含量降低,差异性极显著(P<0.01)。2. T-AOC和SOD的活性:与C组相比,HS组小鼠SOD含量明显降低,有显著差异性(P<0.05);HS+G组小鼠SOD含量升高,差异性显著(P<0.05);G组小鼠SOD含量明显升高,差异性极显著(P<0.01);和HS组相比,HS+G组SOD升高,具有极显著性差异,(P<0.01)。与HS组相比,HS+G组小鼠SOD含量升高,差异性极显著(P<0.01)。与C组相比,HS组小鼠T-AOC含量明显降低,差异性极显著(P<0.01),HS+G组小鼠T-AOC含量升高,差异性显著(P<0.05),G组小鼠T-AOC含量显著升高,具有极显著差异性(P<0.01);和HS组相比,HS+G组T-AOC含量显著升高,差异性极显著(P<0.01)。3. IL-2的表达量:与C组相比,HS组脾淋巴细胞中IL-2的含量明显降低,差异性极显著(P<0.01),HS+G组IL-2的含量下降,差异性显著(P<0.05),G组IL-2含量的变化没有显著变化,差异性不显著(P>0.05)。与HS组相比,HS+G组脾淋巴细胞中IL-2的含量明显升高,差异性极显著(P<0.01)。4. IL-10的表达量:与C组相比,HS组脾淋巴细胞IL-10含量明显升高,差异性极显著(P<0.01),HS+G组IL-10的含量升高,但差异不显著(P>0.05),G组脾淋巴细胞IL-10的含量降低,差异性不显著(P>0.05)。与HS相比,HS+G组IL-10的含量降低,差异性极显著(P<0.01)。5.脾淋巴细胞凋亡情况:与C组相比,HS组细胞凋亡数量明显增加,经分析,差异性极显著(P<0.01),HS+G组细胞凋亡数量明显增加,差异性极显著(P<0.01),G组脾淋巴细胞凋亡数量减少,有显著差异性(P<0.05)。与HS组相比,HS+G组小鼠细胞凋亡数量明显减少,差异性极显著(P<0.01)结论:1.EGB能降低大强度运动小鼠血清MDA含量,减少自由基对细胞的损伤作用。2.EGB能在一定程度上提高大强度运动小鼠血清SOD和T-AOC活性,改善由大强度运动造成的自由基代谢紊乱,提高机体抗氧化能力。3.EGB可作为外源性抗氧化剂,能改善大强度运动引起的自由基堆积,避免自由基代谢紊乱,从而改善大强度运动小鼠脾淋巴细胞的凋亡情况,有利于提高机体的免疫功能。4.EGB使大强度运动小鼠脾淋巴细胞因子IL-2增加而免疫抑制因子IL-10明显降低,提示EGB可改善大强度运动导致的机体免疫功能下降状况。

全文目录

中文摘要  3-5
ABSTRACT  5-11
1 引言  11-13
2 文献综述  13-24
  2.1 银杏叶的生物学特征及其分布  13
  2.2 银杏叶提取物的主要成分和药理作用  13-16
    2.2.1 银杏叶提取物的主要成分  14-15
    2.2.2 银杏叶提取物的主要药理作用  15-16
      2.2.2.1 抗氧化、清除自由基  15
      2.2.2.2 抗血小板活化因子（PAF）  15
      2.2.2.3 提高机体免疫功能  15-16
      2.2.2.4 对中枢神经系统的作用  16
      2.2.2.5 改善心脑血管疾病  16
  2.3 EGB 的临床研究  16-17
  2.4 运动对自由基的影响  17-18
    2.4.1 自由基的生物学作用  17
    2.4.2 运动与自由基  17-18
  2.5 运动对机体免疫功能的影响  18
    2.5.1 免疫的基本概念  18
    2.5.2 运动与免疫  18
  2.6 运动对细胞因子的影响  18-20
    2.6.1 细胞因子  18-19
    2.6.2 细胞因子的产生  19
    2.6.3 运动与细胞因子  19-20
  2.7 运动与细胞凋亡  20-21
    2.7.1 细胞凋亡  20
    2.7.2 运动与细胞凋亡  20-21
  2.8 测试指标的生物学功能  21-23
    2.8.1 MDA  21
    2.8.2 SOD  21
    2.8.3 T-AOC  21-22
    2.8.4 淋巴细胞  22
    2.8.5 IL-2  22
    2.8.6 IL-10  22-23
  2.9 总结  23-24
3 研究材料和方法  24-33
  3.1 实验对象、喂养和分组  24
  3.2 实验方法  24-26
    3.2.1 EGB 的剂量和有效性  24-25
    3.2.2 各组干预情况  25
    3.2.3 动物训练模型的建立  25
    3.2.4 样本的采集及处理  25-26
  3.3 主要试剂及溶液配制  26-27
    3.3.1 MDA、SOD、T-AOC 的试剂  26
    3.3.2 细胞包内染色主要试剂  26
    3.3.3 溶液配置  26-27
    3.3.4 RT-PCR 主要试剂  27
  3.4 主要仪器设备  27-28
  3.5 实验步骤  28-32
    3.5.1 MDA、 SOD、T-AOC 的检测  28
    3.5.2 小鼠脾淋巴细胞悬液的制备  28-29
    3.5.3 细胞计数  29
    3.5.4 细胞因子胞内染色  29-30
    3.5.5 脾淋巴细胞表面染色程序  30
    3.5.6 引物设计  30
    3.5.7 RNA 的提取  30-31
    3.5.8 逆转录  31
    3.5.9 PCR 扩增  31-32
  3.6 统计学处理  32-33
4 实验结果  33-37
  4.1 EGB 对实验组小鼠体重的影响情况  33
  4.2 SOD、MDA、T-AOC 的检测结果  33-34
  4.3 免疫功能测验结果  34-37
    4.3.1 小鼠实验后小鼠IL-2 含量变化  34-35
    4.3.2 小鼠脾淋巴细胞IL-10 含量的变化  35-36
    4.3.3 各组淋巴细胞凋亡的情况  36-37
5 讨论与分析  37-42
  5.1 EGB 对大强度运动小鼠血清SOD、MDA、T-AOC 含量的影响  37-39
    5.1.1 机体氧化应激的机制  37-38
    5.1.2 EGB 对大强度运动小鼠血清MDA 含量的影响  38
    5.1.3 EGB 对大强度运动小鼠血清血清SOG、T-AOC 含量的影响  38-39
  5.2 EGB 对大强度运动小鼠脾淋巴细胞IL-2、IL-10 的影响  39
  5.3 EGB 对大强度运动小鼠脾淋巴细胞凋亡的影响  39-41
  5.4 结论  41
  5.5 建议  41-42
6 注释  42-45
7 参考文献  45-48
8 附录  48-49
致谢  49-50
个人简历  50

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