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紫茎泽兰中绿原酸提取纯化工艺研究及薇甘菊的化学成分分析

作　者: 宋晓静
导　师: 王俊儒；何兰
学　校: 西北农林科技大学
专　业: 化学生物学
关键词: 紫茎泽兰薇甘菊绿原酸大孔吸附树脂提取纯化
分类号: S451
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

紫茎泽兰(Eupatorium adenophorum Spreng)为上世纪50年代传入我国的恶性杂草,而薇甘菊(Mkania micrantha H.B.K)则在20世纪80年代末传入我国,这两种杂草给我国造成了严重的经济损失,已经引起了社会各界的广泛关注。本文从紫茎泽兰和薇甘菊的全面充分利用以及变废为宝的目的出发,做了如下工作:1.正交实验法优选紫茎泽兰中绿原酸的醇提工艺。2.大孔树脂分离纯化紫茎泽兰中绿原酸的研究,以及绿原酸的精制纯化3.不同部位、不同海拔及不同生长阶段紫茎泽兰中绿原酸含量的变化。4.薇甘菊水提液的GC-MS联用化学成分分析。主要结果如下:1.采用正交试验和单因素试验相结合的方法对紫茎泽兰中绿原酸提取工艺进行了研究,得出了最佳工艺参数。并且确定了提取温度为最主要影响因素,其次是提取液酸度、料液比、提取时间,最后是乙醇浓度。茎和叶部位不同,其绿原酸含量亦不相同,应茎叶混合提取。2.研究大孔吸附树脂纯化紫茎泽兰中绿原酸的最佳工艺条件。本文对12种不同类型大孔吸附树脂对绿原酸的吸附及洗脱性能进行了考察,并以转移率和解析量为指标,对最佳树脂吸附工艺条件进行了筛选。筛选出HPD100型树脂为最佳纯化树脂,并且通过对上样量、上柱流速、pH对吸附量的影响、水洗终点、洗脱剂浓度、洗脱流速、洗脱剂用量的考察得出最佳的吸附及洗脱参数。本试验筛选出的HPD100型大孔吸附树脂综合性能好,适合紫茎泽兰中绿原酸的分离纯化。经HPD100型大孔树脂富集的绿原酸浸膏再经一次硅胶柱层析后,再重结晶,纯度可达98%。该法操作简单,成本低,得到的绿原酸产品纯度高,为绿原酸的工业化生产提供高效、可靠的制备方法。3.本文研究了不同海拔,不同地区以及不同采收季节紫茎泽兰中化学成分绿原酸的动态积累。采用高效液相色谱法测定。得出结果为,紫茎泽兰叶中的绿原酸含量明显高于花和茎中;海拔在1900m以上,紫茎泽兰植株中绿原酸的含量呈下降趋势;花果期(四月份)紫茎泽兰植株绿原酸含量呈高于营养生长期(七月份)的趋势。紫茎泽兰中绿原酸的含量变化与海拔、生长发育阶段及植株部位相关。4.本文首次对薇甘菊水提取液的化学成分进行GC-MS联用技术分析。应用气相色谱-质谱联用法对化学成分进行鉴定,用峰面积归一化法测定各个化合物在水提取物中的相对百分含量。鉴定出116个峰中的59个化合物,占提取物总含量的95.34%。主要化合物为植物甾类,酯类,胺类。另外,还含有杂环化合物和醚类化合物。

