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桑枝多糖的初步研究

作　者: 王佩香
导　师: 欧阳臻
学　校: 江苏大学
专　业: 生药学
关键词: 桑枝多糖提取纯化单糖组成结构分析抗肿瘤
分类号: R284.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
下　载: 147次
引　用: 3次
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内容摘要

桑枝为桑科植物桑Morus alba L的干燥嫩枝,现代研究表明,桑枝多糖具有降血糖,免疫,抗氧化等药理活性。目前,对桑枝多糖的研究多集中于提取工艺及含量测定方面,而对其多糖的分离纯化、单糖组成及结构的研究迄今未见报道。本论文主要对桑枝水溶性多糖进行分离纯化,并运用TLC、GC、HPLC和IR等现代分析手段对桑枝多糖进行研究,为进一步探讨桑枝多糖的药理作用,以及桑枝多糖的开发利用提供科学依据。主要研究内容和结论如下:1、本论文首次采用响应曲面法对桑枝多糖的提取工艺进行了研究,确定了最佳提取工艺为:提取温度100℃,料液比1:20,浸提时间2.72h,提取2次;采用改良的硫酸—苯酚法测定多糖的含量,测得桑枝多糖的含量为17.28%。2、桑枝经水提醇沉,脱蛋白得到粗多糖RMP,RMP经DEAE—52纤维素柱层析得到RMPd-1和RMPd-2;再经Sephadex G-100凝胶柱层析,得到RMPs-1和RMPs-2两种多糖组分,经HPLC检测为单一对称峰,表明RMPs-1和RMPs-2为均一组分,其相对分子量分别为:5.8×10⁵,6.5×10⁵。3、采用薄层色谱法和气相色谱法对桑枝多糖RMPs-1和RMPs-2的单糖组成进行了分析,结果显示:桑枝多糖RMPs-1由鼠李糖,阿拉伯糖,葡萄糖,半乳糖和半乳糖醛酸组成,其摩尔比为:1.08:1:1.40:1.57:3.80;桑枝多糖RMPs-2由鼠李糖,葡萄糖,半乳糖和半乳糖醛酸组成,其摩尔比为24.0:1:1.34:12.61。4、运用GC、UV、IR、高碘酸氧化和simth降解等现代分析手段首次对桑枝多糖RMPs-1和RMPs-2的理化特性及初步结构进行了研究。结果表明:两者均为浅棕色粉末状固体,无味,易溶于水,不溶于乙醇、丙酮、氯仿等有机溶剂;RMPs-1和RMPs-2中糖醛酸含量分别为25%和34.7%;两种组分的红外光谱图中均未见810cm^-1和870cm^-1处的吸收峰,可能均不含甘露糖,与气相色谱分析的单糖组成结果一致。初步推测,RMPs-1主要以1→2、1→4糖苷键的形式连接鼠李糖、阿拉伯糖、葡萄糖和半乳糖;RMPs-2鼠李糖和葡萄糖主要以1→2或1→4糖苷键形式连接,半乳糖主要以1→3位糖苷键形式连接;刚果红实验结果表明桑枝多糖RMPs-1和RMPs-2都具有一定的三维螺旋结构。5、研究了桑枝多糖RMPs-1和RMPs-2的体外抗肿瘤活性,当桑枝多糖的浓度较低时,RMPs-1和RMPs-2对Hela人宫颈癌细胞的生长呈现促进作用,随着浓度的增大,对该肿瘤细胞的影响逐渐转变为抑制作用,当浓度增大到500μg/mL时,对该肿瘤细胞的抑制率分别为24.98%和29.93%。

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