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IGF-Ⅰ与MGF对骨骼肌卫星细胞增殖及迁移的影响

作　者: 王琼
导　师: 陆耀飞
学　校: 上海体育学院
专　业: 运动人体科学
关键词: 骨骼肌卫星细胞机械生长因子胰岛素样生长因子-1 细胞增殖细胞迁移
分类号: R329
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

MGF组:24h时,15ng/ml组、25ng/ml组、35ng/ml组和45ng/ml组OD值均显著高于对照组(P<0.01,P<0.01,P<0.01,P<0.05),55ng/ml组与对照组无显著差异(P>0.05)。48h时,15ng/ml组、25ng/ml组、35ng/ml组OD值均显著高于对照组(P<0.05,P<0.01,P<0.01), 45ng/ml组、55ng/ml组与对照组之间无显著差异(P>0.05)。72h时,15ng/ml、25ng/ml组、35ng/ml组OD值均显著高于对照组(P<0.01),45ng/ml组与对照组之间无显著差异(P>0.05)。而55ng/ml组OD值低于对照组(P<0.05)。96h时,15ng/ml、25ng/ml组、35ng/ml组与对照组之间差异没有显著性(P>0.05)。4. Transwell法测定细胞迁移的OD值显示。IGF-I组:15ng/ml组、35ng/ml组与对照组之间的无显著差异(P>0.05);25ng/ml、45ng/ml组、55ng/ml组OD值均显著高于对照组(P<0.01),其中25ng/ml组显著高于45ng/ml组(P<0.01),55ng/ml组与45ng/ml组之间的无显著差异(P>0.05)。MGF组:15ng/ml组、35ng/ml组与对照组之间无显著差异(P>0.05);25ng/ml、45ng/ml组、55ng/ml组OD值显著高于对照组(P<0.01),其中45ng/ml组和55ng/ml组均显著高于25ng/ml组(P<0.01,P<0.05)。结论1. IGF-I和MGF均可以促进骨骼肌卫星细胞增殖且呈浓度、时间依赖性,IGF-I最佳促增殖浓度为15ng/ml-35ng/ml , MGF最佳促增殖浓度为25ng/ml-35ng/ml,干预24h后即开始增殖。2. IGF-I和MGF均可以促进骨骼肌卫星细胞迁移,IGF-I促迁移的最佳浓度为25ng/ml,MGF最佳浓度为45ng/ml-55ng/ml。MGF组:24h时,15ng/ml组、25ng/ml组、35ng/ml组和45ng/ml组OD值均显著高于对照组(P<0.01,P<0.01,P<0.01,P<0.05),55ng/ml组与对照组无显著差异(P>0.05)。48h时,15ng/ml组、25ng/ml组、35ng/ml组OD值均显著高于对照组(P<0.05,P<0.01,P<0.01), 45ng/ml组、55ng/ml组与对照组之间无显著差异(P>0.05)。72h时,15ng/ml、25ng/ml组、35ng/ml组OD值均显著高于对照组(P<0.01),45ng/ml组与对照组之间无显著差异(P>0.05)。而55ng/ml组OD值低于对照组(P<0.05)。96h时,15ng/ml、25ng/ml组、35ng/ml组与对照组之间差异没有显著性(P>0.05)。4. Transwell法测定细胞迁移的OD值显示。IGF-I组:15ng/ml组、35ng/ml组与对照组之间的无显著差异(P>0.05);25ng/ml、45ng/ml组、55ng/ml组OD值均显著高于对照组(P<0.01),其中25ng/ml组显著高于45ng/ml组(P<0.01),55ng/ml组与45ng/ml组之间的无显著差异(P>0.05)。MGF组:15ng/ml组、35ng/ml组与对照组之间无显著差异(P>0.05);25ng/ml、45ng/ml组、55ng/ml组OD值显著高于对照组(P<0.01),其中45ng/ml组和55ng/ml组均显著高于25ng/ml组(P<0.01,P<0.05)。结论1. IGF-I和MGF均可以促进骨骼肌卫星细胞增殖且呈浓度、时间依赖性,IGF-I最佳促增殖浓度为15ng/ml-35ng/ml , MGF最佳促增殖浓度为25ng/ml-35ng/ml,干预24h后即开始增殖。2. IGF-I和MGF均可以促进骨骼肌卫星细胞迁移,IGF-I促迁移的最佳浓度为25ng/ml,MGF最佳浓度为45ng/ml-55ng/ml。