全文目录

摘要  6-8
ABSTRACT  8-13
第一章文献综述  13-27
  1.1 恶性杂草的生物学特点、分布及危害  13-14
    1.1.1 紫茎泽兰的生物学特点、分布及危害  13
    1.1.2 薇甘菊的生物学特点、分布及危害  13-14
  1.2 恶性杂草的化学成分、生物活性研究进展  14-16
    1.2.1 紫茎泽兰的化学成分、生物活性研究进展  14-16
    1.2.2 薇甘菊的化学成分、生物活性研究进展  16
  1.3 恶性杂草的利用  16-17
    1.3.1 紫茎泽兰的利用  16-17
    1.3.2 薇甘菊的利用  17
  1.4 绿原酸的结构和性质  17-19
  1.5 绿原酸的提取方法  19-20
    1.5.1 热回流法  19
    1.5.2 超声波提取法  19-20
    1.5.3 微波辅助提取法  20
    1.5.4 超临界提取法  20
    1.5.5 酶促提取法  20
  1.6 绿原酸的分离纯化方法  20-22
    1.6.1 铅盐沉淀法  21
    1.6.2 β-环糊精共沉淀法  21
    1.6.3 絮凝法  21
    1.6.4 正丁醇法  21
    1.6.5 柱层析法  21
    1.6.6 大孔树脂分离法  21-22
    1.6.7 超滤膜分离法  22
    1.6.8 色谱法  22
  1.7 绿原酸分析检测技术  22-25
    1.7.1 紫外分光光度法（UV）  23
    1.7.2 薄层扫描法  23
    1.7.3 流动注射化学发光分析法  23-24
    1.7.4 毛细管区带电泳法  24
    1.7.5 高效液相色谱法  24-25
    1.7.6 仿生传感器测定法  25
  1.8 选题依据和研究目的  25-27
第二章紫茎泽兰中绿原酸的提取、分离纯化工艺研究  27-48
  2.1 紫茎泽兰中绿原酸的醇提工艺研究  27-34
    2.1.1 材料和方法  27-28
    2.1.2 结果与分析  28-33
    2.1.3 结论  33-34
  2.2 大孔树脂分离纯化紫茎泽兰中绿原酸的工艺研究  34-44
    2.2.1 材料、仪器与试剂  34
    2.2.2 方法与结果  34-41
    2.2.3 讨论  41
    2.2.4 正交试验  41-44
    2.2.5 大孔树脂分离纯化绿原酸工艺的进一步优化  44
    2.2.6 讨论  44
  2.3 紫茎泽兰中绿原酸的纯化精制  44-48
    2.3.1 材料、仪器与试剂  44-45
    2.3.2 方法与结果  45-46
    2.3.3 讨论  46-48
第三章不同部位、不同海拔及不同生长阶段紫茎泽兰中绿原酸含量的变化  48-53
  3.1 材料、试剂及仪器  48
    3.1.1 材料  48
    3.1.2 试剂  48
    3.1.3 仪器  48
  3.2 方法与结果  48-52
    3.2.1 色谱条件  48-49
    3.2.2 供试品溶液的制备方法  49
    3.2.3 标准品溶液的制备  49
    3.2.4 线性关系的考察  49-50
    3.2.5 精密度实验  50
    3.2.6 稳定性试验  50
    3.2.7 重复性实验  50
    3.2.8 加样回收率试验  50-51
    3.2.9 样品测定  51-52
  3.3 讨论  52-53
    3.3.1 流动相的组成对分离效果的影响  52-53
第四章薇甘菊的GC-MS 联用化学成分分析  53-58
  4.1 实验材料  53
  4.2 实验试剂  53
  4.3 实验仪器  53
  4.4 样品处理  53
  4.5 GC-MS 分析方法  53-54
  4.6 结果与分析  54-58
第五章结论  58-61
  5.1 紫茎泽兰中绿原酸的乙醇提取工艺  58
  5.2 大孔树脂分离纯化紫茎泽兰中绿原酸的工艺  58-59
  5.3 大孔树脂分离纯化绿原酸工艺的进一步优化  59
  5.4 紫茎泽兰中绿原酸的纯化精制  59
  5.5 不同部位、不同海拔及不同生长阶段紫茎泽兰中绿原酸含量的变化  59
  5.6 薇甘菊的GC-MS 联用化学成分分析  59-61
参考文献  61-69
致谢  69-70
作者简介  70

紫茎泽兰中绿原酸提取纯化工艺研究及薇甘菊的化学成分分析

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