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烟草物料中药用成分的分离纯化及鉴定

作　者: 李少凤
导　师: 陈育如
学　校: 南京师范大学
专　业: 微生物学
关键词: 烟草 绿原酸 分离 LC-MS ~1HNMR
分类号: S572
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要


烟草中含有绿原酸、芸香苷(芦丁)、烟碱和茄尼醇等多种生物活性成分,这些活性成分经提取纯化后有望用于农业、医药、食品、化工等诸多行业。绿原酸具有抗病毒、抗菌、保肝利胆等多种药理作用；芦丁在医药和食品领域作为心血管保护药物及食品中的抗氧化剂等。本工作以废弃烟草为研究对象,对绿原酸的提取和纯化工艺进行了研究,同时提取分离芦丁,相关内容如下：(1)研究了超声波辅助提取烟草中主要药用成分绿原酸的工艺。通过对溶剂种类、浓度、提取时间及温度等因素的试验,确定了适宜的提取条件,在95%乙醇,50℃,60min,pH4和料液比1：10(w:v)的条件下,绿原酸的提取率为92.57%,比较了石油醚萃取与超临界C02萃取去除烟碱的效果,结果表明石油醚萃取对烟碱的去除率为45.5%,对浓缩液还有脱脂的效果。(2)研究了聚酰胺柱层析分离绿原酸的工艺。采用80-100目的聚酰胺材料,在上样液中绿原酸浓度为10mg/mL时,用4BV30%的乙醇洗脱,所分离的绿原酸纯度为27.7%(收率33.8%)；经聚酰胺柱二次分离,绿原酸产品纯度提高到40.7%(收率为49.5%),同时分离出另一种多酚物质,通过热水重结晶精制,经红外光谱和其他方法鉴定,确定为芦丁(纯度94.8%)。(3)采用乙酸乙酯萃取对绿原酸粗品进一步富集分离,使用绿原酸浓度12 mg/mL的料液,经1：3(v：v)体积比萃取2次,萃取得到的绿原酸样品纯度为62%(萃取率72%)。(4)采用常压硅胶柱层析对纯度为62%的绿原酸样品进行精制,在物料比1：30条件下得到纯度为78.2%的绿原酸产品。结合LC-MS技术,1HNMR技术对该绿原酸组成进行分析,结果表明绿原酸(5-CQA)是主要成份(占总绿原酸量的78.2%),同时还存在新绿原酸(3-CQA,1.9%)、隐绿原酸(4-CQA,10.1%)和cis-5-CQA(2.0%)三种绿原酸的同分异构体。通过后续实验的分离,在物料比为1：50的条件下得到更高纯度的绿原酸产品,其中5-CQA含量为89.3%,4-CQA含量为8.4%。

全文目录


摘要  3-4Abstract  4-9第一章 绪论  9-21  1.1 烟草概况  9-10  1.2 烟草多酚  10-17    1.2.1 绿原酸  10-16    1.2.2 芦丁  16-17  1.3 烟碱的结构与性质  17-18  1.4 碳水化合物  18  1.5 蛋白质  18  1.6 课题的意义和内容  18-21    1.6.1 课题的意义  18-20    1.6.2 研究内容  20-21第二章 绿原酸的提取及烟碱的分离  21-27  2.1 材料与方法  22-23    2.1.1 材料与试剂  22    2.1.2 仪器与设备  22    2.1.3 方法  22-23  2.2 结果与分析  23-26    2.2.1 提取溶剂的选择  23-24    2.2.2 提取温度选择  24    2.2.3 提取时间选择  24    2.2.4 脱脂溶剂的确定  24-25    2.2.5 除烟碱  25-26  2.3 小结  26-27第三章 聚酰胺柱层析分离绿原酸  27-35  3.1 材料与方法  28-29    3.1.1 材料与试剂  28    3.1.2 仪器与设备  28    3.1.3 方法  28    3.1.4 聚酰胺吸附量测定  28-29    3.1.5 洗脱试验  29  3.2 结果与分析  29-34    3.2.1 聚酰胺对绿原酸的静态吸附  29    3.2.2 流速对聚酰胺吸附的影响  29-30    3.2.3 洗脱剂乙醇浓度的确定  30-32    3.2.4 层析柱放大  32    3.2.5 未知物的初步分离  32    3.2.6 芦丁的纯化与鉴定  32-34    3.2.7 聚酰胺再生  34  3.3 小结  34-35第四章 乙酸乙酯萃取分离绿原酸  35-40  4.1 材料与设备  36    4.1.1 材料与试剂  36    4.1.2 仪器与设备  36  4.2 实验方法与步骤  36-37  4.3 实验结果与讨论  37-39    4.3.1 乙酸乙酯量对萃取效果的影响  37    4.3.2 混合时间对萃取效果的影响  37-38    4.3.3 萃取次数对萃取效果的影响  38    4.3.4 料液浓度对萃取效果的影响  38-39    4.3.5 萃取条件的验证  39  4.4 小结  39-40第五章 硅胶柱层析纯化绿原酸  40-52  5.1 材料与设备  41    5.1.1 材料与试剂  41    5.1.2 仪器与设备  41  5.2 实验方法  41-42    5.2.1 硅胶活化  41-42    5.2.2 柱层析  42    5.2.3 柱色谱分离与纯化  42    5.2.4 绿原酸产品鉴定  42  5.3 结果与讨论  42-51    5.3.1 吸附剂的选择  42-43    5.3.2 洗脱溶剂及洗脱方式选择  43-45    5.3.3 物料比选择  45-46    5.3.4 绿原酸产品鉴定  46-51  5.4 小结  51-52第六章 结论与展望  52-53参考文献  53-59发表的论文及申请的专利  59-60致谢  60

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中图分类: > 农业科学 > 农作物 > 经济作物 > 烟草（菸草）
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