全文目录

中文摘要  4-6
ABSTRACT  6-8
英文名词缩略词表  8-11
1 前言  11-12
2 文献综述  12-17
  2.1 运动性骨骼肌损伤  12-13
    2.1.1 骨骼肌损伤产生机制  12-13
    2.1.2 骨骼肌急性损伤的病理  13
    2.1.3 骨骼肌慢性损伤的病理（光镜组织组化）  13
  2.2 骨骼肌的修复与再生  13-14
  2.3 卫星细胞的激活与增殖  14
  2.4 IGF 对骨骼肌再生的影响  14-15
  2.5 MGF 对骨骼肌再生的影响  15-17
    2.5.1 MGF 产生机制  15-16
    2.5.2 MGF 的功能  16
    2.5.3 MGF 与骨骼肌再生  16-17
3 研究对象与方法  17-25
  3.1 实验动物  17
  3.2 实验技术路线  17
  3.3 主要实验仪器  17-18
  3.4 主要实验试剂  18
  3.5 主要实验试剂配制方法  18-20
  3.6 骨骼肌卫星细胞提取及原代培养  20-21
    3.6.1 消毒与取材  20-21
    3.6.2 卫星细胞提取及原代培养  21
  3.7 骨骼肌卫星细胞传代培养  21
  3.8 骨骼肌卫星细胞活力测定—台盼蓝染色法  21-22
    3.8.1 原理  21-22
    3.8.2 步骤  22
  3.9 骨骼肌卫星细胞纯度鉴定  22
  3.10 IGF-I 与MGF 对骨骼肌卫星细胞增殖及迁移影响的测定方法  22-24
    3.10.1 分组  22-23
    3.10.2 CCK-8 测定骨骼肌卫星细胞增殖能力  23
      3.10.2.1 实验原理  23
      3.10.2.2 实验步骤  23
    3.10.3 Transwell 测定骨骼肌卫星细胞迁移作用  23-24
  3.11 统计学处理  24-25
4 实验结果  25-38
  4.1 骨骼肌卫星细胞活细胞计数  25
  4.2 骨骼肌卫星细胞形态变化  25-28
  4.3 骨骼肌卫星细胞的鉴定和纯化  28-29
  4.4 IGF-I 与MGF 条件下骨骼肌卫星细胞增殖的变化  29-34
    4.4.1 不同浓度IGF-I 条件下骨骼肌卫星细胞增殖的变化  29-31
    4.4.2 不同浓度MGF 条件下骨骼肌卫星细胞增殖的变化  31-34
  4.5 IGF-I 与MGF 条件下骨骼肌卫星细胞迁移的变化  34-38
    4.5.1 不同浓度IGF-I 条件下骨骼肌卫星细胞迁移的变化  34-36
    4.5.2 不同浓度MGF 条件下骨骼肌卫星细胞迁移的变化  36-38
5 分析与讨论  38-42
  5.1 骨骼肌卫星细胞的原代培养  38-39
  5.2 骨骼肌卫星细胞的鉴定  39
  5.3 IGF-I 与MGF 对骨骼肌卫星细胞增殖的影响  39-40
  5.4 IGF-I 与MGF 对骨骼肌卫星细胞迁移的影响  40-42
6 结论  42
7 参考文献  42-47
8 致谢  47

IGF-Ⅰ与MGF对骨骼肌卫星细胞增殖及迁移的影响

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