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小叶丁香抗肝纤维化作用有效成分及工艺研究

作　者: 李利英
导　师: 尹卫平；刘普
学　校: 河南科技大学
专　业: 化学工艺
关键词: 小叶丁香裂环环烯醚萜类化合物大孔吸附树脂色谱法
分类号: R284
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
下　载: 94次
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内容摘要

该研究为进一步考察新药材小叶丁香抗肝纤维化有效成分,深入研究植物小叶丁香花、叶的有效中间体的现代提取分离方法,包括提取工艺和质量标准的研究,并建立了该植物药的指纹图谱,为生产抗肝纤维化保健品和药品提供科学依据。本文建立的小叶丁香抗肝纤维化制剂指纹图谱( HPLC-NNE13C-NMR),是在药理学的指导下,采用正交实验方法,选择6种不同型号的大孔吸附树脂,优化最佳的提取工艺条件。用RP-HPLC法测定新药材主要成分橄榄苦苷的含量,从而确定小叶丁香有效成分提取最佳工艺条件。该法线性关系好,且重现性好,专属性强。色谱条件:KromasilC18(250 mm×4.6 mm,5μm)流动相为乙腈-水(25∶75);检测波长:285 nm;柱温:25℃。进一步比较其它活性成分与标准参照物橄榄苦苷的定量碳谱峰高度比,通过拟建立的HPLC-NNE13C-NMR数模定量计算关系式,确定小叶丁香抗肝纤维化有效部位HPLC-NNE13C-NMR联用指纹图谱。结果表明,该方法作为有效部位和中药制剂的质量控制的新技术是可行的。相比其它中药指纹图谱技术,用以评价产品质量及稳定性,评价生产工艺的合理性更为可靠全面,也为科学评价和有效控制新药材的质量提供了新方法。在最佳工艺的基础上,为了进一步确定小叶丁香抗肝纤维化有效成分化合物的结构及性质,本课题采用反复硅胶柱层析和薄层色谱分析以及高效液相色谱等分析手段,对小叶丁香抗肝纤维化作用的药用物质基础及新工艺的药理药效学进行了深入的研究。进一步的研究共分离得到4个化合物,主要相关有效成分被确认为:裂环烯醚萜类化合物橄榄苦苷(oleuropein)(1)和(8Z)-ligstroside(2),苯乙醇苷类化合物松果菊苷(echinacoside)(3)以及糖类化合物D-甘露醇(4)。其中化合物2,3是首次从小叶丁香中分离得到的化合物。

全文目录

摘要  2-3
ABSTRACT  3-9
第1章绪论  9-29
  1.1 丁香属植物资源的研究进展  9
  1.2 化学成分  9-14
    1.2.1 有机酸类  9
    1.2.2 环烯醚萜类  9-12
    1.2.3 黄酮类化合物  12
    1.2.4 苯丙素酚类  12-13
    1.2.5 黄酮类化合物  13
    1.2.6 苯乙醇类化合物  13-14
    1.2.7 甾醇酯类  14
    1.2.8 其他类成分  14
  1.3 药理作用  14-16
    1.3.1 抗菌消炎作用  14
    1.3.2 抗病毒作用  14-15
    1.3.3 降压降温作用  15
    1.3.4 镇咳祛痰  15
    1.3.5 保肝利胆  15
    1.3.6 增强机体的体液免疫功能  15
    1.3.7 毒性试验  15
    1.3.8 临床用药  15-16
  1.4 小叶丁香研究进展  16-21
    1.4.1 小叶丁香原植物及药理活性  16-17
    1.4.2 环烯醚萜类化合物  17-21
  1.5 肝纤维化的中医病机和治法探讨  21-23
  1.6 大孔吸附树脂在中药现代化中应用  23-27
    1.6.1 大孔树脂的性质及分离原理  23-24
    1.6.2 大孔树脂分离的影响因素  24-25
    1.6.3 大孔树脂的预处理及再生方法  25
    1.6.4 大孔吸附树脂在天然药物有效成分分离、富集中的应用  25-27
  1.7 本章小结  27-29
第2章小叶丁香有效成分工艺研究  29-44
  2.1 主要试剂和仪器  29
  2.2 小叶丁香提取工艺路线研究  29-31
  2.3 实验方法  31-34
    2.3.1 材料  31
    2.3.2 橄榄苦苷含量的测定方法  31-34
  2.4 单因素实验  34-36
    2.4.1 乙醇浓度对提取效果的影响  34-35
    2.4.2 时间对提取效果的影响  35
    2.4.3 料液比对提取效果的影响  35-36
  2.5 提取工艺路线考察  36-37
    2.5.1 浸膏得率测定方法  36
    2.5.2 提取工艺条件的优选  36-37
  2.6 小叶丁香不同部位有效成分含量  37-38
  2.7 分离纯化工艺的考察  38-43
    2.7.1 大孔树脂的预处理  38
    2.7.2 静态吸附与解吸实验  38-40
    2.7.3 AB-8 和D-101 型树脂洗脱剂的选择  40-41
    2.7.4 洗脱剂用量的考察  41-42
    2.7.5 工艺验证  42-43
  2.8 本章小结  43-44
第3章小叶丁香有效部位物质基础研究  44-46
  3.1 植物材料  44
  3.2 有效部位的分离流程  44-45
  3.3 本章小结  45-46
第4章小叶丁香有效成分化合物的结构解析  46-55
  4.1 环烯醚萜类化合物的结构解析  46-51
    4.1.1 化合物1 结构解析  46-48
    4.1.2 药理作用  48-49
    4.1.3 化合物2 结构解析  49-51
  4.2 苯乙醇苷类化合结构解析  51-54
    4.2.1 化合物3 的结构解析  51-53
    4.2.2 药理活性  53-54
  4.3 糖类化合物结构解析  54
  4.4 本章小结  54-55
第5章小叶丁香有效部位质量标准的初步研究  55-62
  5.1 高效液相色谱—核磁共振碳谱联用指纹图谱技术提出  55-59
    5.1.1 指纹图谱研究现状  55-56
    5.1.2 构建指纹图谱的方法  56-57
    5.1.3 指纹图谱的应用  57-58
    5.1.4 面临的问题  58
    5.1.5 HPLC-NNE~(13)C-NMR 指纹图谱  58-59
  5.2 小叶丁香有效部位HPLC-NNE~(13)C-NMR 联用指纹图谱研究  59-61
    5.2.1 HPLC-NNE~(13)C-NMR 联用指纹图谱理论初步研究  59
    5.2.2 小叶丁香抗肝纤维化有效部位HPLC-NNE~(13)C-NMR 联用指纹图谱  59-61
  5.3 本章小结  61-62
第6章实验结果及讨论  62-64
  6.1 小叶丁香有效成分的提取分离  62
  6.2 小叶丁香提取工艺路线的研究  62-64
    6.2.1 提取实验条件的优化  62
    6.2.2 大孔吸附树脂纯化有效成分条件的优化  62-64
参考文献  64-68
附录  68-72
致谢  72-73
攻读硕士学位期间的研究成果  73

小叶丁香抗肝纤维化作用有效成分及工艺研究

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